| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-33页 |
| 1.1 文献综述 | 第11-32页 |
| 1.1.1 荧光性假单胞菌的简介和主要类群 | 第11-13页 |
| 1.1.2 荧光假单胞菌的生防机制 | 第13-18页 |
| 1.1.3 抗生素2,4-DAPG的相关研究 | 第18-25页 |
| 1.1.4 OprF的研究进展 | 第25-28页 |
| 1.1.5 SigX的研究进展 | 第28-32页 |
| 1.2 研究目的和意义 | 第32页 |
| 1.3 研究内容 | 第32-33页 |
| 第二章 菌株2P24中抗生素2,4-DAPG上游调控因子的筛选及oprF和sigX缺失突变体生防性状的研究 | 第33-57页 |
| 2.1 材料和方法 | 第33-44页 |
| 2.1.1 菌株、载体及培养条件 | 第33-35页 |
| 2.1.2 培养基与试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.3 DNA操作方法 | 第36-39页 |
| 2.1.4 Tn5转座子插入筛选2,4-DAPG上游调控基因 | 第39-40页 |
| 2.1.5 oprF和sigX基因的遗传操作 | 第40-41页 |
| 2.1.6 oprF和sigX突变体生防相关性状的检测 | 第41-44页 |
| 2.2 结果与分析 | 第44-53页 |
| 2.2.1 菌株2P24抗生素2,4-DAPG上游调控基因的筛选和克隆 | 第44-46页 |
| 2.2.2 ΔoprF、ΔsigX突变体的构建及相关生防性状的检测 | 第46-53页 |
| 2.3 讨论 | 第53-57页 |
| 第三章 基因oprF和sigX相互调控作用研究 | 第57-71页 |
| 3.1 材料和方法 | 第57-65页 |
| 3.1.1 菌株、载体及培养条件 | 第57-58页 |
| 3.1.2 试剂材料 | 第58-59页 |
| 3.1.3 DNA操作方法 | 第59-61页 |
| 3.1.4 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第61-62页 |
| 3.1.5 RNA操作和RT-qPCR | 第62-64页 |
| 3.1.6 Western blotting | 第64-65页 |
| 3.2 结果与分析 | 第65-68页 |
| 3.2.1 oprF和sigX基因阅读框和基因间序列分析 | 第65-66页 |
| 3.2.2 SigX在转录水平正调控oprF基因的表达 | 第66-67页 |
| 3.2.3 oprF和sigX基因在oprF突变体中的表达改变 | 第67-68页 |
| 3.3 讨论 | 第68-71页 |
| 第四章 oprF和sigX基因调控2,4-DAPG产量的机制研究 | 第71-84页 |
| 4.1 材料和方法 | 第71-76页 |
| 4.1.1 菌株、载体及培养条件 | 第71-72页 |
| 4.1.2 β-半乳糖苷酶的测定 | 第72页 |
| 4.1.3 RNA操作和RT-qPCR | 第72页 |
| 4.1.4 染色体accABCD基因VSV蛋白标签的构建 | 第72-74页 |
| 4.1.5 Western Blotting | 第74页 |
| 4.1.6 辅酶A类化合物的提取 | 第74-75页 |
| 4.1.7 HPLC-ESI-MS检测辅酶A类化合物 | 第75-76页 |
| 4.2 结果与分析 | 第76-81页 |
| 4.2.1 oprF基因负调控phlA基因转录 | 第76页 |
| 4.2.2 基因oprF和sigX对phl合成基因簇的相关调控因子的影响 | 第76-78页 |
| 4.2.3 基因oprF和sigX在底物水平调控抗生素2,4-DAPG产量 | 第78-81页 |
| 4.3 讨论 | 第81-84页 |
| 第五章 SigX诱导条件的相关研究 | 第84-99页 |
| 5.1 材料和方法 | 第84-88页 |
| 5.1.1 菌株、载体及培养条件 | 第84-85页 |
| 5.1.2 试剂材料 | 第85-86页 |
| 5.1.3 sigX基因染色体融合β-内酰胺酶报告的构建 | 第86-87页 |
| 5.1.4 头孢硝噻吩显色反应测定β-内酰胺酶活性 | 第87页 |
| 5.1.5 PM系统操作 | 第87-88页 |
| 5.2 结果与分析 | 第88-96页 |
| 5.2.1 sigX基因转录报告菌株的构建 | 第88-89页 |
| 5.2.2 sigX基因诱导表达条件初步筛选 | 第89-94页 |
| 5.2.3 sigX基因诱导表达条件复筛和PG检测 | 第94-96页 |
| 5.3 讨论 | 第96-99页 |
| 第六章 结论和讨论 | 第99-103页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 附录1 | 第117-120页 |
| 附录2 | 第120-127页 |
| 附录3 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 作者简介 | 第129页 |
