| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 流感病毒的生物学特性 | 第14-16页 |
| 1.1.1 流感病毒的形态 | 第14-15页 |
| 1.1.2 流感病毒的复制 | 第15-16页 |
| 1.2 流感病毒HA、NA、M基因与蛋白的功能 | 第16-18页 |
| 1.2.1 血凝素HA | 第16-17页 |
| 1.2.2 神经氨酸酶NA | 第17页 |
| 1.2.3 基质蛋白M | 第17-18页 |
| 1.3 流感病毒的变异 | 第18-19页 |
| 1.3.1 抗原漂移 | 第18页 |
| 1.3.2 基因重排 | 第18-19页 |
| 1.4 反向遗传学 | 第19-20页 |
| 1.5 包装信号 | 第20页 |
| 1.6 蝙蝠流感的现状 | 第20-21页 |
| 1.7 H9N2禽流感的现状 | 第21-22页 |
| 1.8 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 重组嵌合蝙蝠流感病毒的生物学特性研究 | 第23-42页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 细胞、菌液、鸡胚和小鼠 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 嵌合蝙蝠流感病毒的重组与拯救 | 第24-29页 |
| 2.2.2 重组病毒血凝实验(HA)初步鉴定 | 第29页 |
| 2.2.3 重组病毒基因测序鉴定 | 第29-31页 |
| 2.2.4 重组嵌合蝙蝠流感病毒在细胞上的生物学特性 | 第31页 |
| 2.2.5 重组嵌合蝙蝠流感病毒在动物体内的生物学特性 | 第31-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-40页 |
| 2.3.1 嵌合蝙蝠流感病毒表面基因质粒的构建结果 | 第33-34页 |
| 2.3.2 转染后细胞病变结果 | 第34页 |
| 2.3.3 重组病毒扩增及HA鉴定结果 | 第34-35页 |
| 2.3.4 重组病毒基因组PCR结果并测序鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.5 病毒滴度TCID_(50)的测定结果 | 第36页 |
| 2.3.6 病毒在MDCK、DF1细胞上的生长曲线结果 | 第36-37页 |
| 2.3.7 病毒对小鼠致病性的结果 | 第37-40页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第40-42页 |
| 2.4.1 讨论 | 第40-41页 |
| 2.4.2 小结 | 第41-42页 |
| 3 蝙蝠流感病毒与H9N2禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较 | 第42-58页 |
| 3.1 材料 | 第42-43页 |
| 3.1.1 载体、质粒、细胞和病毒 | 第42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.3 抗体 | 第43页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第43页 |
| 3.2 方法 | 第43-49页 |
| 3.2.1 M1、M2氨基酸比对 | 第43-44页 |
| 3.2.2 M1、M2原核表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 3.2.3 M1、M2真核表达载体的构建 | 第46页 |
| 3.2.4 M1、M2原核诱导表达 | 第46-47页 |
| 3.2.5 M1、M2原核诱导表达鉴定方法 | 第47-48页 |
| 3.2.6 M1、M2真核转染表达与病毒感染 | 第48-49页 |
| 3.2.7 间接免疫荧光(IFA)检测 | 第49页 |
| 3.3 结果 | 第49-56页 |
| 3.3.1 M1、M2氨基酸进化树 | 第49-52页 |
| 3.3.2 M1、M2重组质粒的构建与鉴定 | 第52页 |
| 3.3.3 M1、M2原核表达蛋白考马斯亮蓝染色鉴定 | 第52-53页 |
| 3.3.4 M1、M2原核表达蛋白的免疫印迹鉴定 | 第53-54页 |
| 3.3.5 IFA鉴定 | 第54-56页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第56-58页 |
| 3.4.1 讨论 | 第56-57页 |
| 3.4.2 小结 | 第57-58页 |
| 4 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
