| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一部分 牙龈间充质干细胞的分离、培养、鉴定和转染 | 第11-20页 |
| 实验材料与方法 | 第12-16页 |
| 1.实验材料 | 第12-13页 |
| 1.1 主要试剂和耗材 | 第12页 |
| 1.2 实验仪器设备 | 第12-13页 |
| 2.实验方法 | 第13-16页 |
| 2.1 原代GMSCs的分离培养 | 第13页 |
| 2.2 细胞传代 | 第13页 |
| 2.3 GMSCs的鉴定 | 第13-14页 |
| 2.3.1 克隆形成率(CFU-F)分析 | 第13页 |
| 2.3.2 成脂诱导分化 | 第13-14页 |
| 2.3.3 成骨诱导分化 | 第14页 |
| 2.3.4 流式细胞术检测GMSCs表面标志物 | 第14页 |
| 2.4 携带GFP的慢病毒转染GMSCs | 第14-16页 |
| 2.4.1 确定最合适的感染复数(Multiplicityofinfection,MOI) | 第14-15页 |
| 2.4.2 GMSCs的转染 | 第15-16页 |
| 实验结果 | 第16-19页 |
| 3.1 GMSCs形态学观察 | 第16页 |
| 3.2 克隆形成率分析 | 第16页 |
| 3.3 成脂分化能力鉴定 | 第16-17页 |
| 3.4 成骨分化能力鉴定 | 第17页 |
| 3.5 流式细胞术检测 | 第17-18页 |
| 3.6 携GFP慢病毒转染GMSCs | 第18-19页 |
| 讨论 | 第19-20页 |
| 第二部分 GMSCs对伴牙周炎的高脂血症小鼠的脂质代谢及炎症的调节 | 第20-37页 |
| 实验材料与方法 | 第21-29页 |
| 1.实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 动物饲料 | 第21页 |
| 1.3 主要试剂和材料 | 第21-22页 |
| 1.4 仪器与设备 | 第22页 |
| 2.实验方法 | 第22-29页 |
| 2.1 伴牙周炎的高脂血症小鼠模型的制备 | 第22-23页 |
| 2.1.1 亚甲蓝染色 | 第23页 |
| 2.2 GMSCs的收集 | 第23页 |
| 2.3 GMSCs的系统移植 | 第23-24页 |
| 2.4 炎症因子检测 | 第24-25页 |
| 2.5 牙槽骨标本处理 | 第25-26页 |
| 2.5.1 循环内固定 | 第25页 |
| 2.5.2 外固定 | 第25页 |
| 2.5.3 亚甲蓝染色 | 第25页 |
| 2.5.4 组织脱矿处理 | 第25页 |
| 2.5.5 组织的脱水、包埋与切片 | 第25-26页 |
| 2.6 HE染色过程 | 第26页 |
| 2.7 荧光显微镜直接观察 | 第26页 |
| 2.8 免疫组化染色 | 第26-27页 |
| 2.9 RT-PCR法检测小鼠肝脏组织内PPARαmRNA、SREBP-1cmRNA水平 | 第27-28页 |
| 2.9.1 Trizol法提取RNA | 第27页 |
| 2.9.2 逆转录成cDNA | 第27-28页 |
| 2.9.3 实时荧光定量PCR检测 | 第28页 |
| 2.10 统计学分析 | 第28-29页 |
| 实验结果 | 第29-34页 |
| 3.1 伴牙周炎的高脂血症小鼠模型建立的观察。 | 第29-30页 |
| 3.1.1 实验动物体重变化 | 第29页 |
| 3.1.2 高脂血症模型建立 | 第29-30页 |
| 3.1.3 牙周炎模型建立 | 第30页 |
| 3.2 牙槽骨吸收水平 | 第30-31页 |
| 3.3 HE染色结果 | 第31页 |
| 3.4 荧光显微镜观察结果 | 第31页 |
| 3.5 GFP免疫组化染色结果 | 第31-32页 |
| 3.6 血脂水平 | 第32页 |
| 3.7 血清IL-6、IL-10和TNF-α水平 | 第32-33页 |
| 3.8 肝脏PPARαmRNA、SREBP-1cmRNA水平 | 第33-34页 |
| 讨论 | 第34-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 综述 | 第42-52页 |
| 综述参考文献 | 第48-52页 |
| 20例病例汇报 | 第52-119页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
