| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 海棠花研究概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 海棠花生物学特性 | 第9页 |
| 1.1.2 海棠花的应用价值 | 第9页 |
| 1.1.3 观赏海棠研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 植物类黄酮次生代谢研究概述 | 第10-15页 |
| 1.2.1 类黄酮概述 | 第10页 |
| 1.2.2 类黄酮的主要功能 | 第10-12页 |
| 1.2.3 类黄酮在苹果属植物中的次生代谢途径 | 第12-13页 |
| 1.2.4 花青苷的生物合成与代谢调控 | 第13-15页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 论文研究内容 | 第17-18页 |
| 2.1 低氮胁迫诱导海棠花离体叶片中花青素的积累 | 第17页 |
| 2.1.1 不同处理下类黄酮次生代谢产物的定性与定量分析 | 第17页 |
| 2.1.2 类黄酮合成途径中相关结构基因与转录调控因子基因的实时定量 PCR 分析 | 第17页 |
| 2.2 红丽海棠 MrMYB10 基因的克隆 | 第17页 |
| 2.3 红丽海棠不同时期叶、花器官中 MrMYB10 基因的差异表达分析 | 第17-18页 |
| 第三章 低氮胁迫诱导海棠花花青素积累 | 第18-35页 |
| 3.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 3.1.2 主要仪器与试剂 | 第18-19页 |
| 3.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 3.2.1 海棠花无菌试管苗离体叶盘制备 | 第19页 |
| 3.2.2 海棠花离体叶盘花青苷诱导 | 第19页 |
| 3.2.3 海棠花离体叶盘的花青苷提取与分析 | 第19-20页 |
| 3.2.4 荧光实时定量 PCR 检测相关基因的表达差异 | 第20-24页 |
| 3.2.5 数据分析与处理 | 第24页 |
| 3.3 结果与分析 | 第24-32页 |
| 3.3.1 低氮胁迫下海棠花离体叶片叶色表形分析 | 第24-25页 |
| 3.3.2 海棠花离体叶片总多酚含量差异 | 第25页 |
| 3.3.3 海棠花离体叶片总黄酮含量差异 | 第25-26页 |
| 3.3.4 海棠花离体叶片花青苷 HPLC 分析 | 第26-30页 |
| 3.3.5 海棠花离体叶片花青苷相关基因在不同处理间的表达分析 | 第30-32页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第32-35页 |
| 3.4.1 低氮胁迫对海棠花离体叶片呈色的影响 | 第32-33页 |
| 3.4.2 低氮胁迫对花青苷生物合成和相关基因表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.4.3 花青苷的快速诱导 | 第34-35页 |
| 第四章 ‘红丽’海棠 MrMYB10 基因克隆与表达分析 | 第35-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第35页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第35页 |
| 4.1.2 试剂及设备 | 第35页 |
| 4.2 ‘红丽’海棠 MrMYB10 基因序列的克隆 | 第35-39页 |
| 4.2.1 总 RNA 提取及 cDNA 第一链的合成 | 第35-36页 |
| 4.2.2 引物设计与合成 | 第36页 |
| 4.2.3 PCR 扩增 | 第36-37页 |
| 4.2.4 PCR 产物纯化与平末端加 A | 第37-38页 |
| 4.2.5 PCR 产物与 T 载体连接反应 | 第38页 |
| 4.2.6 连接产物转化大肠杆菌 Top 10 感受态细胞 | 第38-39页 |
| 4.3 荧光实时定量 PCR 分析 | 第39-41页 |
| 4.4 结果与分析 | 第41-47页 |
| 4.4.1 ‘红丽’海棠 MrMYB10 基因的克隆与鉴定 | 第41-44页 |
| 4.4.2 ‘红丽’海棠 MrMYB10 基因在不同组织中的表达 | 第44-47页 |
| 4.5 结论与讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录1 | 第54-55页 |
| 附录2 | 第55页 |
| 附录3 | 第55-57页 |
| 附录4 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
