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Class Ⅰ Patatin启动子驱动的GUS和PIns基因对马铃薯及拟南芥的遗传转化

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
中英文缩写词表第14-16页
第1章 绪论第16-26页
    1.1 糖尿病第16页
    1.2 胰岛素第16-17页
    1.3 植物生产蛋白类药物的研究进展第17-18页
    1.4 Patatin研究进展第18-24页
        1.4.1 Patatin启动子家族及其分类第19-21页
        1.4.2 Patatin启动子结构的研究第21-22页
        1.4.3 Patatin启动子应用研究进展第22-24页
            1.4.3.1 Patatin启动子理论研究中的应用第22页
            1.4.3.2 Patatin启动子在改变作物品质中的应用第22-23页
            1.4.3.3 Patatin启动子在生物反应器中的应用第23-24页
            1.4.3.4 Patatin启动子的其它应用第24页
        1.4.4 Patatin启动子研究展望第24页
    1.5 研究目标及研究内容第24-26页
        1.5.1 研究目的与意义第24-25页
        1.5.2 研究内容第25-26页
第2章 ClassⅠPatatin启动子及其信号肽序列分析第26-29页
    2.1 ClassⅠPatatin启动子及其下游序列分析第26-28页
    2.2 ClassⅠPatatin信号肽序列分析第28-29页
第3章 马铃薯试管薯诱导第29-34页
    3.1 材料第29页
        3.1.1 植物材料第29页
        3.1.2 主要试剂第29页
        3.1.3 主要仪器第29页
    3.2 实验方法第29-31页
        3.2.1 试剂配制第29-30页
        3.2.2 马铃薯扩繁第30页
        3.2.3 马铃薯试管薯诱导第30-31页
            3.2.3.1 固体培养法马铃薯试管薯诱导第30页
            3.2.3.2 液体培养法马铃薯试管薯诱导第30页
            3.2.3.3 固液培养法马铃薯试管薯诱导第30-31页
            3.2.3.4 自然法马铃薯试管薯诱导第31页
            3.2.3.5 固液培养法马铃薯试管薯诱导的优化第31页
    3.3 结果与分析第31-34页
        3.3.1 培养方式对试管薯发生时间的影响第31-32页
        3.3.2 不同诱导液对试管薯的影响第32-34页
第4章 ClassⅠPatatin启动子驱动的PIns和GUS基因对马铃薯的遗传转化第34-52页
    4.1 材料第34-35页
        4.1.1 实验材料第34页
        4.1.2 主要试剂第34-35页
        4.1.3 主要仪器第35页
    4.2 实验方法第35-46页
        4.2.1 试剂配制第35-39页
        4.2.2 质粒制备第39页
        4.2.3 农杆菌GV3101和LBA4404感受态细胞的制备第39页
        4.2.4 农杆菌的转化第39-40页
        4.2.5 转化子PCR鉴定第40-42页
        4.2.6 马铃薯茎段对抗生素的耐受性第42页
        4.2.7 农杆菌介导的马铃薯遗传转化第42-43页
        4.2.8 CTAB法提取马铃薯基因组第43-44页
        4.2.9 马铃薯GUS组织化学染色第44页
        4.2.10 马铃薯块茎蛋白提取第44-45页
        4.2.11 马铃薯蛋白WesternBlotting分析第45-46页
    4.3 结果与讨论第46-52页
        4.3.1 质粒提取鉴定第46页
        4.3.2 农杆菌转化子鉴定第46-47页
        4.3.3 马铃薯茎段对抗生素的耐受性第47页
        4.3.4 马铃薯薯片的遗传转化第47-48页
        4.3.5 不同抗性植株PCR鉴定第48-50页
        4.3.6 马铃薯转化株GUS组织化学染色第50页
        4.3.7 马铃薯转化株SDS-PAGE和WesternBlotting分析第50-52页
第5章 ClassⅠPatatin启动子驱动GUS基因对拟南芥的遗传转化第52-61页
    5.1 材料第52-53页
        5.1.1 植物材料第52页
        5.1.2 主要试剂第52页
        5.1.3 主要仪器第52-53页
    5.2 实验方法第53-57页
        5.2.1 试剂配制第53-54页
        5.2.2 拟南芥遗传转化第54页
        5.2.3 拟南芥GUS组织化学染色第54页
        5.2.4 拟南芥GUS粗酶提取第54页
        5.2.5 拟南芥GUS粗酶液蛋白浓度测定第54-55页
        5.2.6 拟南芥转化植株GUS活性测定第55-56页
        5.2.7 不同因素对转化植株GUS活性的影响第56-57页
    5.3 结果与讨论第57-61页
        5.3.1 拟南芥抗性植株PCR检测第57页
        5.3.2 拟南芥GUS组织化学染色第57-59页
        5.3.3 拟南芥转化植株GUS活性测定第59-61页
讨论第61-63页
结论第63-65页
参考文献第65-71页
致谢第71-72页
附录:攻读学位期间所发表的学术论文目录第72页

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