摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
中英文缩写词表 | 第14-16页 |
第1章 绪论 | 第16-26页 |
1.1 糖尿病 | 第16页 |
1.2 胰岛素 | 第16-17页 |
1.3 植物生产蛋白类药物的研究进展 | 第17-18页 |
1.4 Patatin研究进展 | 第18-24页 |
1.4.1 Patatin启动子家族及其分类 | 第19-21页 |
1.4.2 Patatin启动子结构的研究 | 第21-22页 |
1.4.3 Patatin启动子应用研究进展 | 第22-24页 |
1.4.3.1 Patatin启动子理论研究中的应用 | 第22页 |
1.4.3.2 Patatin启动子在改变作物品质中的应用 | 第22-23页 |
1.4.3.3 Patatin启动子在生物反应器中的应用 | 第23-24页 |
1.4.3.4 Patatin启动子的其它应用 | 第24页 |
1.4.4 Patatin启动子研究展望 | 第24页 |
1.5 研究目标及研究内容 | 第24-26页 |
1.5.1 研究目的与意义 | 第24-25页 |
1.5.2 研究内容 | 第25-26页 |
第2章 ClassⅠPatatin启动子及其信号肽序列分析 | 第26-29页 |
2.1 ClassⅠPatatin启动子及其下游序列分析 | 第26-28页 |
2.2 ClassⅠPatatin信号肽序列分析 | 第28-29页 |
第3章 马铃薯试管薯诱导 | 第29-34页 |
3.1 材料 | 第29页 |
3.1.1 植物材料 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29页 |
3.1.3 主要仪器 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-31页 |
3.2.1 试剂配制 | 第29-30页 |
3.2.2 马铃薯扩繁 | 第30页 |
3.2.3 马铃薯试管薯诱导 | 第30-31页 |
3.2.3.1 固体培养法马铃薯试管薯诱导 | 第30页 |
3.2.3.2 液体培养法马铃薯试管薯诱导 | 第30页 |
3.2.3.3 固液培养法马铃薯试管薯诱导 | 第30-31页 |
3.2.3.4 自然法马铃薯试管薯诱导 | 第31页 |
3.2.3.5 固液培养法马铃薯试管薯诱导的优化 | 第31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-34页 |
3.3.1 培养方式对试管薯发生时间的影响 | 第31-32页 |
3.3.2 不同诱导液对试管薯的影响 | 第32-34页 |
第4章 ClassⅠPatatin启动子驱动的PIns和GUS基因对马铃薯的遗传转化 | 第34-52页 |
4.1 材料 | 第34-35页 |
4.1.1 实验材料 | 第34页 |
4.1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
4.1.3 主要仪器 | 第35页 |
4.2 实验方法 | 第35-46页 |
4.2.1 试剂配制 | 第35-39页 |
4.2.2 质粒制备 | 第39页 |
4.2.3 农杆菌GV3101和LBA4404感受态细胞的制备 | 第39页 |
4.2.4 农杆菌的转化 | 第39-40页 |
4.2.5 转化子PCR鉴定 | 第40-42页 |
4.2.6 马铃薯茎段对抗生素的耐受性 | 第42页 |
4.2.7 农杆菌介导的马铃薯遗传转化 | 第42-43页 |
4.2.8 CTAB法提取马铃薯基因组 | 第43-44页 |
4.2.9 马铃薯GUS组织化学染色 | 第44页 |
4.2.10 马铃薯块茎蛋白提取 | 第44-45页 |
4.2.11 马铃薯蛋白WesternBlotting分析 | 第45-46页 |
4.3 结果与讨论 | 第46-52页 |
4.3.1 质粒提取鉴定 | 第46页 |
4.3.2 农杆菌转化子鉴定 | 第46-47页 |
4.3.3 马铃薯茎段对抗生素的耐受性 | 第47页 |
4.3.4 马铃薯薯片的遗传转化 | 第47-48页 |
4.3.5 不同抗性植株PCR鉴定 | 第48-50页 |
4.3.6 马铃薯转化株GUS组织化学染色 | 第50页 |
4.3.7 马铃薯转化株SDS-PAGE和WesternBlotting分析 | 第50-52页 |
第5章 ClassⅠPatatin启动子驱动GUS基因对拟南芥的遗传转化 | 第52-61页 |
5.1 材料 | 第52-53页 |
5.1.1 植物材料 | 第52页 |
5.1.2 主要试剂 | 第52页 |
5.1.3 主要仪器 | 第52-53页 |
5.2 实验方法 | 第53-57页 |
5.2.1 试剂配制 | 第53-54页 |
5.2.2 拟南芥遗传转化 | 第54页 |
5.2.3 拟南芥GUS组织化学染色 | 第54页 |
5.2.4 拟南芥GUS粗酶提取 | 第54页 |
5.2.5 拟南芥GUS粗酶液蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
5.2.6 拟南芥转化植株GUS活性测定 | 第55-56页 |
5.2.7 不同因素对转化植株GUS活性的影响 | 第56-57页 |
5.3 结果与讨论 | 第57-61页 |
5.3.1 拟南芥抗性植株PCR检测 | 第57页 |
5.3.2 拟南芥GUS组织化学染色 | 第57-59页 |
5.3.3 拟南芥转化植株GUS活性测定 | 第59-61页 |
讨论 | 第61-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
附录:攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第72页 |