| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 前言与综述 | 第11-20页 |
| 1.1 玉米粉质胚乳突变体研究概述 | 第11-12页 |
| 1.2 玉米 pro1 突变体概述 | 第12页 |
| 1.3 高等植物中脯氨酸研究概述 | 第12-16页 |
| 1.3.1 脯氨酸在植物中的代谢 | 第12-13页 |
| 1.3.2 脯氨酸合成途径限速酶 P5CS 研究概述 | 第13-14页 |
| 1.3.3 脯氨酸在植物中的生理作用 | 第14-16页 |
| 1.3.3.1 脯氨酸在植物抗胁迫中的作用 | 第15页 |
| 1.3.3.2 脯氨酸在植物细胞中抗氧化的作用 | 第15页 |
| 1.3.3.3 脯氨酸维持细胞氧化还原平衡的作用 | 第15-16页 |
| 1.3.3.4 脯氨酸调节植物生长发育的作用 | 第16页 |
| 1.4 氨基酸对蛋白质合成影响的研究 | 第16-18页 |
| 1.4.1 通过 eIF2 激酶调控蛋白翻译的起始 | 第16-17页 |
| 1.4.2 通过调节核糖体与 mRNA 结合调控蛋白翻译的起始 | 第17-18页 |
| 1.5 氨基酸对细胞分裂增殖影响的研究 | 第18-19页 |
| 1.5.1 氨基酸通过 GCN2 调控染色体复制 | 第18页 |
| 1.5.2 氨基酸调节细胞周期蛋白的表达 | 第18-19页 |
| 1.6 课题背景及研究意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第20-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 常用试剂配方 | 第21-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.2.1 TPS 法制备玉米基因组 DNA | 第24-25页 |
| 2.2.2 PCR 组分及反应条件 | 第25页 |
| 2.2.3 PCR 产物的回收纯化 | 第25页 |
| 2.2.4 重组质粒转化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第26页 |
| 2.2.6 玉米幼苗氨基酸应答实验 | 第26-27页 |
| 2.2.7 密度梯度离心与细胞组分分离 | 第27页 |
| 2.2.8 融合蛋白表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.9 洋葱表皮瞬时表达-基因枪法 | 第27-28页 |
| 2.2.10 农杆菌侵染烟草 | 第28页 |
| 2.2.11 半定量及实时定量 PCR | 第28-31页 |
| 2.2.11.1 RNA 的抽提 | 第28-29页 |
| 2.2.11.2 RNA 中痕量 DNA 的去除 | 第29-30页 |
| 2.2.11.3 RT-PCR 组份及反应条件 | 第30-31页 |
| 2.2.11.4 半定量 PCR 反应 | 第31页 |
| 2.2.11.5 实时定量 PCR 反应 | 第31页 |
| 2.2.12 tRNA Northern Blot 检测 | 第31-33页 |
| 2.2.12.1 tRNA 的抽提 | 第31-32页 |
| 2.2.12.2 tRNA 电泳 | 第32页 |
| 2.2.12.3 tRNA 转膜 | 第32-33页 |
| 2.2.12.4 交联 | 第33页 |
| 2.2.12.5 杂交 | 第33页 |
| 2.2.13 Western Blot | 第33-34页 |
| 2.2.14 流式细胞检测 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第35-62页 |
| 3.1 实验结果 | 第35-58页 |
| 3.1.1 玉米 pro1 突变体具有粉质胚乳与幼苗致死表型 | 第35-38页 |
| 3.1.2 玉米 Pro1 突变影响醇溶蛋白合成造成蛋白体变小变少 | 第38-39页 |
| 3.1.3 玉米 Pro1 基因图位克隆及确认 | 第39-42页 |
| 3.1.4 Pro1 编码△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶 | 第42-43页 |
| 3.1.5 Pro1 基因的表达分析 | 第43-45页 |
| 3.1.6 Pro1 蛋白的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.1.7 Pro1 基因突变造成玉米籽粒与幼苗脯氨酸合成减少 | 第46-47页 |
| 3.1.8 脯氨酸添加培养可回复突变体表型 | 第47-50页 |
| 3.1.9 pro1 突变体中脯氨酸缺乏导致空载 tRNApro积累 | 第50-51页 |
| 3.1.10 pro1 突变体中脯氨酸缺乏导致 eIF2α磷酸化增加 | 第51页 |
| 3.1.11 pro1 突变体中脯氨酸缺乏抑制了蛋白合成 | 第51-54页 |
| 3.1.12 pro1 突变体中脯氨酸缺乏影响突变体细胞周期 | 第54-56页 |
| 3.1.13 pro1 突变体中脯氨酸缺乏影响了细胞周期相关基因的表达 | 第56-58页 |
| 3.2 讨论 | 第58-62页 |
| 3.2.1 玉米 Pro1 基因编码玉米中的一个 P5CS 蛋白 | 第58页 |
| 3.2.2 pro1 突变体中脯氨酸缺乏导致的空载 tRNApro积累诱发了 GCN2对 eIF2α的磷酸化 | 第58-59页 |
| 3.2.3 pro1 突变体中 eIF2α磷酸化抑制了包括醇溶蛋白在内的蛋白合成 | 第59-60页 |
| 3.2.4 pro1 突变体中 GCN2 与细胞周期蛋白（Cyclin）协同调控了细胞 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 附表 | 第74-78页 |
| 作者在攻读硕士学位期间公开发表的专利 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
