中文提要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-18页 |
第一章 人血浆低密度脂蛋白的分离鉴定 | 第18-27页 |
材料 | 第18-19页 |
方法与结果 | 第19-25页 |
一、低密度脂蛋白的提取分离 | 第19-20页 |
二、低密度脂蛋白的鉴定 | 第20-22页 |
1. 粒径分布和 Zeta 电位 | 第20页 |
2 .透射电镜表征 | 第20页 |
3. 红外表征 | 第20-21页 |
4. 蛋白含量测定 | 第21-22页 |
三、低密度脂蛋白的细胞摄取考察 | 第22-25页 |
1. LDL 靶向性验证 | 第22-23页 |
2. LDL 动态细胞摄取 | 第23-24页 |
3. LDL 受体竞争试验 | 第24-25页 |
讨论与小结 | 第25-27页 |
第二章 LDL 偶联 N-琥珀酰壳聚糖纳米粒的制备与表征 | 第27-40页 |
材料 | 第27-28页 |
方法与结果 | 第28-39页 |
一、N-琥珀酰壳聚糖的合成与表征 | 第28-30页 |
1.N-琥珀酰壳聚糖的合成 | 第28页 |
2.N-琥珀酰壳聚糖的表征 | 第28-30页 |
二、LDL 偶联的阿霉素 N-琥珀酰壳聚糖纳米粒的制备 | 第30-39页 |
1. 纳米粒中阿霉素的含量测定 | 第30-31页 |
2. 制备方法 | 第31页 |
3. 质量评价 | 第31页 |
4. 纳米粒制备的处方优化 | 第31-33页 |
5. 优化的纳米粒制备工艺 | 第33-34页 |
6. 纳米粒的质量考察 | 第34-37页 |
7. 纳米粒的体外释放特性 | 第37-39页 |
讨论与小结 | 第39-40页 |
第三章 LDL 偶联纳米粒共转运 siRNA 和阿霉素逆转肿瘤耐药性研究 | 第40-56页 |
材料 | 第40-41页 |
方法与结果 | 第41-54页 |
一、Chol-siRNA/LDL 复合物制备与性质考察 | 第41-44页 |
1. Chol-siRNA/LDL 复合物的制备 | 第41-42页 |
2. RNA 酶保护试验 | 第42-43页 |
3. 血清稳定性考察 | 第43-44页 |
二、共转运纳米粒体外细胞毒性 | 第44-47页 |
1. 对普通肿瘤细胞和正常肝细胞毒性 | 第44-46页 |
2. 对耐药肿瘤细胞毒性 | 第46-47页 |
三、Dox 细胞摄取及其机制 | 第47-51页 |
1. 荧光显微镜观察纳米粒中的 Dox 摄取 | 第47-48页 |
2. 流式细胞仪检测药物摄取 | 第48页 |
3. 纳米粒摄取机制考察 | 第48-51页 |
四、siRNA 体外转染和分布 | 第51-53页 |
五、RT-PCR 检测 mdr1 mRNA 的表达 | 第53-54页 |
讨论与小结 | 第54-56页 |
第四章 共转运纳米粒体外安全性和巨噬细胞吞噬考察 | 第56-64页 |
材料 | 第56页 |
方法和结果 | 第56-62页 |
一、体外溶血性及红细胞凝集试验 | 第56-58页 |
1. 纳米粒的体外溶血性考察 | 第56-57页 |
2. 红细胞凝集试验 | 第57-58页 |
二、共转运纳米粒的巨噬细胞吞噬考察 | 第58-62页 |
1. 小鼠原代腹腔巨噬细胞(MPM)分离培养 | 第58-59页 |
2. 巨噬细胞摄取 | 第59-62页 |
讨论和小结 | 第62-64页 |
第五章 共转运纳米粒的体内靶向性考察 | 第64-69页 |
材料 | 第64-65页 |
方法和结果 | 第65-67页 |
一、荷瘤鼠模型建立 | 第65页 |
1. H22小鼠原位肝癌模型的建立 | 第65页 |
2. HepG2 裸鼠原位肝癌模型的建立 | 第65页 |
3. HepG2 裸鼠皮下瘤模型的建立 | 第65页 |
二、荧光标记 Dox-LDL-SCS-NPs 的制备 | 第65-66页 |
1. Cy7 标记 SCS 的制备 | 第65-66页 |
2. Cy7 标记的 Dox-LDL-SCS-NPs 制备 | 第66页 |
三、Cy7 标记的纳米粒在荷瘤鼠体内的近红外荧光成像 | 第66-67页 |
讨论和小结 | 第67-69页 |
全文总结 | 第69-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
攻读学位期间发表的论文及其它 | 第78-80页 |
英文缩略词表 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |