| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 几丁质酶概述 | 第11-17页 |
| 1.1.1 几丁质 | 第11-12页 |
| 1.1.2 几丁质酶 | 第12-14页 |
| 1.1.3 微生物几丁质酶 | 第14-17页 |
| 1.2 霍乱弧菌几丁质酶 | 第17-20页 |
| 1.2.1 霍乱弧菌简介 | 第18-19页 |
| 1.2.2 霍乱弧菌几丁质酶 | 第19-20页 |
| 1.3 课题研究意义及主要内容 | 第20-23页 |
| 第2章 VC1073、VCA0027与VC1952的表达及纯化 | 第23-45页 |
| 2.1 蛋白性质分析 | 第23-27页 |
| 2.1.1 VC1073蛋白分析 | 第23-24页 |
| 2.1.2 VCA0027蛋白分析 | 第24-25页 |
| 2.1.3 VC1952蛋白分析 | 第25-27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.2.1 菌株及载体 | 第27页 |
| 2.2.2 工具酶及试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3 实验所用缓冲液的配制 | 第28页 |
| 2.2.4 实验仪器及服务 | 第28-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第29-35页 |
| 2.3.2 蛋白质的分离纯化 | 第35-37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-43页 |
| 2.4.1. 全长蛋白的纯化结果 | 第37-38页 |
| 2.4.2 截去信号肽后的蛋白纯化结果 | 第38-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第3章 VC1073、VCA0027与VC1952的活性鉴定及比较 | 第45-55页 |
| 3.1 实验器材 | 第45-46页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 实验所需缓冲液的配制 | 第45-46页 |
| 3.2 蛋白质酶活初测 | 第46-48页 |
| 3.2.1 实验原理 | 第46页 |
| 3.2.2 GlcNAc标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
| 3.2.3 酶活初测 | 第47-48页 |
| 3.3 VC1073、VCA0027与VC1952生化特性的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.1 pH对蛋白活性及稳定性影响的鉴定 | 第48页 |
| 3.3.2 温度对蛋白活性影响的鉴定 | 第48页 |
| 3.3.3 金属离子及化学试剂对蛋白活性影响的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.4 VC1073、VCA0027、VC1952与商品酶C-6137的活力比较 | 第49页 |
| 3.4 实验结果 | 第49-54页 |
| 3.4.1 pH对蛋白活性及稳定性影响的鉴定 | 第49-51页 |
| 3.4.2 温度对蛋白活性影响的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.4.3 金属离子及化学试剂对蛋白活性影响的鉴定 | 第52-53页 |
| 3.4.4 VC1073、VCA0027、VC1952与商品酶C-6137的活力比较 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第4章 VC1073、VCA0027与VC1952对真菌抑制作用的鉴定 | 第55-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 PDA培养基的制备 | 第55页 |
| 4.1.2 PD培养基的制备 | 第55页 |
| 4.1.3 真菌菌株的活化 | 第55-56页 |
| 4.2 蛋白质对绿色木霉及黑曲霉生长的抑制作用 | 第56-57页 |
| 4.2.1 对真菌菌落生长的抑制作用 | 第56页 |
| 4.2.2 对真菌菌丝体生长的抑制作用 | 第56-57页 |
| 4.3 实验结果 | 第57-58页 |
| 4.3.1 对绿色木霉及黑曲霉菌落生长的抑制作用 | 第57-58页 |
| 4.3.2 对绿色木霉及黑曲霉菌丝体生长的抑制作用 | 第58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第5章 VC1073、VCA0027与VC1952蛋白晶体的普筛及优化 | 第59-65页 |
| 5.1 实验材料 | 第59页 |
| 5.1.1 实验试剂与材料 | 第59页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 5.2.1 蛋白结晶原理 | 第59-60页 |
| 5.2.2 蛋白晶体初筛 | 第60-61页 |
| 5.2.3 蛋白晶体优化 | 第61-62页 |
| 5.2.4 晶体的冷冻保存 | 第62页 |
| 5.3 蛋白晶体的结构解析 | 第62-64页 |
| 5.3.1 蛋白晶体结构解析的原理 | 第62-63页 |
| 5.3.2 蛋白晶体结构解析的方法 | 第63-64页 |
| 5.4 实验结果 | 第64页 |
| 5.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附件 | 第72页 |
