| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-13页 |
| 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 呼肠孤病毒3型概述 | 第13-23页 |
| 1.1 呼肠孤病毒的发现与分类特点 | 第13-14页 |
| 1.2 形态特点与理化性质 | 第14-15页 |
| 1.3 血凝特性及培养特性 | 第15-16页 |
| 1.4 基因组结构 | 第16页 |
| 1.5 病毒蛋白 | 第16-19页 |
| 1.6 病毒转录与复制 | 第19-20页 |
| 1.7 流行病学 | 第20-21页 |
| 1.8 临床特征和病理变化 | 第21页 |
| 1.9 呼肠孤病毒3型的预防与控制 | 第21页 |
| 1.10 诊断方法 | 第21-23页 |
| 2 研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 研究报告一 S1基因的克隆、真核表达纯化及多抗制备 | 第25-42页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| 1.1 毒株、质粒、菌株和细胞 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂与溶液 | 第25-26页 |
| 1.3 主要仪器与耗材 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-34页 |
| 2.1 引物设计 | 第27页 |
| 2.2 克隆目的基因S1 | 第27-29页 |
| 2.3 利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组杆状病毒 | 第29-34页 |
| 2.4 目的蛋白纯化 | 第34页 |
| 2.5 多抗血清的研制及鉴定 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-40页 |
| 3.1 S1基因的PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.2 S1基因的克隆及鉴定 | 第35页 |
| 3.3 序列测定 | 第35-36页 |
| 3.4 重组供体质粒pFastHTA-S1的酶切鉴定 | 第36页 |
| 3.5 PCR鉴定重组构建Bacmid-S1 DNA | 第36-37页 |
| 3.6 重组病毒rBS的获得 | 第37-38页 |
| 3.7 表达产物的IFA检测 | 第38页 |
| 3.8 表达产物的Western-blotting检测 | 第38-39页 |
| 3.9 重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| 3.10 多抗血清的研制及鉴定 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 研究报告二 间接ELISA诊断方法的建立 | 第42-53页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.2 间接ELISA操作程序 | 第43页 |
| 1.3 间接ELISA诊断方法的建立 | 第43-44页 |
| 1.4 方法性能评价 | 第44-45页 |
| 2 结果 | 第45-50页 |
| 2.1 间接ELISA诊断方法的建立 | 第45-48页 |
| 2.2 方法性能评价 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| 3.1 ELISA条件优化 | 第51页 |
| 3.2 REO-3间接ELISA诊断方法的判定标准及应用 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 课题来源 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
