| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第16-43页 |
| 1.1 课题来源及研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.2 肝癌生物标志物的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 肝癌的诊断标志物 | 第17-19页 |
| 1.2.2 肝癌的靶向治疗 | 第19-20页 |
| 1.3 糖组学与肿瘤 | 第20-27页 |
| 1.3.1 糖组学概述及糖链的生物学功能 | 第20-22页 |
| 1.3.2 糖链异常与肿瘤 | 第22-24页 |
| 1.3.3 糖链异常与免疫应答及免疫逃逸 | 第24-27页 |
| 1.4 糖基转移酶与糖蛋白糖链结构及肿瘤的关系 | 第27-31页 |
| 1.4.1 糖基转移酶与糖链结构的关系 | 第27-29页 |
| 1.4.2 糖基转移酶与肿瘤发生发展及演进的关系 | 第29-31页 |
| 1.5 肝癌糖组学研究进展 | 第31-34页 |
| 1.5.1 肝癌发生机制的糖组学研究 | 第31-32页 |
| 1.5.2 肝癌诊断治疗的糖组学研究进展 | 第32-34页 |
| 1.6 糖组学研究的技术方法 | 第34-40页 |
| 1.6.1 糖蛋白寡糖链的获得 | 第34-35页 |
| 1.6.2 糖链结构研究技术 | 第35-38页 |
| 1.6.3 DSA-FACE技术的产生与发展 | 第38-40页 |
| 1.7 本论文的研究内容和技术路线 | 第40-43页 |
| 1.7.1 研究内容 | 第40-42页 |
| 1.7.2 技术路线 | 第42-43页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第43-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-49页 |
| 2.1.1 临床样本 | 第43页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第43页 |
| 2.1.3 实时定量引物及双链siRNA干扰序列 | 第43-44页 |
| 2.1.4 抗体及凝集素 | 第44-45页 |
| 2.1.5 糖苷酶 | 第45页 |
| 2.1.6 其他主要试剂及其配制 | 第45-48页 |
| 2.1.7 主要实验仪器 | 第48-49页 |
| 2.1.8 主要分析软件 | 第49页 |
| 2.2 实验方法 | 第49-61页 |
| 2.2.1 血清糖蛋白N-糖链的获得及检测 | 第49-50页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第50页 |
| 2.2.3 细胞膜蛋白分离 | 第50-51页 |
| 2.2.4 细胞表面糖蛋白N-糖链的获得 | 第51-55页 |
| 2.2.5 ABI 3130 DNA测序仪毛细管电泳 | 第55-56页 |
| 2.2.6 外切糖苷酶对N-糖链的消化 | 第56页 |
| 2.2.7 实时定量PCR检测多种糖基转移酶基因的表达 | 第56-57页 |
| 2.2.8 Western Blot实验 | 第57-58页 |
| 2.2.9 凝集素印迹分析实验 | 第58页 |
| 2.2.10 mgat4a基因沉默实验 | 第58-60页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第60-61页 |
| 第3章 血清与组织细胞N-糖链DSA-FACE检测技术的建立及优化 | 第61-74页 |
| 3.1 引言 | 第61页 |
| 3.2 血清样本DSA-FACE检测技术的优化 | 第61-63页 |
| 3.3 细胞及组织样本细胞表面N-糖链检测技术的建立 | 第63-73页 |
| 3.3.1 基于去污剂法获取膜蛋白的细胞表面N-糖链检测技术 | 第64-68页 |
| 3.3.2 基于超速离心法获取膜蛋白的细胞表面N-糖链检测技术 | 第68-73页 |
| 3.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 第4章 HCC血清N-糖链生物标志物的研究 | 第74-94页 |
| 4.1 引言 | 第74页 |
| 4.2 HCC患者与健康人血清N-糖组的比较分析 | 第74-80页 |
| 4.2.1 血清糖蛋白N-糖组谱图中糖峰的确定 | 第74-76页 |
| 4.2.2 HCC患者血清糖蛋白特异性改变的N-糖链 | 第76-80页 |
| 4.3 HCC、HBV感染者与健康人血清N-糖组的比较分析 | 第80-85页 |
| 4.4 HCC血清特异性N-糖链分析 | 第85-89页 |
| 4.4.1 特异性N-糖链在不同性别及年龄组中的比较分析 | 第85-87页 |
| 4.4.2 特异性N-糖链在不同肿瘤病理分期患者中的比较分析 | 第87-88页 |
| 4.4.3 特异性N-糖链与肿瘤细胞分化程度的相关性分析 | 第88-89页 |
| 4.5 HCC血清N-糖链指标与AFP联合诊断分析 | 第89-92页 |
| 4.6 本章小结 | 第92-94页 |
| 第5章 HCC细胞表面特异性N-糖链及其结构解析 | 第94-114页 |
| 5.1 引言 | 第94页 |
| 5.2 HCC细胞表面N-糖组图谱的获得及分析 | 第94-97页 |
| 5.3 HCC与癌旁组织细胞表面N-糖组的比较分析 | 第97-106页 |
| 5.3.1 HCC细胞表面特异性N-糖链的获得 | 第97-98页 |
| 5.3.2 HCC细胞表面特异性N-糖链与患者性别、年龄的相关性分析 | 第98-102页 |
| 5.3.3 HCC细胞表面特异性N-糖链与病理分期的相关性分析 | 第102-104页 |
| 5.3.4 HCC细胞表面特异性N-糖链与癌细胞分化程度的相关性分析 | 第104-106页 |
| 5.4 HCC细胞表面特异性N-糖链的结构解析 | 第106-110页 |
| 5.5 HCC与乳腺癌细胞表面特异性N-糖链结构的差异分析 | 第110-113页 |
| 5.6 本章小结 | 第113-114页 |
| 第6章 HCC分泌型与驻留型糖蛋白特异性N-糖链产生的分子机制 | 第114-131页 |
| 6.1 引言 | 第114页 |
| 6.2 HCC细胞表面与其血清特异性N-糖链的比较分析 | 第114-121页 |
| 6.2.1 特异性N-糖链与患者年龄的相关性分析 | 第117-119页 |
| 6.2.2 特异性N-糖链与病理分期（TNM-I期）的相关性分析 | 第119-121页 |
| 6.3 HCC发生过程中多种糖基转移酶的表达分析 | 第121-129页 |
| 6.3.1 HCC组织中多种糖基转移酶mRNA表达水平的分析 | 第121-122页 |
| 6.3.2 核心岩藻糖基转移酶的表达分析 | 第122-123页 |
| 6.3.3 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V的表达分析 | 第123-124页 |
| 6.3.4 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶IVa的表达分析 | 第124-129页 |
| 6.4 本章小结 | 第129-131页 |
| 结论 | 第131-133页 |
| 参考文献 | 第133-148页 |
| 附录 I | 第148-149页 |
| 附录 II | 第149-152页 |
| 附录 III | 第152-153页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及其它成果 | 第153-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
| 个人简历 | 第156页 |
