摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
综述部分 | 第12-20页 |
第一章 动物胚胎干细胞研究进展 | 第12-15页 |
·胚胎干细胞研究历史 | 第12-13页 |
·胚胎干细胞建系的方法简介 | 第13页 |
·维持胚胎干细胞多能性和自我更新的分子机理 | 第13-14页 |
·ESCs 应用于临床面临的伦理学问题 | 第14-15页 |
第二章 诱导多能干细胞(iPS)的研究进展 | 第15-20页 |
·体细胞重编程为iPS 的机制 | 第15-16页 |
·iPS 细胞诱导过程 | 第16页 |
·iPS 细胞诱导技术途径 | 第16-17页 |
·小分子化合物诱导 | 第16页 |
·载体诱导 | 第16-17页 |
·蛋白质分子诱导 | 第17页 |
·外源转录因子诱导 | 第17页 |
·siRNA 诱导 | 第17页 |
·iPS 细胞诱导的过程 | 第17-18页 |
·iPS 细胞检测 | 第18页 |
·分子方面的检测 | 第18页 |
·细胞方面的检测 | 第18页 |
·动物体内检测 | 第18页 |
·iPS 细胞的应用 | 第18-20页 |
试验部分 | 第20-38页 |
第三章 关中奶山羊胎儿成纤维细胞(GEF)的分离、培养 | 第20-27页 |
·材料 | 第20-21页 |
·关中奶山羊胎儿 | 第20页 |
·仪器设备 | 第20-21页 |
·各种溶液的配制 | 第21页 |
·磷酸盐缓冲液(PBS) | 第21页 |
·0.25 %胰酶的配制 | 第21页 |
·GEF 培养液 | 第21页 |
·GEF 的分离培养 | 第21-22页 |
·胰酶消化法 | 第21页 |
·组织块法 | 第21-22页 |
·GEF 的传代培养 | 第22页 |
·GEF 生长曲线的测定 | 第22页 |
·GEF 核型分析 | 第22页 |
·结果分析 | 第22-25页 |
·GEF 细胞胰酶消化法细胞 | 第22-23页 |
·GEF 细胞组织块法培养的细胞 | 第23-24页 |
·GEF 生长曲线的测定 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
·小结 | 第26-27页 |
第四章 iPS 细胞诱导、检测和山羊组织中端粒酶检测 | 第27-38页 |
·材料 | 第28页 |
·溶液配制 | 第28-29页 |
·丝裂霉素C 溶液配制 | 第28页 |
·0.1 mmol/L β-巯基乙醇的配制 | 第28-29页 |
·0.1% 明胶溶液配制 | 第29页 |
·bFGF 的分装 | 第29页 |
·LIF 分装 | 第29页 |
·MEF 细胞培养液的配制 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-31页 |
·小鼠胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第29页 |
·MEF 饲养层的制备 | 第29页 |
·关中奶山羊胎儿组织RNA 的提取 | 第29-30页 |
·SYBR Green 实时定量PCR | 第30页 |
·诱导山羊重编程细胞 | 第30-31页 |
·对诱导的重编程细胞进行AP 染色 | 第31页 |
·对诱导的重编程细胞进行免疫荧光检测 | 第31页 |
·免疫组化染色 | 第31页 |
·实验结果 | 第31-36页 |
·山羊组织中TERT 的表达检测 | 第31-32页 |
·诱导山羊体细胞重编程 | 第32-33页 |
·AP 染色免疫荧光端粒酶组化检测 | 第33-35页 |
·测定山羊重编程细胞中TERT 的表达变化 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |