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定量分析诱导山羊体细胞重编程过程中端粒酶的表达变化

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
综述部分第12-20页
 第一章 动物胚胎干细胞研究进展第12-15页
   ·胚胎干细胞研究历史第12-13页
   ·胚胎干细胞建系的方法简介第13页
   ·维持胚胎干细胞多能性和自我更新的分子机理第13-14页
   ·ESCs 应用于临床面临的伦理学问题第14-15页
 第二章 诱导多能干细胞(iPS)的研究进展第15-20页
   ·体细胞重编程为iPS 的机制第15-16页
   ·iPS 细胞诱导过程第16页
   ·iPS 细胞诱导技术途径第16-17页
     ·小分子化合物诱导第16页
     ·载体诱导第16-17页
     ·蛋白质分子诱导第17页
     ·外源转录因子诱导第17页
     ·siRNA 诱导第17页
   ·iPS 细胞诱导的过程第17-18页
   ·iPS 细胞检测第18页
     ·分子方面的检测第18页
     ·细胞方面的检测第18页
     ·动物体内检测第18页
   ·iPS 细胞的应用第18-20页
试验部分第20-38页
 第三章 关中奶山羊胎儿成纤维细胞(GEF)的分离、培养第20-27页
   ·材料第20-21页
     ·关中奶山羊胎儿第20页
     ·仪器设备第20-21页
   ·各种溶液的配制第21页
     ·磷酸盐缓冲液(PBS)第21页
     ·0.25 %胰酶的配制第21页
     ·GEF 培养液第21页
   ·GEF 的分离培养第21-22页
     ·胰酶消化法第21页
     ·组织块法第21-22页
   ·GEF 的传代培养第22页
   ·GEF 生长曲线的测定第22页
   ·GEF 核型分析第22页
   ·结果分析第22-25页
     ·GEF 细胞胰酶消化法细胞第22-23页
     ·GEF 细胞组织块法培养的细胞第23-24页
     ·GEF 生长曲线的测定第24-25页
   ·讨论第25-26页
   ·小结第26-27页
 第四章 iPS 细胞诱导、检测和山羊组织中端粒酶检测第27-38页
   ·材料第28页
   ·溶液配制第28-29页
     ·丝裂霉素C 溶液配制第28页
     ·0.1 mmol/L β-巯基乙醇的配制第28-29页
     ·0.1% 明胶溶液配制第29页
     ·bFGF 的分装第29页
     ·LIF 分装第29页
     ·MEF 细胞培养液的配制第29页
   ·实验方法第29-31页
     ·小鼠胎儿成纤维细胞的分离培养第29页
     ·MEF 饲养层的制备第29页
     ·关中奶山羊胎儿组织RNA 的提取第29-30页
     ·SYBR Green 实时定量PCR第30页
     ·诱导山羊重编程细胞第30-31页
     ·对诱导的重编程细胞进行AP 染色第31页
     ·对诱导的重编程细胞进行免疫荧光检测第31页
     ·免疫组化染色第31页
   ·实验结果第31-36页
     ·山羊组织中TERT 的表达检测第31-32页
     ·诱导山羊体细胞重编程第32-33页
     ·AP 染色免疫荧光端粒酶组化检测第33-35页
     ·测定山羊重编程细胞中TERT 的表达变化第35-36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-38页
结论第38-39页
参考文献第39-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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