| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 英文缩写词及注解 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-22页 |
| 1.1 氨基糖苷类抗生素 | 第10-14页 |
| 1.1.1 氨基糖苷类抗生素概述 | 第10-11页 |
| 1.1.2 氨基糖苷类抗生素生物合成基因研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2 小单抱菌 | 第14-15页 |
| 1.2.1 小单孢菌简介 | 第14页 |
| 1.2.2 小单孢菌研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 福提霉素 | 第15-21页 |
| 1.3.1 Fortimicin简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 Fortimicin生物合成基因的研究 | 第16页 |
| 1.3.3 Fortimicin生物合成途径的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.4 选题依据和研究内容 | 第21-22页 |
| 1.4.1 选题依据 | 第21页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料和方法 | 第22-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 小单孢菌基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 聚合酶链式反应(PCR) | 第27-28页 |
| 2.2.3 DNA片段切胶回收 | 第28页 |
| 2.2.4 DNA酶连反应 | 第28-29页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.2.6 酶连样及质粒的转化 | 第29-30页 |
| 2.2.7 碱裂解法提取小量大肠杆菌质粒 | 第30页 |
| 2.2.8 DNA酶切 | 第30-31页 |
| 2.2.9 DNA琼脂糖胶电泳 | 第31页 |
| 2.2.10 菌种保藏 | 第31-32页 |
| 2.2.11 砂土管制备 | 第32页 |
| 2.2.12 大肠杆菌与橄榄星小单孢菌或绛红小单孢菌的接合转移 | 第32-33页 |
| 2.2.13 橄榄星小单孢菌摇瓶发酵 | 第33页 |
| 2.2.14 抗生素生物测定法 | 第33页 |
| 2.2.15 代谢产物提取 | 第33页 |
| 2.2.16 TLC分析法 | 第33-34页 |
| 2.2.17 HPLC分析法 | 第34页 |
| 2.2.18 质谱分析法 | 第34-35页 |
| 第三章 forQ基因功能的研究 | 第35-46页 |
| 3.1 穿梭质粒pUQ502的构建 | 第35-39页 |
| 3.1.1 橄榄星小单孢菌FOM868基因组的提取 | 第36页 |
| 3.1.2 基因forQ同源交换臂的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 3.1.3 穿梭质粒pUQ502的构建及验证 | 第37-39页 |
| 3.2 橄榄星小单孢菌FOM868接合转移体系的建立及优化 | 第39-41页 |
| 3.2.1 热激处理条件对接合转移效率的影响 | 第40页 |
| 3.2.2 孢子预萌发时间的影响 | 第40页 |
| 3.2.3 预萌发培养基和接合转移培养基的选择优化 | 第40页 |
| 3.2.4 细菌与橄榄星小单孢菌混合比例的选择 | 第40-41页 |
| 3.2.5 抗生素覆盖时间与浓度的确定 | 第41页 |
| 3.3 接合转移和单交换工程菌的验证 | 第41-42页 |
| 3.4 forQ阻断突变株的筛选 | 第42-43页 |
| 3.5 橄榄星小单孢菌FQ61的发酵及代谢产物分析 | 第43-44页 |
| 3.6 结果与讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 forO基因功能的研究 | 第46-53页 |
| 4.1 穿梭质粒pOB32的构建 | 第46-49页 |
| 4.1.1 基因forO同源交换臂的PCR扩增 | 第46-48页 |
| 4.1.2 穿梭质粒pOB32的构建及验证 | 第48-49页 |
| 4.2 接合转移和单交换工程菌的验证 | 第49-50页 |
| 4.3 forO阻断突变株的筛选 | 第50-51页 |
| 4.4 橄榄星小单孢菌FO5的发酵和代谢产物分析 | 第51-52页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 forK基因功能的研究 | 第53-61页 |
| 5.1 穿梭质粒pKB31的构建 | 第53-56页 |
| 5.1.1 基因forK同源交换臂的PCR扩增 | 第53-54页 |
| 5.1.2 穿梭质粒pKB31的构建及验证 | 第54-56页 |
| 5.2 接合转移和单交换工程菌的验证 | 第56-57页 |
| 5.3 forK阻断突变株的筛选 | 第57-58页 |
| 5.4 橄榄星小单孢菌FK6的发酵及其次级代谢产物分析 | 第58-59页 |
| 5.5 结果与讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 糖基修饰基因sisI与genP基因组合的研究 | 第61-72页 |
| 6.1 sisI替换genP的基因重组质粒pIP303的构建 | 第61-66页 |
| 6.1.1 genP同源交换臂和sisI基因的PCR扩增 | 第62-63页 |
| 6.1.2 穿梭质粒pIP303的构建及验证 | 第63-66页 |
| 6.2 接合转移和单交换菌株的鉴定 | 第66-67页 |
| 6.3 sisI替换genP基因组合突变株的筛选 | 第67-68页 |
| 6.4 绛红小单孢菌GIP95的代谢产物分析 | 第68-70页 |
| 6.5 结论与讨论 | 第70-72页 |
| 全文总结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
