摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1. 鲤春病毒血症病毒研究进展 | 第12-16页 |
1.1 SVC流行特点 | 第12-13页 |
1.2 SVCV生物学特征 | 第13页 |
1.3 SVCV致病机制 | 第13-16页 |
1.3.1 细胞自噬与SVCV复制 | 第13-14页 |
1.3.2 氧化应激与SVCV复制 | 第14-16页 |
2. Nrf2-ARE信号通路的研究进展 | 第16-19页 |
2.1 Nrf2-ARE信号通路的激活途径 | 第16-17页 |
2.2 Nrf2-ARE信号通路的激活剂 | 第17-18页 |
2.3 Nrf2-ARE信号通路在病毒相关疾病中的作用 | 第18-19页 |
3. 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 Nrf2-ARE信号在SVCV复制中的作用研究 | 第20-52页 |
1. 材料与方法 | 第20-33页 |
1.1 实验材料 | 第20-25页 |
1.1.1 细胞与病毒 | 第20页 |
1.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
1.1.3 siRNA的设计与合成 | 第21-22页 |
1.1.4 PCR引物的设计与合成 | 第22页 |
1.1.5 试剂配制 | 第22-24页 |
1.1.6 实验仪器设备 | 第24-25页 |
1.2 试验方法 | 第25-33页 |
1.2.1 FHM细胞复苏及传代培养 | 第25页 |
1.2.2 MTT法测定药物毒性 | 第25-26页 |
1.2.3 RT-qPCR检测激活剂对Nrf2及其下游效应基因表达的作用 | 第26-28页 |
1.2.3.1 细胞总RNA提取 | 第26-27页 |
1.2.3.2 反转录 | 第27页 |
1.2.3.3 Real-time PCR | 第27-28页 |
1.2.4 免疫印迹实验 | 第28-31页 |
1.2.4.1 细胞总蛋白的提取 | 第28-29页 |
1.2.4.2 蛋白定量 | 第29页 |
1.2.4.3 蛋白电泳 | 第29-30页 |
1.2.4.4 转膜 | 第30页 |
1.2.4.5 免疫反应 | 第30页 |
1.2.4.6 化学发光法检测 | 第30-31页 |
1.2.5 FRAP法检测激活剂处理后的细胞总抗氧化能力 | 第31页 |
1.2.6 激活剂处理后的病毒感染 | 第31-32页 |
1.2.7 Real-time PCR检测SVCV-G的表达 | 第32页 |
1.2.8 Reed-Muench两氏法检测激活剂处理后病毒滴度 | 第32页 |
1.2.9 瞬时细胞转染 | 第32-33页 |
1.3 统计分析 | 第33页 |
2. 结果与分析 | 第33-49页 |
2.1 激活剂SFN和CDDO-Me对FHM细胞的毒性 | 第33-34页 |
2.2 激活剂处理FHM细胞后Nrf2及下游抗氧化基因的转录和表达分析 | 第34-38页 |
2.3 激活剂处理后FHM细胞总抗氧化能力T-AOC的测定 | 第38页 |
2.4 激活剂处理后SVCV-G基因的定量分析 | 第38-40页 |
2.5 激活剂处理后SVCV滴度的测定 | 第40-41页 |
2.6 Nrf2-siRNA干扰效率的验证及选择 | 第41-42页 |
2.7 Nrf2敲降后激活剂对Nrf2及下游效应基因转录和表达水平的影响 | 第42-45页 |
2.8 Nrf2-siRNA干扰后细胞总抗氧化能力T-AOC的测定 | 第45-46页 |
2.9 Nrf2敲降后SVCV-G基因的定量分析 | 第46-47页 |
2.10 HO-1 敲降后SVCV-G基因的定量分析 | 第47-49页 |
3. 讨论 | 第49-52页 |
参考文献 | 第52-64页 |
附表:硕士期间发表的论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |