猪Sp110基因的分子特征、选择性剪接和亚细胞定位
| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 Sp110的研究现状 | 第11-14页 |
| 1.1.1 Sp110结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 Sp110蛋白的生物学功能 | 第12-14页 |
| 1.2 Minigene技术 | 第14-15页 |
| 1.2.1 选择性剪接机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 Minigene | 第15页 |
| 1.3 亚细胞定位的研究 | 第15-17页 |
| 1.3.1 核定位序列的研究 | 第15-16页 |
| 1.3.2 入核分子机制 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-24页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验动物及细胞 | 第18页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.4 主要药品及试剂盒 | 第18页 |
| 2.1.5 缓冲液与主要试剂配制 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 猪Sp110基因的克隆与测序 | 第19页 |
| 2.2.2 Minigene | 第19-21页 |
| 2.2.3 猪Sp110亚细胞定位 | 第21-22页 |
| 2.2.4 组织表达谱构建 | 第22-23页 |
| 2.2.5 Poly(I:C)诱导表达分析 | 第23页 |
| 2.2.6 半衰期分析 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-43页 |
| 3.1 猪Sp110基因克隆与序列分析 | 第24-27页 |
| 3.1.1 RT-PCR扩增 | 第24页 |
| 3.1.2 克隆、测序、筛选 | 第24页 |
| 3.1.3 核苷酸序列及氨基酸序列分析 | 第24-27页 |
| 3.2 剪接位点分析 | 第27-28页 |
| 3.3 Minigene分析 | 第28-33页 |
| 3.3.1 Minegene载体构建方案 | 第28-29页 |
| 3.3.2 PCR扩增及重组质粒构建 | 第29-30页 |
| 3.3.3 Minigene转录产物分析 | 第30-33页 |
| 3.4 猪Sp110亚细胞定位 | 第33-39页 |
| 3.4.1 PCR扩增 | 第33-34页 |
| 3.4.2 真核表达质粒构建 | 第34页 |
| 3.4.3 亚细胞定位 | 第34-39页 |
| 3.5 猪Sp110基因的组织表达 | 第39-41页 |
| 3.6 猪Sp110基因的诱导表达 | 第41页 |
| 3.7 猪Sp110基因的半衰期分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-48页 |
| 4.1 变异剪接分析 | 第43-44页 |
| 4.2 新变异剪接方式鉴定 | 第44页 |
| 4.3 Sp110的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 4.4 猪Sp110基因的表达分析 | 第45-48页 |
| 4.4.1 组织表达 | 第46页 |
| 4.4.2 诱导表达 | 第46页 |
| 4.4.3 Sp110与放线菌素D | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
