| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 木薯概述 | 第10页 |
| 1.2 氮与植物 | 第10-12页 |
| 1.2.1 氮素的生理作用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 氮素形态 | 第11页 |
| 1.2.3 氮效率 | 第11页 |
| 1.2.4 氮营养高效基因型筛选 | 第11-12页 |
| 1.3 氮素代谢关键酶 | 第12-15页 |
| 1.3.1 硝酸还原酶 | 第13页 |
| 1.3.2 谷氨酰胺合成酶 | 第13-14页 |
| 1.3.3 谷氨酸合成酶 | 第14页 |
| 1.3.4 谷氨酸脱氢酶 | 第14-15页 |
| 1.3.5 蛋白水解酶 | 第15页 |
| 1.4 木薯氮利用研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 关联分析 | 第16-18页 |
| 1.5.1 连锁不平衡(linkage disequilibrium,LD) | 第16-17页 |
| 1.5.2 关联分析的两种策略 | 第17-18页 |
| 1.5.3 关联分析在木薯中的应用 | 第18页 |
| 1.6 目的和意义 | 第18-20页 |
| 1.7 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 实验材料和来源 | 第21页 |
| 2.2 木薯种植与表型调查 | 第21-22页 |
| 2.2.1 处理实验设置(盆栽、大田) | 第21页 |
| 2.2.2 氮效率相关数量性状调查 | 第21-22页 |
| 2.3 木薯体内氮形态测定 | 第22-23页 |
| 2.3.1 样品前处理 | 第22页 |
| 2.3.2 铵态氮 | 第22页 |
| 2.3.3 硝态氮 | 第22页 |
| 2.3.4 总氮 | 第22-23页 |
| 2.4 木薯体内氮代谢关键酶活性水平测定 | 第23-24页 |
| 2.4.1 硝酸还原酶 | 第23页 |
| 2.4.2 谷氨酰胺合成酶 | 第23页 |
| 2.4.3 谷氨酸合成酶 | 第23页 |
| 2.4.4 谷氨酸脱氢酶 | 第23-24页 |
| 2.4.5 蛋白水解酶 | 第24页 |
| 2.5 木薯GS基因的相对定量PCR | 第24-25页 |
| 2.5.1 木薯RNA提取 | 第24页 |
| 2.5.2 cDNA第一链反转录 | 第24页 |
| 2.5.3 相对定量PCR | 第24-25页 |
| 2.6 木薯GS2基因的克隆测序 | 第25-27页 |
| 2.6.1 木薯DNA提取 | 第25-26页 |
| 2.6.2 目的片段扩增和回收 | 第26页 |
| 2.6.3 目的片段克隆测序 | 第26-27页 |
| 2.6.4 重组体检测 | 第27页 |
| 2.7 木薯EST-SSR标记与氮效率系数关联分析 | 第27-29页 |
| 2.7.1 标记来源 | 第27-28页 |
| 2.7.2 EST-SSR-PCR扩增 | 第28页 |
| 2.7.3 电泳和银染 | 第28页 |
| 2.7.4 群体结构 | 第28-29页 |
| 2.7.5 关联分析 | 第29页 |
| 2.7.6 关联位点在木薯染色体中的分布 | 第29页 |
| 2.8 木薯SNP标记与氮效率系数关联分析 | 第29页 |
| 2.8.1 序列多样性和单倍型分析 | 第29页 |
| 2.8.2 关联分析 | 第29页 |
| 2.9 数据分析方法 | 第29-31页 |
| 2.9.1 氮效率评价 | 第29-30页 |
| 2.9.2 挖掘优异等位变异 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-56页 |
| 3.1 四种处理下的表型变异 | 第31-42页 |
| 3.1.1 四种处理下的平均表现 | 第31-32页 |
| 3.1.2 四种处理下的氮素形态含量 | 第32-34页 |
| 3.1.3 四种处理下的酶活水平 | 第34-38页 |
| 3.1.4 四种处理下氮素形态与数量性状相关性 | 第38-40页 |
| 3.1.5 四种处理下GS表达量分析 | 第40-42页 |
| 3.2 大田135份木薯耐低氮性评价 | 第42-45页 |
| 3.3 木薯氮效率系数与EST-SSR标记的关联分析 | 第45-52页 |
| 3.3.1 群体结构分析 | 第45-46页 |
| 3.3.2 关联分析结果 | 第46-47页 |
| 3.3.3 优异等位变异分析 | 第47-49页 |
| 3.3.4 关联位点在木薯染色体中的物理位置 | 第49-52页 |
| 3.4 木薯氮效率系数与SNP标记关联分析 | 第52-56页 |
| 3.4.1 候选基因 | 第52-53页 |
| 3.4.2 核苷酸多态性 | 第53-54页 |
| 3.4.3 单倍型分析 | 第54页 |
| 3.4.4 群体结构 | 第54-55页 |
| 3.4.5 关联分析结果 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 表型变异 | 第56页 |
| 4.2 筛选基因 | 第56-57页 |
| 4.3 氮高效种质筛选指标 | 第57页 |
| 4.4 关联分析 | 第57-58页 |
| 4.5 影响关联分析因素 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
