摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1. 引言 | 第10-14页 |
1.1 帕金森病 | 第10页 |
1.2 ATP13A2(PARK9) | 第10-11页 |
1.2.1 ATP13A2的功能与分布 | 第10-11页 |
1.2.2 ATP13A2突变与帕金森症 | 第11页 |
1.3 突触核蛋白病理学 | 第11-12页 |
1.3.1 β-synuclein与α-synclein | 第12页 |
1.3.2 β-syn与PD | 第12页 |
1.4 自噬 | 第12-14页 |
1.4.1 自噬与自噬信号通路 | 第12-13页 |
1.4.2 帕金森病与自噬 | 第13页 |
1.4.3 ATP13A2与自噬 | 第13-14页 |
2. 材料和方法 | 第14-25页 |
2.1 ATP13A2野生及稳转质粒的提取及鉴定 | 第14-17页 |
2.1.1 主要仪器与设备 | 第14页 |
2.1.2 试剂及配制方法 | 第14-15页 |
2.1.3 实验步骤 | 第15-17页 |
2.2 ATP13A2及β-syn质粒的表达与稳转细胞系的建立 | 第17-21页 |
2.2.1 主要仪器与设备 | 第17页 |
2.2.2 常用试剂及配制 | 第17-19页 |
2.2.3 B103细胞抗药性能力评估: | 第19页 |
2.2.4 转染、药杀 | 第19-20页 |
2.2.5 单克隆挑取 | 第20页 |
2.2.6 免疫印迹样品蛋白裂解 | 第20页 |
2.2.7 免疫印迹 | 第20-21页 |
2.3 免疫荧光双标及细胞增殖、凋亡检测、酶活力检测、线粒体提取 | 第21-25页 |
2.3.1 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
2.3.2 主要试剂及配制方法 | 第22页 |
2.3.3 LDH细胞毒性检测 | 第22-23页 |
2.3.4 WST-1细胞存活率检测 | 第23页 |
2.3.5 免疫细胞化学 | 第23-24页 |
2.3.6 组织蛋白酶D及26-S蛋白酶体活性测定 | 第24页 |
2.3.7 线粒体提取 | 第24页 |
2.3.8 数据分析统计软件及方法 | 第24-25页 |
3. 结果与讨论 | 第25-46页 |
3.1 ATP13A2真核表达质粒的提取鉴定 | 第25-28页 |
3.2 ATP13A2在B103细胞中的分布 | 第28-29页 |
3.3 ATP13A2在各细胞器中的分布以及对各细胞器的影响 | 第29-40页 |
3.4 ATP13A2与突触核蛋白病理学 | 第40-46页 |
4. 结论与展望 | 第46-51页 |
参考文献 | 第51-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第62页 |