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miR-183通过LRIG1调控EGFR/AKT通路在胶质母细胞瘤放疗耐受中的作用及机制研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英文缩略词表第9-10页
第1章 前言第10-12页
第2章 材料与方法第12-24页
    2.1 材料第12-15页
        2.1.1 胶质瘤标本来源第12页
        2.1.2 胶质瘤细胞系第12-13页
        2.1.3 细胞培养试剂第13页
        2.1.4 细胞活力、凋亡相关试剂及材料第13页
        2.1.5 Real-time PCR相关试剂及材料第13页
        2.1.6 Western blot相关试剂及材料第13-14页
        2.1.7 细胞转染相关试剂及材料第14页
        2.1.8 裸鼠模型的制备相关试剂及材料第14页
        2.1.9 主要仪器和设备第14-15页
    2.2 实验方法第15-23页
        2.2.1 细胞培养、传代、冻存和复苏第15-16页
        2.2.2 构建放疗耐受胶质瘤细胞系U251R第16页
        2.2.3 细胞活力实验第16页
        2.2.4 细胞凋亡实验第16-17页
        2.2.5 Real time PCR检测胶质瘤细胞中mi R-183、LRIG1 m RNA等的表达水平第17-18页
        2.2.6 Western blot法检测脑胶质瘤细胞中蛋白的表达水平第18-20页
        2.2.7 荧光素酶基因报告实验第20-21页
        2.2.8 细胞转染第21-22页
        2.2.9 裸鼠成瘤实验第22-23页
    2.3 统计学方法第23-24页
第3章 结果第24-37页
    3.1 mi R-183 和LRIG1在脑胶质瘤组织样本及胶质瘤细胞系的异常表达及相关性第24-26页
        3.1.1 Real time PCR检测mi R-183 在脑胶质瘤放疗敏感组织和耐受组织中的表达水平第24页
        3.1.2 U251、U251R细胞活力和细胞凋亡检测第24-25页
        3.1.3 q RT-PCR和Western blot检测U251、U251R中mi R-183 和LRIG1表达水平第25-26页
    3.2 过表达MIR-183 降低胶质瘤细胞放疗敏感性第26-28页
        3.2.1 miR-183 mimics能有效上调U251中miR-183 的表达第26页
        3.2.2 转染miR-183 mimic和pre-NC的U251细胞辐射后细胞活力及凋亡检测第26-27页
        3.2.3 miR-183 inhibitor能有效下调U251R中miR-183 的表达第27页
        3.2.4 转染miR-183 inhibitor和NC的U251R细胞辐射后细胞活力及凋亡检第27-28页
    3.3 荧光素酶报告实验结果第28-30页
    3.4 敲低MIR-183 对U251R放疗敏感性作用的体外研究第30-32页
        3.4.1 Real time PCR和Western blot检测干扰mi R-183 后胶质瘤中相关基因及下游蛋白的变化第30页
        3.4.2 干扰mi R-183 通过上调LRIG1抑制EGFR/Akt表达增加胶质瘤细胞的放疗敏感性第30-32页
    3.5 过表达MIR-183 对U251放疗耐受作用的体外研究第32-34页
        3.5.1 Real time PCR和Western blot检测过表达mi R-183 胶质瘤中相关基因及下游蛋白的变化第32页
        3.5.2 过表达mi R-183 通过下调LRIG1促进EGFR/Akt表达增加胶质瘤细胞的放疗耐受第32-34页
    3.6 MIR-183 对肿瘤生长影响的体内实验研究第34-37页
第4章 讨论第37-40页
第5章 结论与展望第40-41页
    5.1 结论第40页
    5.2 展望第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-45页
攻读学位期间的研究成果第45-46页
综述第46-52页
    参考文献第51-52页

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