摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-12页 |
第2章 材料与方法 | 第12-24页 |
2.1 材料 | 第12-15页 |
2.1.1 胶质瘤标本来源 | 第12页 |
2.1.2 胶质瘤细胞系 | 第12-13页 |
2.1.3 细胞培养试剂 | 第13页 |
2.1.4 细胞活力、凋亡相关试剂及材料 | 第13页 |
2.1.5 Real-time PCR相关试剂及材料 | 第13页 |
2.1.6 Western blot相关试剂及材料 | 第13-14页 |
2.1.7 细胞转染相关试剂及材料 | 第14页 |
2.1.8 裸鼠模型的制备相关试剂及材料 | 第14页 |
2.1.9 主要仪器和设备 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-23页 |
2.2.1 细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第15-16页 |
2.2.2 构建放疗耐受胶质瘤细胞系U251R | 第16页 |
2.2.3 细胞活力实验 | 第16页 |
2.2.4 细胞凋亡实验 | 第16-17页 |
2.2.5 Real time PCR检测胶质瘤细胞中mi R-183、LRIG1 m RNA等的表达水平 | 第17-18页 |
2.2.6 Western blot法检测脑胶质瘤细胞中蛋白的表达水平 | 第18-20页 |
2.2.7 荧光素酶基因报告实验 | 第20-21页 |
2.2.8 细胞转染 | 第21-22页 |
2.2.9 裸鼠成瘤实验 | 第22-23页 |
2.3 统计学方法 | 第23-24页 |
第3章 结果 | 第24-37页 |
3.1 mi R-183 和LRIG1在脑胶质瘤组织样本及胶质瘤细胞系的异常表达及相关性 | 第24-26页 |
3.1.1 Real time PCR检测mi R-183 在脑胶质瘤放疗敏感组织和耐受组织中的表达水平 | 第24页 |
3.1.2 U251、U251R细胞活力和细胞凋亡检测 | 第24-25页 |
3.1.3 q RT-PCR和Western blot检测U251、U251R中mi R-183 和LRIG1表达水平 | 第25-26页 |
3.2 过表达MIR-183 降低胶质瘤细胞放疗敏感性 | 第26-28页 |
3.2.1 miR-183 mimics能有效上调U251中miR-183 的表达 | 第26页 |
3.2.2 转染miR-183 mimic和pre-NC的U251细胞辐射后细胞活力及凋亡检测 | 第26-27页 |
3.2.3 miR-183 inhibitor能有效下调U251R中miR-183 的表达 | 第27页 |
3.2.4 转染miR-183 inhibitor和NC的U251R细胞辐射后细胞活力及凋亡检 | 第27-28页 |
3.3 荧光素酶报告实验结果 | 第28-30页 |
3.4 敲低MIR-183 对U251R放疗敏感性作用的体外研究 | 第30-32页 |
3.4.1 Real time PCR和Western blot检测干扰mi R-183 后胶质瘤中相关基因及下游蛋白的变化 | 第30页 |
3.4.2 干扰mi R-183 通过上调LRIG1抑制EGFR/Akt表达增加胶质瘤细胞的放疗敏感性 | 第30-32页 |
3.5 过表达MIR-183 对U251放疗耐受作用的体外研究 | 第32-34页 |
3.5.1 Real time PCR和Western blot检测过表达mi R-183 胶质瘤中相关基因及下游蛋白的变化 | 第32页 |
3.5.2 过表达mi R-183 通过下调LRIG1促进EGFR/Akt表达增加胶质瘤细胞的放疗耐受 | 第32-34页 |
3.6 MIR-183 对肿瘤生长影响的体内实验研究 | 第34-37页 |
第4章 讨论 | 第37-40页 |
第5章 结论与展望 | 第40-41页 |
5.1 结论 | 第40页 |
5.2 展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
综述 | 第46-52页 |
参考文献 | 第51-52页 |