山羊体细胞核移植的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-23页 |
| ·细胞核移植的发展过程 | 第9-14页 |
| ·早期细胞核移植发展回顾 | 第9-10页 |
| ·哺乳动物细胞核移植的发展 | 第10-13页 |
| ·山羊细胞核移植的发展历程 | 第13-14页 |
| ·细胞核移植的相关机理研究 | 第14-16页 |
| ·成熟促进因子(MPF) | 第14-15页 |
| ·核质相互作用 | 第15页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第15-16页 |
| ·核移植的技术程序 | 第16-20页 |
| ·受体细胞的准备 | 第16-17页 |
| ·供体细胞的准备 | 第17-18页 |
| ·核移植重构胚的构建方法 | 第18页 |
| ·融合法 | 第18页 |
| ·胞质内注射法 | 第18页 |
| ·重构胚的激活 | 第18-20页 |
| ·重构胚的培养 | 第20页 |
| ·重构胚的移植 | 第20页 |
| ·细胞核移植的前景 | 第20-23页 |
| ·在畜牧以及物种保护的应用 | 第20-21页 |
| ·医学上的应用 | 第21页 |
| ·转基因克隆 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞的分离和培养 | 第24-26页 |
| ·原代培养 | 第24页 |
| ·传代培养与纯化 | 第24-25页 |
| ·绒山羊成纤维细胞的冷冻保存 | 第25页 |
| ·绒山羊成纤维细胞的解冻复苏 | 第25页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞生长曲线 | 第25页 |
| ·绒山羊成纤维细胞染色体的制备 | 第25-26页 |
| ·山羊卵母细胞的采集 | 第26-27页 |
| ·山羊卵巢的采集 | 第26页 |
| ·卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的采集方法 | 第26页 |
| ·COCs 的成熟培养 | 第26页 |
| ·卵母细胞体外成熟培养液 | 第26-27页 |
| ·卵母细胞的成熟观察 | 第27页 |
| ·山羊卵母细胞孤雌激活和发育培养 | 第27-28页 |
| ·电激活 | 第27页 |
| ·化学激活 | 第27-28页 |
| ·离子霉素激活 | 第27页 |
| ·乙醇激活 | 第27-28页 |
| ·山羊孤雌胚的体外培养 | 第28页 |
| ·卵丘细胞单层的制备 | 第28页 |
| ·体外培养 | 第28页 |
| ·山羊细胞核移植过程 | 第28-29页 |
| ·核供体的准备 | 第28页 |
| ·核移植 | 第28页 |
| ·融合 | 第28-29页 |
| ·重构胚的激活及体外培养 | 第29页 |
| ·胚胎移植 | 第29页 |
| ·实验数据统计分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-34页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞原代和传代培养 | 第29-30页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞的生长曲线 | 第30-31页 |
| ·山羊皮肤成纤维细胞染色体数目 | 第31页 |
| ·采集方法对卵母细胞成熟的影响 | 第31页 |
| ·培养液中所含血清对卵母细胞成熟的影响 | 第31页 |
| ·不同激活电压对山羊卵母细胞孤雌激活的影响 | 第31-32页 |
| ·不同激活方法对山羊卵母细胞孤雌激活的影响 | 第32页 |
| ·6-DAMP 中不同激活时间对孤雌胚发育的影响 | 第32-33页 |
| ·不同培养方法对孤雌胚的发育影响 | 第33页 |
| ·不同融合电压对核移植效率的影响 | 第33页 |
| ·胚胎移植结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-38页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞系的建立 | 第34页 |
| ·影响山羊卵母细胞成熟的因素 | 第34-35页 |
| ·山羊卵母细胞的孤雌激活 | 第35-36页 |
| ·山羊卵母细胞孤雌胚胎体外发育的影响 | 第36-37页 |
| ·山羊重构胚的融合 | 第37页 |
| ·胚胎移植效率 | 第37-38页 |
| 3 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 附图 | 第48-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |