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山羊体细胞核移植的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-23页
   ·细胞核移植的发展过程第9-14页
     ·早期细胞核移植发展回顾第9-10页
     ·哺乳动物细胞核移植的发展第10-13页
     ·山羊细胞核移植的发展历程第13-14页
   ·细胞核移植的相关机理研究第14-16页
     ·成熟促进因子(MPF)第14-15页
     ·核质相互作用第15页
     ·组蛋白乙酰化第15-16页
   ·核移植的技术程序第16-20页
     ·受体细胞的准备第16-17页
     ·供体细胞的准备第17-18页
     ·核移植重构胚的构建方法第18页
       ·融合法第18页
       ·胞质内注射法第18页
     ·重构胚的激活第18-20页
     ·重构胚的培养第20页
     ·重构胚的移植第20页
   ·细胞核移植的前景第20-23页
     ·在畜牧以及物种保护的应用第20-21页
     ·医学上的应用第21页
     ·转基因克隆第21-23页
2 材料与方法第23-38页
   ·绒山羊皮肤成纤维细胞的分离和培养第24-26页
     ·原代培养第24页
     ·传代培养与纯化第24-25页
     ·绒山羊成纤维细胞的冷冻保存第25页
     ·绒山羊成纤维细胞的解冻复苏第25页
     ·绒山羊皮肤成纤维细胞生长曲线第25页
     ·绒山羊成纤维细胞染色体的制备第25-26页
   ·山羊卵母细胞的采集第26-27页
     ·山羊卵巢的采集第26页
     ·卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的采集方法第26页
     ·COCs 的成熟培养第26页
     ·卵母细胞体外成熟培养液第26-27页
     ·卵母细胞的成熟观察第27页
   ·山羊卵母细胞孤雌激活和发育培养第27-28页
     ·电激活第27页
     ·化学激活第27-28页
       ·离子霉素激活第27页
       ·乙醇激活第27-28页
     ·山羊孤雌胚的体外培养第28页
       ·卵丘细胞单层的制备第28页
       ·体外培养第28页
   ·山羊细胞核移植过程第28-29页
     ·核供体的准备第28页
     ·核移植第28页
     ·融合第28-29页
     ·重构胚的激活及体外培养第29页
     ·胚胎移植第29页
     ·实验数据统计分析第29页
   ·结果与分析第29-34页
     ·绒山羊皮肤成纤维细胞原代和传代培养第29-30页
     ·绒山羊皮肤成纤维细胞的生长曲线第30-31页
     ·山羊皮肤成纤维细胞染色体数目第31页
     ·采集方法对卵母细胞成熟的影响第31页
     ·培养液中所含血清对卵母细胞成熟的影响第31页
     ·不同激活电压对山羊卵母细胞孤雌激活的影响第31-32页
     ·不同激活方法对山羊卵母细胞孤雌激活的影响第32页
     ·6-DAMP 中不同激活时间对孤雌胚发育的影响第32-33页
     ·不同培养方法对孤雌胚的发育影响第33页
     ·不同融合电压对核移植效率的影响第33页
     ·胚胎移植结果第33-34页
   ·讨论第34-38页
     ·绒山羊皮肤成纤维细胞系的建立第34页
     ·影响山羊卵母细胞成熟的因素第34-35页
     ·山羊卵母细胞的孤雌激活第35-36页
     ·山羊卵母细胞孤雌胚胎体外发育的影响第36-37页
     ·山羊重构胚的融合第37页
     ·胚胎移植效率第37-38页
3 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-48页
附图第48-52页
作者简介第52页

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