| 中文摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一篇 文献综述 | 第18-39页 |
| 第一章 奶牛酮病研究进展 | 第18-24页 |
| 1.1 概念及分类 | 第18-19页 |
| 1.2 流行病学 | 第19页 |
| 1.3 病因 | 第19-20页 |
| 1.4 发病机理 | 第20-22页 |
| 1.5 临床症状 | 第22-23页 |
| 酮病预防 | 第23-24页 |
| 第二章 氧化应激与代谢损伤 | 第24-32页 |
| 2.1 氧化应激概述 | 第24页 |
| 2.2 氧化应激与细胞损伤 | 第24-25页 |
| 2.3 抗氧化应激与动物疾病 | 第25-27页 |
| 2.4 抗氧化剂 | 第27-29页 |
| 2.5 抗氧化应激 | 第29-30页 |
| 2.6 氧化应激的检测方法 | 第30-32页 |
| 第三章 内分泌与氧化应激 | 第32-39页 |
| 3.1 Leptin与氧化应激 | 第32-33页 |
| 3.2 Insulin与氧化应激 | 第33-34页 |
| 3.2.1 Insulin | 第33-34页 |
| 3.2.2 氧化应激与Insulin抵抗 | 第34页 |
| 3.3 Insulin-like growth factors与氧化应激 | 第34-35页 |
| 3.4 内分泌因素对干细胞氧化应激的作用 | 第35-38页 |
| 3.4.1 INS对肝细胞氧化应激关键酶表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.2 LEP对氧化关键酶表达的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.3 Insulin growth factor I对氧化应激关键酶表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.5 总结 | 第38-39页 |
| 第二篇 实验内容 | 第39-92页 |
| 第一章 奶牛乳清酮体和抗氧化水平及其相关性研究 | 第39-50页 |
| 1.1 前言 | 第39页 |
| 1.2 实验材料和方法 | 第39-44页 |
| 1.3 统计学分析 | 第44-45页 |
| 1.4 结果 | 第45-46页 |
| 1.5 讨论 | 第46-49页 |
| 1.5.1 乳清酮体与氧化/抗氧化指标的正常参考值 | 第46-48页 |
| 1.5.2 乳清酮体与氧化/抗氧化指标的相关性 | 第48-49页 |
| 1.6 小结 | 第49-50页 |
| 第二章 奶牛血浆和乳清中leptin,NEFA,Insulin的水平及相关性研究 | 第50-59页 |
| 2.1 前言 | 第50页 |
| 2.2 材料和方法 | 第50-54页 |
| 2.3 结果 | 第54-57页 |
| 2.4 讨论 | 第57-58页 |
| 2.5 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 体外添加Leptin,Insulin和IGF-I对奶牛原代肝细胞氧化应激状态的作用 | 第59-92页 |
| 3.1 前言 | 第59-60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-65页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第60页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第60-61页 |
| 3.2.3 药品与试剂 | 第61-63页 |
| 3.2.4 试剂的配制方法 | 第63-65页 |
| 3.3 实验方法 | 第65-71页 |
| 3.3.1 荧光定量标准曲线的建立 | 第65-69页 |
| 3.3.2 原代肝细胞的分离与培养 | 第69-70页 |
| 3.3.2.1 原代肝细胞的分离 | 第69-70页 |
| 3.3.2.2 肝细胞的培养 | 第70页 |
| 3.3.2.3 细胞形态学观察 | 第70页 |
| 3.3.3 肝细胞体外添加试验 | 第70页 |
| 3.3.4 细胞培养液抗氧化指标的测定 | 第70-71页 |
| 3.4 数据处理与统计分析 | 第71页 |
| 3.5 结果 | 第71-89页 |
| 3.5.1 引物特异性检验 | 第71-72页 |
| 3.5.2 肝脏总RNA完整性及纯度检验 | 第72-73页 |
| 3.5.3 阳性克隆重组质粒的测序结果 | 第73页 |
| 3.5.4 荧光定量扩增动力学曲线 | 第73页 |
| 3.5.5 荧光定量标准曲线 | 第73-74页 |
| 3.5.6 荧光定量融解曲线 | 第74-76页 |
| 3.5.7 原代肝细胞分离鉴定与培养 | 第76页 |
| 3.5.8 体外添加Insulin、Leptin和IGF-I对肝细胞CAT转录水平的作用 | 第76-79页 |
| 3.5.9 体外添加Insulin、Leptin和IGF-I对肝细胞GPX转录水平的作用 | 第79-81页 |
| 3.5.10 体外添加Insulin、Leptin和IGF-I对肝细胞培养液中CAT水平的影响 | 第81-83页 |
| 3.5.11 体外添加Insulin、Leptin和IGF-I对肝细胞培养液中GPX水平的影响 | 第83-85页 |
| 3.5.12 体外添加Insulin、Leptin和IGF-I对肝细胞培养液中TAC水平的影响 | 第85-87页 |
| 3.5.13 体外添加Insulin、Leptin和IGF-I对肝细胞培养液中MDA水平的影响 | 第87-89页 |
| 3.6 讨论 | 第89-92页 |
| 3.6.1 Leptin对肝细胞氧化应激的影响 | 第89-90页 |
| 3.6.2 Insulin与肝细胞的氧化应激 | 第90-91页 |
| 3.6.3 IGF-I与肝细胞的氧化应激 | 第91-92页 |
| 全文结论 | 第92-93页 |
| 创新点和研究展望 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-105页 |
| 附录1 酮体(KET)测定改良水杨醛比色法 | 第105-107页 |
| 附录2 瘦素 | 第107-108页 |
| 附录3 测定NEFA的试剂配制 | 第108-109页 |
| 附录4 测定胰岛素试剂配制 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 攻读学位期间发表论文的情况 | 第111页 |
