| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第17-34页 |
| 1.1 BmCPV研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2 家蚕抗BmCPV研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3 miRNAs概述 | 第22-26页 |
| 1.4 病毒编码的miRNA研究进展 | 第26-29页 |
| 1.5 RNAi抗病毒研究进展 | 第29-33页 |
| 1.6 本文主要内容 | 第33-34页 |
| 第二章 一般材料与方法 | 第34-42页 |
| 2.1 一般材料 | 第34-37页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 工具酶和所用相关试剂盒 | 第34页 |
| 2.1.3 培养基 | 第34-35页 |
| 2.1.4 核酸引物和测序 | 第35页 |
| 2.1.5 试剂配置 | 第35-36页 |
| 2.1.6 常用仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 常用方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 制备感受态细胞 | 第37页 |
| 2.2.2 DNA连接的反应体系 | 第37-38页 |
| 2.2.3 连接产物的转化 | 第38页 |
| 2.2.4 重组质粒的筛选 | 第38页 |
| 2.2.5 采用碱裂解法来制备少量质粒DNA | 第38-39页 |
| 2.2.6 DNA目的片段分离和回收 | 第39页 |
| 2.2.7 PCR扩增技术 | 第39-40页 |
| 2.2.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
| 2.2.9 提取总RNA | 第40页 |
| 2.2.10 RNA反转录cDNA | 第40页 |
| 2.2.11 定量PCR（Quantitative PCR） | 第40-42页 |
| 第三章 BmCPV编码miRNA的分析和鉴定 | 第42-54页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第43页 |
| 3.2.2 试验方法 | 第43-45页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第45-52页 |
| 3.3.1 从感染BmCPV家蚕中肠小RNA文库中预测miRNAs | 第45-48页 |
| 3.3.2 BmCPV的miRNA生物信息学分析 | 第48-50页 |
| 3.3.4 miR靶基因的预测 | 第50-52页 |
| 3.5 讨论 | 第52-53页 |
| 3.6 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 BmCPV-miRNA对病毒本身基因表达调控研究 | 第54-60页 |
| 4.1 引言 | 第54页 |
| 4.2 材料与方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第54页 |
| 4.2.2 试验方法 | 第54-56页 |
| 4.3 试验结果与分析 | 第56-58页 |
| 4.3.1 miR-3 和Inhibition-miR-3 对BmCPV基因表达的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.2 miR-5 和Inhibit-miR-5 对BmCPV基因表达的影响 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 dsRNA干扰BmCPV-RDRP基因表达研究 | 第60-70页 |
| 5.1 引言 | 第60-61页 |
| 5.2 材料和方法 | 第61-63页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第61页 |
| 5.2.2 试验方法 | 第61-63页 |
| 5.3 试验结果与分析 | 第63-68页 |
| 5.3.1 BmCPV-RDRP基因表达特征 | 第63-64页 |
| 5.3.2 BmCPV基因检测引物的验证 | 第64页 |
| 5.3.3 注射液在家蚕体腔内扩散的模拟实验 | 第64-65页 |
| 5.3.4 dsRNA对BmCPV-RDRP的干扰效果 | 第65-66页 |
| 5.3.5 BmCPV-RDRP基因抑制后对病毒基因组其它片段表达的影响 | 第66-68页 |
| 5.4 讨论 | 第68-69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 第六章 基于piggyBac转座子的表达dsRNA转基因载体构建及检测 | 第70-80页 |
| 6.1 引言 | 第70-71页 |
| 6.2 材料和方法 | 第71-73页 |
| 6.2.1 试验材料 | 第71页 |
| 6.2.2 试验方法 | 第71-73页 |
| 6.3 试验结果与分析 | 第73-78页 |
| 6.3.1 Bm-P2启动子的克隆和在线分析 | 第73-74页 |
| 6.3.2 中间载体Bm-P2-dsRNA构建及表达效果检测 | 第74-77页 |
| 6.3.3 转基因表达载体构建及细胞转染检测 | 第77-78页 |
| 6.4 讨论 | 第78-79页 |
| 6.5 本章小结 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和成果 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附录一 Abbreviations list | 第93-94页 |
