| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第8-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| 1 多酚氧化酶的分类与分布 | 第16-17页 |
| 2 多酚氧化酶同工酶 | 第17-18页 |
| 3 多酚氧化酶分子结构 | 第18页 |
| 4 酶蛋白结构鉴定 | 第18-19页 |
| 5 多酚氧化酶的酶学特性 | 第19-20页 |
| 6 多酚氧化酶的提取制备 | 第20-21页 |
| 6.1 多酚氧化酶提取方法 | 第20页 |
| 6.2 多酚氧化酶的分离纯化 | 第20-21页 |
| 7 多酚氧化酶与茶叶品质关系 | 第21-22页 |
| 8 多酚氧化酶酶促合成茶黄素 | 第22-24页 |
| 8.1 不同PPO酶源酶促合成茶黄素 | 第22页 |
| 8.2 PPO酶促合成茶黄素的影响因素 | 第22-24页 |
| 9 研究目的和意义 | 第24页 |
| 10 主要研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
| 10.1 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 10.2 技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 茶叶多酚氧化酶同工酶的分离制备 | 第26-42页 |
| 1 材料与方法 | 第26-32页 |
| 1.1 材料 | 第26页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第26-28页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第26页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 1.2.3 溶液配制 | 第27-28页 |
| 1.3 方法 | 第28-32页 |
| 1.3.1 多酚氧化酶酶活力测定 | 第28页 |
| 1.3.2 酶比活力计算 | 第28-29页 |
| 1.3.3 纯化效果计算公式 | 第29页 |
| 1.3.4 蛋白质含量测定 | 第29页 |
| 1.3.5 SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
| 1.3.6 Native-PAGE PPO同工酶电泳 | 第30页 |
| 1.3.7 丙酮粉制备 | 第30页 |
| 1.3.8 丙酮粉匀浆浸提 | 第30页 |
| 1.3.9 硫酸铵分级沉淀 | 第30-31页 |
| 1.3.10 透析 | 第31页 |
| 1.3.11 Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱纯化 | 第31页 |
| 1.3.12 SephadexG-75凝胶层析纯化 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-40页 |
| 2.1 硫酸铵分级沉淀最适浓度筛选 | 第32-33页 |
| 2.2 Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱纯化 | 第33-36页 |
| 2.3 SephadexG-75凝胶层析纯化 | 第36-40页 |
| 2.3.1 第3峰洗脱液的Sephadex G-75凝胶层析纯化 | 第36-37页 |
| 2.3.2 第5峰洗脱液的Sephadex G-75凝胶层析纯化 | 第37-40页 |
| 3 小结 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 茶叶多酚氧化酶同工酶的分子鉴定 | 第42-47页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 1.1 材料 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第42-43页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第42页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 1.3 方法 | 第43-44页 |
| 1.3.1 脱色 | 第43页 |
| 1.3.2 酶解及脱盐 | 第43页 |
| 1.3.3 质谱检测 | 第43页 |
| 1.3.4 数据库检索 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-45页 |
| 2.1 PPO1质谱检测 | 第44页 |
| 2.2 PPO2质谱检测 | 第44-45页 |
| 3 小结 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 茶叶多酚氧化酶同工酶酶学性质研究 | 第47-58页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 1.1 材料 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第47-48页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第47页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第47-48页 |
| 1.3 方法 | 第48-49页 |
| 1.3.1 多酚氧化酶同工酶酶活性测定 | 第48页 |
| 1.3.2 茶叶多酚氧化酶同工酶动力学分析 | 第48页 |
| 1.3.3 茶叶多酚氧化酶同工酶最适温度分析 | 第48页 |
| 1.3.4 茶叶多酚氧化酶同工酶最适pH值分析 | 第48页 |
| 1.3.5 茶叶多酚氧化酶同工酶热稳定性分析 | 第48页 |
| 1.3.6 金属离子对茶叶多酚氧化酶同工酶酶活性的影响 | 第48-49页 |
| 1.3.7 抑制剂对茶叶多酚氧化酶同工酶酶活性的影响 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-56页 |
| 2.1 茶叶多酚氧化酶同工酶酶动力学分析 | 第49-50页 |
| 2.2 茶叶多酚氧化酶同工酶最适温度分析 | 第50-51页 |
| 2.3 茶叶多酚氧化酶同工酶最适pH值分析 | 第51-52页 |
| 2.4 茶叶多酚氧化酶同工酶热稳定性分析 | 第52-53页 |
| 2.5 金属离子对茶叶多酚氧化酶同工酶酶活性的影响 | 第53-54页 |
| 2.6 抑制剂对茶叶多酚氧化酶同工酶酶活性的影响 | 第54-56页 |
| 3 小结 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 茶叶多酚氧化酶同工酶酶促合成茶黄素效应研究 | 第58-68页 |
| 1 材料与方法 | 第58-60页 |
| 1.1 材料 | 第58页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第58-59页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第58-59页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第59页 |
| 1.3 方法 | 第59-60页 |
| 1.3.1 反应体系pH值对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第59页 |
| 1.3.2 反应体系温度对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第59页 |
| 1.3.3 反应体系底物浓度对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第59-60页 |
| 1.3.4 反应体系底物组分对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第60页 |
| 1.3.5 儿茶素HPLC分析方法 | 第60页 |
| 1.3.6 茶黄素HPLC分析方法 | 第60页 |
| 2 实验与结果 | 第60-67页 |
| 2.1 反应体系pH值对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第60-62页 |
| 2.2 反应体系温度对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第62-64页 |
| 2.3 反应体系底物浓度对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第64-65页 |
| 2.4 反应体系不同底物组分对PPO同工酶单体酶促合成茶黄素的影响 | 第65-67页 |
| 3 小结 | 第67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 第六章 全文总结 | 第68-70页 |
| 1 全文总结 | 第68-69页 |
| 2 创新点 | 第69页 |
| 3 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
