| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 英文缩写对照表 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-28页 |
| 1.1 猪瘟和猪瘟病毒 | 第14-17页 |
| 1.1.1 猪瘟病毒非编码区功能特点 | 第15-16页 |
| 1.1.2 猪瘟病毒结构蛋白功能特点 | 第16页 |
| 1.1.3 猪瘟病毒非结构蛋白功能特点 | 第16-17页 |
| 1.2 NS5B研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3 猪瘟病毒与固有免疫应答 | 第19-25页 |
| 1.3.1 TLR信号通路 | 第20-23页 |
| 1.3.2 RLR信号通路 | 第23-25页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第25-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-36页 |
| 2.1.1 实验所用毒株、细胞、载体、细菌株、抗体 | 第28页 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验试剂及配制 | 第29-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-52页 |
| 2.2.1 技术路线 | 第36-37页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第37-40页 |
| 2.2.3 基因的克隆 | 第40-42页 |
| 2.2.4 基因的亚克隆 | 第42-44页 |
| 2.2.5 重组蛋白的表达、纯化 | 第44-48页 |
| 2.2.6 多克隆抗体的制备 | 第48页 |
| 2.2.7 多克隆抗体反应性的鉴定 | 第48-50页 |
| 2.2.8 Western Blot鉴定多克隆抗体与宿主细胞蛋白的特异性 | 第50页 |
| 2.2.9 CSFV与免疫应答因子相互作用的初步探索 | 第50-52页 |
| 第三章 实验结果 | 第52-76页 |
| 3.1 抗CSFV NS5B多克隆抗体的制备 | 第52-61页 |
| 3.1.1 CSFV NS5B基因片段的克隆 | 第53-54页 |
| 3.1.2 原核表达载体pET-NS5B(222)的构建 | 第54-55页 |
| 3.1.3 NS5B重组菌的诱导及其表达形式的鉴定 | 第55-56页 |
| 3.1.4 原核表达NS5B蛋白的纯化与鉴定 | 第56页 |
| 3.1.5 抗CSFV NS5B多克隆抗体与原核表达NS5B蛋白的反应性 | 第56-57页 |
| 3.1.6 抗CSFV NS5B多克隆抗体与真核细胞瞬时表达NS5B蛋白的反应性 | 第57-60页 |
| 3.1.7 抗CSFV NS5B多克隆抗体与感染CSFV后PK-15细胞表达NS5B蛋白的特异性 | 第60-61页 |
| 3.2 抗猪TRIF多克隆抗体的制备 | 第61-65页 |
| 3.2.1 原核表达载体pET-TRIF(217)的构建 | 第62-63页 |
| 3.2.2 TRIF重组菌的诱导及其表达形式的鉴定 | 第63页 |
| 3.2.3 原核表达TRIF蛋白的纯化与鉴定 | 第63-64页 |
| 3.2.4 抗猪TRIF多克隆抗体与原核表达TRIF蛋白的反应性 | 第64-65页 |
| 3.2.5 抗猪TRIF多克隆抗体与真核PK-15细胞表达TRIF蛋白的特异性 | 第65页 |
| 3.3 抗猪MyD88多克隆抗体的制备 | 第65-69页 |
| 3.3.1 原核表达载体pET-MyD88(202)的构建 | 第66-67页 |
| 3.3.2 MyD88重组菌的诱导及其表达形式的鉴定 | 第67页 |
| 3.3.3 原核表达MyD88蛋白的纯化与鉴定 | 第67-68页 |
| 3.3.4 抗猪MyD88多克隆抗体与原核表达MyD88蛋白的反应性 | 第68-69页 |
| 3.3.5 抗猪MyD88多克隆抗体与真核PK-15细胞表达MyD88蛋白的特异性 | 第69页 |
| 3.4 抗猪MAVS多克隆抗体的制备 | 第69-73页 |
| 3.4.1 原核表达载体pET-MAVS(220)的构建 | 第70页 |
| 3.4.2 MAVS重组菌的诱导及其表达形式的鉴定 | 第70-72页 |
| 3.4.3 原核表达MAVS蛋白的纯化与鉴定 | 第72页 |
| 3.4.4 抗猪MAVS多克隆抗体与原核表达MAVS蛋白的反应性 | 第72-73页 |
| 3.4.5 抗猪MAVS多克隆抗体与真核PK-15细胞表达MAVS蛋白的特异性 | 第73页 |
| 3.5 猪瘟病毒与免疫应答因子相互作用的初步探索 | 第73-76页 |
| 3.5.1 qPCR检测CSFV感染对诱导细胞免疫应答因子mRNA水平的影响 | 第73-74页 |
| 3.5.2 Western Blot检测CSFV感染对细胞免疫应答因子蛋白水平的影响 | 第74-76页 |
| 第四章 讨论 | 第76-81页 |
| 4.1 多克隆抗体的制备 | 第77-78页 |
| 4.2 多克隆抗体的检测 | 第78-79页 |
| 4.3 猪瘟病毒与免疫应答因子的相互作用 | 第79-81页 |
| 第五章 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第94页 |
