摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-21页 |
1.1 小麦赤霉病研究概况 | 第12页 |
1.2 禾谷镰刀菌研究概况 | 第12-13页 |
1.3 小麦赤霉病防治概况 | 第13-14页 |
1.4 禾谷镰刀菌功能基因研究概述 | 第14-16页 |
1.4.1 功能基因研究方法 | 第15页 |
1.4.2 禾谷镰刀菌功能基因研究进展 | 第15-16页 |
1.5 FgCYK3基因研究背景 | 第16-17页 |
1.5.1 Cyk3参与非依赖肌动球蛋白环的胞质分裂 | 第16-17页 |
1.5.2 Cyk3通过SH3结构域招募Inn1到芽体颈部并调控几丁质合酶 | 第17页 |
1.5.3 Cyk3能够使Rho1暂时失活促进分裂沟内移 | 第17页 |
1.6 FgDOP1基因研究背景 | 第17-18页 |
1.6.1 dopA基因在构巢曲霉中的功能 | 第17-18页 |
1.6.2 DOP1基因在酿酒酵母中的功能 | 第18页 |
1.7 氮源代谢相关基因在真菌中研究背景 | 第18-20页 |
1.7.1 优势氮源物质在真菌中的代谢同化 | 第19页 |
1.7.2 非优势氮源物质在真菌中的代谢同化 | 第19-20页 |
1.8 研究目的及意义 | 第20-21页 |
2 实验材料与方法 | 第21-36页 |
2.1 实验材料 | 第21-25页 |
2.1.1 真菌材料 | 第21页 |
2.1.2 小麦材料 | 第21页 |
2.1.3 质粒载体 | 第21页 |
2.1.4 试剂及培养基 | 第21-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 禾谷镰刀菌的培养、保存、产孢 | 第25页 |
2.2.2 禾谷镰刀菌基因组DNA提取 | 第25-26页 |
2.2.3 PCR扩增反应 | 第26-27页 |
2.2.4 PCR产物、DNA片段纯化回收 | 第27-28页 |
2.2.5 大肠杆菌E.Coli DH5α菌株感受态细胞制备 | 第28页 |
2.2.6 DNA克隆技术 | 第28-30页 |
2.2.7 禾谷镰刀菌基因敲除融合片段构建及基因缺失突变体获得 | 第30-33页 |
2.2.8 禾谷镰刀菌基因回补突变载体构建及回补突变体获得 | 第33-34页 |
2.2.9 基因缺失突变体菌落生长形态观察 | 第34页 |
2.2.10 基因缺失突变体压力敏感性实验 | 第34页 |
2.2.11 基因缺失突变体产孢分析 | 第34页 |
2.2.12 基因缺失突变体孢子萌发分析 | 第34页 |
2.2.13 基因缺失突变体田间单花接种 | 第34-35页 |
2.2.14 基因缺失突变体苗期接种 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-52页 |
3.1 禾谷镰刀菌候选基因敲除及验证 | 第36-39页 |
3.1.1 基因缺失突变体获得 | 第36-37页 |
3.1.2 基因缺失突变体压力敏感性实验 | 第37-38页 |
3.1.3 基因缺失突变体回补突变 | 第38-39页 |
3.2 FgCYK3基因功能研究 | 第39-42页 |
3.2.1 FgCYK3编码蛋白分析 | 第39-40页 |
3.2.2 FgCYK3对禾谷镰刀菌菌丝生长无明显影响 | 第40页 |
3.2.3 FgCYK3影响禾谷镰刀菌分生孢子的形态和产孢能力 | 第40-41页 |
3.2.4 FgCYK3影响禾谷镰刀菌致病力 | 第41-42页 |
3.3 FgDOP1基因功能研究 | 第42-46页 |
3.3.1 FgDOP1编码蛋白分析 | 第42-43页 |
3.3.2 FgDOP1影响禾谷镰刀菌菌丝生长 | 第43页 |
3.3.3 FgDOP1影响禾谷镰刀菌分生孢子的形态和产孢能力 | 第43-45页 |
3.3.4 FgDOP1影响禾谷镰刀菌分生孢子萌发 | 第45页 |
3.3.5 FgDOP1影响禾谷镰刀菌致病力 | 第45-46页 |
3.4 禾谷镰刀菌氮源代谢相关基因功能研究 | 第46-52页 |
3.4.1 氮源代谢相关基因功能及代谢通路分析 | 第46-48页 |
3.4.2 基因缺失突变体获得 | 第48-49页 |
3.4.3 基因缺失突变体菌落生长情况 | 第49-50页 |
3.4.4 基因缺失突变体致病力实验 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 候选基因敲除突变 | 第52页 |
4.2 基因缺失突变体压力敏感性实验 | 第52-53页 |
4.3 FgCYK3基因功能研究 | 第53-54页 |
4.4 FgDOP1基因功能研究 | 第54-55页 |
4.5 氮源代谢途径关键基因功能研究 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
附录 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |