| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 过氧化物酶体增殖剂激活受体-α（PPARα） | 第12-14页 |
| 1.1.1 PPARα 概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 PPARα 和肿瘤 | 第13-14页 |
| 1.2 肿瘤细胞糖代谢 | 第14-16页 |
| 1.3 葡萄糖转运蛋白 1（Glut1） | 第16-18页 |
| 1.3.1 Glut1和肿瘤 | 第16-17页 |
| 1.3.2 Glut1对肿瘤葡萄糖代谢是必要的 | 第17-18页 |
| 1.4 哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路促进肿瘤细胞的生长和迁移 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第19-21页 |
| 1.6 主要研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
| 1.6.1 主要研究内容 | 第21页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 PPARα 抑制Glut1基因转录 | 第23-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-30页 |
| 2.1.1 细胞系和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 实验仪器与耗材 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要实验试剂及配制 | 第24-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-42页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第30页 |
| 2.2.2 质粒扩增和提取 | 第30-31页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第31-32页 |
| 2.2.4 细胞总蛋白提取 | 第32页 |
| 2.2.5 细胞蛋白浓度的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.6 Western blot检测目标蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR检测PPARα 对Glut1基因表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.8 Duo-luciferase analysis检测PPARα 对Glut1转录活性的影响 | 第35-37页 |
| 2.2.9 染色质免疫共沉淀技术（ChIP analysis）检测PPARα 对Glut1转录调控区是否有相互作用 | 第37-40页 |
| 2.2.10 凝胶迁移实验（EMSA） | 第40-42页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第42-48页 |
| 2.3.1 PPARα 过表达降低Glut1蛋白水平 | 第42-43页 |
| 2.3.2 PPARα 基因沉默增加Glut1的蛋白表达 | 第43页 |
| 2.3.3 PPARα 过表达抑制Glut1基因的表达 | 第43-44页 |
| 2.3.4 PPARα 基因沉默增强Glut1基因的表达 | 第44-45页 |
| 2.3.5 PPARα 过表达抑制Glut1基因的转录活力 | 第45页 |
| 2.3.6 PPARα 基因沉默增强Glut1基因的转录活力 | 第45-46页 |
| 2.3.7 PPARα 直接作用于Glut1启动子区域 | 第46-47页 |
| 2.3.8 PPARα 与Glut1潜在的PPRE结构域结合 | 第47-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 PPARα 抑制葡萄糖/mTOR信号通路 | 第49-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.1.1 实验细胞系及质粒 | 第49页 |
| 3.1.2 实验试剂及其配制 | 第49页 |
| 3.1.3 实验仪器及耗材 | 第49-50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 3.2.1 质粒扩增及提取 | 第50页 |
| 3.2.2 细胞转染 | 第50页 |
| 3.2.3 细胞计数及培养 | 第50-51页 |
| 3.2.4 检测葡萄糖代谢 | 第51页 |
| 3.2.5 乳酸盐产生的检测 | 第51页 |
| 3.2.6 细胞总蛋白的提取 | 第51页 |
| 3.2.7 细胞蛋白浓度的测定 | 第51页 |
| 3.2.8 Western blot检测目标蛋白含量变化 | 第51页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第51-55页 |
| 3.3.1 PPARα 过表达减少葡萄糖的摄入及乳酸盐的释放 | 第51-52页 |
| 3.3.2 PPARα 基因沉默增加葡萄糖的摄入和乳酸盐的释放 | 第52-53页 |
| 3.3.3 PPARα 过表达抑制mTOR信号通路 | 第53-54页 |
| 3.3.4 PPARα 基因沉默激活mTOR信号通路 | 第54-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 PPARα/Glut1信号通路抑制肿瘤生长 | 第56-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.1 实验细胞系及质粒 | 第56页 |
| 4.1.2 实验试剂及其配制 | 第56页 |
| 4.1.3 实验仪器及耗材 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 4.2.1 筛选稳定表达的细胞系 | 第56-57页 |
| 4.2.2 准备裸鼠 | 第57页 |
| 4.2.3 扩大培养稳定表达的细胞 | 第57页 |
| 4.2.4 细胞计数 | 第57页 |
| 4.2.5 构建异植瘤裸鼠模型 | 第57-58页 |
| 4.2.6 取肿瘤 | 第58页 |
| 4.2.7 肿瘤组织总蛋白提取 | 第58页 |
| 4.2.8 蛋白定量 | 第58页 |
| 4.2.9 Western blot检测目的蛋白的表达量变化 | 第58页 |
| 4.3 统计学分析 | 第58页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第58-60页 |
| 4.4.1 PPARα 基因沉默促进肿瘤生长 | 第58-59页 |
| 4.4.2 Glut1的表达增加和mTOR激活会促进肿瘤的生长 | 第59-60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第五章 PPARα 激动剂抑制Glut1信号通路介导的肿瘤生长 | 第61-67页 |
| 5.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 5.1.1 实验细胞系及裸鼠 | 第61页 |
| 5.1.2 实验试剂及其配制 | 第61页 |
| 5.1.3 实验仪器及耗材 | 第61-62页 |
| 5.2 实验方法 | 第62-63页 |
| 5.2.1 细胞加药处理 | 第62页 |
| 5.2.2 细胞总蛋白质提取 | 第62页 |
| 5.2.3 细胞蛋白浓度的测定 | 第62页 |
| 5.2.4 Western blot分析目的蛋白的变化 | 第62页 |
| 5.2.5 细胞扩大培养 | 第62页 |
| 5.2.6 准备裸鼠 | 第62页 |
| 5.2.7 细胞计数 | 第62页 |
| 5.2.8 构建异植瘤裸鼠模型 | 第62-63页 |
| 5.2.9 取肿瘤 | 第63页 |
| 5.2.10 肿瘤组织总蛋白提取 | 第63页 |
| 5.2.11 蛋白定量 | 第63页 |
| 5.2.12 Western blot检测目的蛋白含量 | 第63页 |
| 5.3 统计学分析 | 第63页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第63-66页 |
| 5.4.1 PPARα 激动剂抑制细胞中Glut1的表达 | 第63-64页 |
| 5.4.2 PPARα 激动剂抑制肿瘤细胞mTOR信号通路 | 第64页 |
| 5.4.3 PPARα 激动剂Clofibrate抑制肿瘤的生长 | 第64-65页 |
| 5.4.4 Clofibrate抑制肿瘤组织中Glut1基因的表达和mTOR信号通路 | 第65-66页 |
| 5.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第六章 PPARα/Glut1信号增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性 | 第67-71页 |
| 6.1 实验材料 | 第67页 |
| 6.1.1 实验细胞系和裸鼠 | 第67页 |
| 6.1.2 实验试剂及其配制 | 第67页 |
| 6.1.3 实验仪器及耗材 | 第67页 |
| 6.2 实验方法 | 第67-68页 |
| 6.2.1 细胞扩大培养 | 第67页 |
| 6.2.2 准备裸鼠 | 第67-68页 |
| 6.2.3 细胞计数 | 第68页 |
| 6.2.4 构建异植瘤裸鼠模型 | 第68页 |
| 6.2.5 取肿瘤 | 第68页 |
| 6.2.6 肿瘤组织总蛋白提取 | 第68页 |
| 6.2.7 蛋白定量 | 第68页 |
| 6.2.8 Western blot检测目的蛋白含量 | 第68页 |
| 6.3 统计学分析 | 第68页 |
| 6.4 实验结果与分析 | 第68-70页 |
| 6.4.1 Clofibrate和化疗药物Cisplatinum共同作用抑制肿瘤生长 | 第68-69页 |
| 6.4.2 PPARα 激动剂和Cisplatinum同时处理可以明显降低Glut1的蛋白水平，抑制mTOR信号通路 | 第69-70页 |
| 6.4.3 PPARα/Glut1信号通路增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性 | 第70页 |
| 6.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 第七章 总结 | 第71-73页 |
| 7.1 PPARα 抑制Glut1基因的表达 | 第71页 |
| 7.2 PPARα 抑制葡萄糖/mTOR信号通路 | 第71页 |
| 7.3 PPARα 抑制肿瘤生长 | 第71-72页 |
| 7.4 PPARα 激动剂抑制Glut1信号介导的肿瘤生长 | 第72页 |
| 7.5 PPARα/Glut1信号增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 在读期间的学术成果 | 第80-81页 |
| 参与课题 | 第81页 |
