摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 综述 | 第11-27页 |
1.1 大麦组织培养的概述 | 第11-15页 |
1.1.1 大麦原生质体培养 | 第11-12页 |
1.1.2 大麦叶基培养 | 第12页 |
1.1.3 大麦幼穗培养 | 第12-13页 |
1.1.4 大麦花药及小孢子培养 | 第13-14页 |
1.1.5 大麦幼胚培养 | 第14页 |
1.1.6 大麦成熟胚培养 | 第14-15页 |
1.2 农杆菌介导的单子叶植物转化研究进展 | 第15-22页 |
1.2.1 禾谷类作物农杆菌转化 | 第16-17页 |
1.2.2 影响单子叶植物转化效率的因素 | 第17-22页 |
1.2.2.1 基因型对转化效率的影响 | 第17页 |
1.2.2.2 外植体对转化效率的影响 | 第17-18页 |
1.2.2.3 农杆菌菌株和质粒对转化效率的影响 | 第18页 |
1.2.2.4 预处理、侵染以及共培养条件对转化效率的影响 | 第18-22页 |
1.2.2.5 筛选标记对转化效率的影响 | 第22页 |
1.3 农杆菌介导的大麦转化研究 | 第22-23页 |
1.4 丛生芽再生体系研究背景 | 第23-24页 |
1.5 茎尖生长点转化研究 | 第24-25页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
1.6.1 大麦丛生芽高效再生体系的建立 | 第25-26页 |
1.6.2 大麦茎尖转化体系的建立 | 第26-27页 |
第二章 大麦茎尖丛生芽诱导及植株再生 | 第27-35页 |
2.1 材料与方法 | 第27-28页 |
2.1.1 试验材料 | 第27页 |
2.1.2 培养基 | 第27页 |
2.1.3 无菌苗的培养 | 第27-28页 |
2.1.4 丛生芽的诱导和继代 | 第28页 |
2.1.5 丛生芽的再生和炼苗移栽 | 第28页 |
2.2 结果与分析 | 第28-31页 |
2.2.1 茎尖切段丛生芽的诱导及植株再生 | 第28-29页 |
2.2.2 不同培养基对成熟胚萌发的影响 | 第29-30页 |
2.2.3 不同诱导培养基对丛生芽诱导的影响 | 第30-31页 |
2.3 讨论与分析 | 第31-35页 |
2.3.1 TDZ对丛生芽诱导的影响 | 第31-32页 |
2.3.2 不同激素对丛生芽诱导的影响 | 第32页 |
2.3.3 丛生芽的生根问题 | 第32-33页 |
2.3.4 丛生芽培养的展望 | 第33-35页 |
第三章 农杆菌介导的大麦茎尖转化 | 第35-53页 |
3.1 材料与方法 | 第35-42页 |
3.1.1 试验材料 | 第35页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第35页 |
3.1.3 培养基 | 第35-36页 |
3.1.4 DNA提取及试剂 | 第36-37页 |
3.1.5 Southern杂交试剂 | 第37页 |
3.1.6 农杆菌介导的大麦茎尖转化 | 第37-42页 |
3.1.6.1 大麦茎尖的获得 | 第37-38页 |
3.1.6.2 农杆菌接种菌液准备 | 第38页 |
3.1.6.3 大麦茎尖转化 | 第38页 |
3.1.6.4 农杆菌的抑菌及恢复 | 第38页 |
3.1.6.5 抗性苗的筛选及生根 | 第38页 |
3.1.6.6 抗性苗炼苗移栽 | 第38页 |
3.1.6.7 抗性苗的PPT抗性分析 | 第38-39页 |
3.1.6.8 抗性植株叶片DNA提取 | 第39页 |
3.1.6.9 抗性植株的PCR鉴定 | 第39-40页 |
3.1.6.10 阳性株系的Southern blot鉴定 | 第40-42页 |
3.2 结果与分析 | 第42-49页 |
3.2.1 PPT筛选浓度的确定 | 第42-43页 |
3.2.2 农杆菌介导的茎尖切段转化及植株再生 | 第43-44页 |
3.2.3 不同筛选条件对农杆菌介导的大麦茎尖转化的影响 | 第44-45页 |
3.2.4 抗性植株PPT涂抹抗性检测 | 第45-46页 |
3.2.5 抗性植株PCR鉴定 | 第46-47页 |
3.2.6 阳性株系Southern blot鉴定 | 第47-48页 |
3.2.7 超声波对大麦茎尖转化的影响 | 第48-49页 |
3.3 结论与讨论 | 第49-53页 |
3.3.1 PPT筛选的适宜浓度 | 第49-50页 |
3.3.2 大麦茎尖处理对转化的影响 | 第50-51页 |
3.3.3 农杆菌菌液浓度及侵染时间对转化的影响 | 第51页 |
3.3.4 大麦茎尖转化的意义 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-66页 |
致谢 | 第66页 |