内容提要 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩写词表 | 第14-16页 |
引言 | 第16-18页 |
第1章 绪论 | 第18-35页 |
1.1 简述真菌免疫调节蛋白家族 | 第18-23页 |
1.1.1 国内外对真菌免疫调节蛋白研究的进展 | 第18-20页 |
1.1.2 主要四种真菌免疫调节蛋白国内外研究现状 | 第20-23页 |
1.2 胃癌及其治疗现状 | 第23页 |
1.3 程序性细胞死亡的研究进展 | 第23-30页 |
1.3.1 细胞凋亡 | 第23-24页 |
1.3.2 细胞坏死 | 第24页 |
1.3.3 细胞自噬性死亡 | 第24-30页 |
1.4 内质网应激的研究进展 | 第30-32页 |
1.5 内质网应激导致细胞死亡的研究进展 | 第32-33页 |
1.6 rlz-8的前期研究 | 第33-35页 |
第2章 材料和方法 | 第35-49页 |
2.1 实验仪器 | 第35页 |
2.2 实验试剂 | 第35-36页 |
2.3 菌株和细胞株 | 第36-37页 |
2.4 试剂配制 | 第37-40页 |
2.4.1 药物配制 | 第37页 |
2.4.2 酵母菌培养相关溶液的配制 | 第37-38页 |
2.4.3 细胞培养相关溶液的配制 | 第38-39页 |
2.4.4 免疫印迹实验相关缓冲溶液的配制 | 第39-40页 |
2.5 实验方法 | 第40-48页 |
2.5.1 rlz-8的表达及纯化 | 第40-42页 |
2.5.2 细胞培养 | 第42页 |
2.5.3 WST-1检测法 | 第42页 |
2.5.4 rlz-8-FITC蛋白在SGC7901细胞内的定位 | 第42-43页 |
2.5.5 AnnexinV/PI凋亡检测 | 第43页 |
2.5.6 透射电镜 | 第43-44页 |
2.5.7 Hoechst33342对细胞核形态学检测 | 第44页 |
2.5.8 Caspase活性检测 | 第44页 |
2.5.9 细胞线粒体膜电位检测 | 第44页 |
2.5.10 实时定量PCR检测 | 第44-46页 |
2.5.11 免疫印迹 | 第46-48页 |
2.5.12 RNA干扰实验 | 第48页 |
2.5.13 基因芯片 | 第48页 |
2.6 统计学方法 | 第48-49页 |
第3章 实验结果 | 第49-77页 |
3.1 rlz-8的表达、纯化和活性 | 第49-51页 |
3.1.1 rlz-8的表达及纯化 | 第49-51页 |
3.1.2 rlz-8的活性 | 第51页 |
3.2 rlz-8抑制SGC7901细胞增殖 | 第51-54页 |
3.2.1 rlz-8对SGC7901细胞的细胞周期影响 | 第51-53页 |
3.2.2 rlz-8对SGC7901细胞的杀伤作用 | 第53-54页 |
3.3 rlz-8-FITC在SGC-7901细胞中的定位 | 第54-57页 |
3.3.1 rlz-8-FITC在SGC-7901细胞中的动态变化 | 第54-56页 |
3.3.2 rlz-8对SGC-7901细胞的形态影响 | 第56页 |
3.3.3 rlz-8-FITC在SGC-7901细胞中的亚细胞定位 | 第56-57页 |
3.4 基因芯片分析结果 | 第57-59页 |
3.4.1 rlz-8对胃癌SGC-7901细胞差异基因芯片分析结果 | 第57-59页 |
3.4.2 差异表达基因的验证 | 第59页 |
3.5 rlz-8触发了内质网应激 | 第59-61页 |
3.5.1 rlz-8对内质网应激相关标志分子的影响 | 第59-61页 |
3.6 rlz-8诱导SGC7901细胞发生自噬 | 第61-67页 |
3.6.1 超微结构观察 | 第61-63页 |
3.6.2 rlz-8对细胞自噬相关分子的影响 | 第63-65页 |
3.6.3 细胞内溶酶体变化 | 第65-67页 |
3.7 内质网应激在rlz-8诱导细胞自噬中的作用 | 第67-69页 |
3.7.1 抑制内质网应激对Atg5蛋白的影响 | 第67-68页 |
3.7.2 抑制内质网应激过程中LC3B的变化 | 第68-69页 |
3.8 自噬在rlz-8杀伤SGC7901细胞过程中的影响 | 第69-73页 |
3.8.1 RNA干扰对细胞生长的影响 | 第69-70页 |
3.8.2 内质网应激在rlz-8抑制细胞存活率的影响 | 第70-71页 |
3.8.3 自噬在rlz-8抑制细胞存活率的影响 | 第71-73页 |
3.9 rlz-8杀伤SGC7901细胞过程中未诱导细胞凋亡 | 第73-77页 |
3.9.1 rlz-8诱导SGC7901细胞死亡过程中细胞核形态变化 | 第73-74页 |
3.9.2 AnnexinV/PI检测细胞凋亡率 | 第74-75页 |
3.9.3 Caspase-3活性分析 | 第75-76页 |
3.9.4 线粒体膜电位变化 | 第76-77页 |
第4章 讨论 | 第77-82页 |
4.1 rlz-8抑制SGC7901细胞增殖并触发内质网应激 | 第78页 |
4.2 rlz-8触发内质网应激过程中引发了细胞自噬 | 第78-79页 |
4.3 自噬在rlz-8诱导SGC-7901细胞死亡中的作用 | 第79页 |
4.4 rlz-8诱导的细胞死亡方式中不包含细胞凋亡 | 第79-82页 |
第5章 结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-94页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |