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黄翅大白蚁肠道转录组比较分析及中肠木聚糖酶的纯化

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 绪论第11-21页
    1.1 木质纤维素及其降解第11页
    1.2 白蚁简介第11-12页
    1.3 白蚁及其对木质纤维素的降解第12-16页
        1.3.1 低等白蚁的木质纤维素降解机制第13-14页
        1.3.2 高等白蚁的木质纤维素降解机制第14-15页
        1.3.3 高等培菌白蚁及其共生体系降解木质纤维素的研究进展第15-16页
    1.4 白蚁高通量测序研究进展第16-17页
    1.5 白蚁木聚糖酶研究进展第17-19页
        1.5.1 木聚糖与木聚糖降解酶类第17-18页
        1.5.2 低等白蚁的木聚糖降解酶第18页
        1.5.3 高等白蚁的木聚糖降解酶第18-19页
    1.6 本文的立题依据和研究内容第19-21页
        1.6.1 立题依据第19-20页
        1.6.2 研究内容第20-21页
第二章 黄翅大白蚁肠道比较转录组分析第21-43页
    2.1 引言第21-22页
    2.2 实验材料、仪器与试剂第22页
        2.2.1 实验材料第22页
        2.2.2 主要的实验仪器设备第22页
        2.2.3 实验试剂第22页
        2.2.4 实验耗材的处理第22页
    2.3 实验方法与步骤第22-24页
        2.3.1 黄翅大白蚁的解剖及其肠道组织分离第22-23页
        2.3.2 总RNA的提取与纯化第23页
        2.3.3 总RNA纯度及完整性检验第23页
        2.3.4 文库构建及库检第23页
        2.3.5 上机测序与生物信息分析流程第23-24页
        2.3.6 基因功能注释第24页
        2.3.7 基因表达水平分析第24页
    2.4 实验结果第24-38页
        2.4.1 黄翅大白蚁各肠道总RNA提取结果及对其纯度和完整性的检测第24-25页
        2.4.2 黄翅大白蚁肠道RNA测序结果第25-26页
        2.4.3 转录组测序所获得的Unigene的功能注释第26-27页
        2.4.4 木质纤维素降解基因的统计第27-29页
        2.4.5 基因的差异表达分析第29-36页
        2.4.6 纤维素降解相关Unigene的表达分析第36页
        2.4.7 半纤维素降解相关Unigene的表达分析第36-37页
        2.4.8 木质素降解相关Unigene的表达分析第37页
        2.4.9 其它Unigene的表达分析第37-38页
    2.5 讨论第38-42页
        2.5.1 差异表达基因分析第39页
        2.5.2 木质纤维素降解酶类分析第39-42页
    2.6 小结第42-43页
第三章 黄翅大白蚁中肠木聚糖酶的纯化分离及酶活性质的测定第43-53页
    3.1 引言第43页
    3.2 实验材料、试剂与仪器第43-44页
        3.2.1 白蚁样品第43-44页
        3.2.2 实验仪器和与试剂第44页
    3.3 实验方法与步骤第44-47页
        3.3.1 木聚糖酶活性测定第44页
        3.3.2 粗酶液的获得第44-45页
        3.3.3 硫酸铵分级沉淀第45页
        3.3.4 离子交换柱、疏水作用柱、分子筛纯化第45-46页
        3.3.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳和活性电泳第46页
        3.3.6 纯化数据的计算与分析第46页
        3.3.7 最适温度、最适pH的测定和酶产物分析第46-47页
    3.4 实验结果第47-53页
        3.4.1 粗酶液的获得第47-48页
        3.4.2 阴离子交换柱、疏水柱、分子筛纯化结果第48-51页
        3.4.3 纯化数据统计与分析第51页
        3.4.5 最适反应温度和最适pH的测定及酶解产物的分析第51-53页
第四章 黄翅大白蚁中肠木聚糖酶基因的克隆第53-57页
    4.1 引言第53页
    4.2 实验材料、试剂第53页
    4.3 实验方法第53-54页
        4.3.1 目的蛋白条带的转膜及N-末端测序第53页
        4.3.2 黄翅大白蚁中肠RNA的提取第53页
        4.3.3 Mbxyl的3'-RACE扩增第53-54页
    4.4 实验结果第54-55页
        4.4.1 Mbxyl的转膜及N-末端测序第54页
        4.4.2 RACE扩增Mbxyl的cDNA序列第54-55页
    4.5 讨论第55-56页
    4.6 小结第56-57页
第五章 结论与展望第57-58页
附录第58-64页
参考文献第64-67页
致谢第67-68页
学位论文评阅及答辩情况表第68页

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