摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
1 绪论 | 第11-15页 |
1.1 研究背景 | 第11-13页 |
1.1.1 再生医学的概念 | 第11页 |
1.1.2 骨髓间充质干细胞的生物学特性 | 第11-12页 |
1.1.3 力生长因子的修复能力 | 第12-13页 |
1.1.4 力生长因子与细胞增殖 | 第13页 |
1.1.5 力生长因子与细胞迁移 | 第13页 |
1.2 本文所关心的内容 | 第13-14页 |
1.3 本文研究的目的和主要内容 | 第14-15页 |
1.3.1 本文研究的目的 | 第14页 |
1.3.2 本文研究的主要内容 | 第14-15页 |
2 大鼠骨髓间充质干细胞 rMSCS 的分离培养 | 第15-21页 |
2.1 引言 | 第15页 |
2.2 实验对象和材料 | 第15-16页 |
2.2.1 实验对象 | 第15页 |
2.2.2 实验仪器与耗材 | 第15-16页 |
2.2.3 实验药品与试剂 | 第16页 |
2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第16页 |
2.3 实验方法 | 第16-17页 |
2.3.1 分离原代 rMSCs | 第16-17页 |
2.3.2 rMSCs 的传代培养 | 第17页 |
2.4 实验结果 | 第17-19页 |
2.5 分析讨论 | 第19-20页 |
2.6 本章小结 | 第20-21页 |
3 MGF-C25E 对 rMSCS 增殖的影响 | 第21-27页 |
3.1 引言 | 第21-22页 |
3.2 实验材料 | 第22页 |
3.2.1 主要仪器与耗材 | 第22页 |
3.2.2 主要实验药品与试剂 | 第22页 |
3.2.3 主要实验试剂的配制 | 第22页 |
3.2.4 MGF-C25E 的购买与储存 | 第22页 |
3.3 实验原理和方法 | 第22-23页 |
3.3.1 MTT 细胞增殖检测 | 第22-23页 |
3.3.2 细胞计数检测细胞增殖 | 第23页 |
3.3.3 统计分析 | 第23页 |
3.4 实验结果 | 第23-25页 |
3.4.1 MGF-C25E 对 rMSCs 增殖没有显著影响 | 第23-25页 |
3.5 讨论 | 第25-26页 |
3.6 本章小结 | 第26-27页 |
4 MGF-C25E 通过 CXCR4-ERK1/2 信号促进 RMSCS 迁移 | 第27-48页 |
4.1 引言 | 第27-28页 |
4.2 实验材料 | 第28-31页 |
4.2.1 主要仪器与耗材 | 第28-29页 |
4.2.2 主要实验药品与试剂 | 第29-30页 |
4.2.3 主要实验试剂的配置 | 第30-31页 |
4.2.4 引物稀释 | 第31页 |
4.3 实验原理和方法 | 第31-37页 |
4.3.1 Transwell 法检测细胞迁移(体外) | 第31-32页 |
4.3.2 MTT 法测细胞增殖(24h) | 第32-33页 |
4.3.3 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第33-35页 |
4.3.4 Western blot | 第35-37页 |
4.3.5 统计分析 | 第37页 |
4.4 实验结果 | 第37-45页 |
4.4.1 MGF-C25E 促进 rMSCs 定向迁移 | 第37-38页 |
4.4.2 MGF-C25E 促进 rMSCs SDF-1 和 CXCR4 的表达 | 第38-41页 |
4.4.3 MGF-C25E 通过激活 ERK1/2 信号促进 rMSCs 迁移 | 第41-43页 |
4.4.4 抑制 CXCR4 阻碍了 ERK1/2 磷酸化以及 rMSCs 迁移 | 第43-45页 |
4.5 讨论 | 第45-47页 |
4.6 本章小结 | 第47-48页 |
5 MGF-C25E 通过 CXCR4-ERK1/2 信号通路影响 rMSCS 的力学特性 | 第48-55页 |
5.1 引言 | 第48-49页 |
5.2 实验材料 | 第49-50页 |
5.2.1 主要仪器与耗材 | 第49页 |
5.2.2 主要实验药品与试剂 | 第49-50页 |
5.2.3 主要试剂的配制 | 第50页 |
5.3 实验原理与方法 | 第50-51页 |
5.3.1 AFM 检测细胞杨氏模量 | 第50页 |
5.3.2 荧光显微镜检测骨架蛋白表达变化 | 第50-51页 |
5.3.3 统计分析 | 第51页 |
5.4 实验结果 | 第51-53页 |
5.4.1 MGF-C25E 增加 rMSCs 细胞硬度 | 第51页 |
5.4.2 MGF-C25E 对 rMSCs F-actin 表达的影响 | 第51页 |
5.4.3 AMD3100、PD98059 消除了 MGF-C25E 对 rMSCs 力学特性的影响 | 第51-53页 |
5.5 讨论 | 第53-54页 |
5.6 本章小结 | 第54-55页 |
6 结论与展望 | 第55-57页 |
6.1 主要结论 | 第55页 |
6.2 后续研究工作的展望 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
附录 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第65-66页 |