中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩写表 | 第13-15页 |
第1章 绪论 | 第15-27页 |
1.1 microRNA | 第15-19页 |
1.1.1 miRNA 的生物起源 | 第15-16页 |
1.1.2 miRNA 的调控机制 | 第16-17页 |
1.1.3 miRNA 靶基因的预测方法 | 第17页 |
1.1.4 miRNA 与肿瘤 | 第17-19页 |
1.1.5 miR-21 | 第19页 |
1.2 自噬 | 第19-24页 |
1.2.1 自噬的过程 | 第20-21页 |
1.2.2 自噬相关通路及基因 | 第21-23页 |
1.2.3 自噬与肿瘤 | 第23-24页 |
1.2.4 电离辐射与自噬 | 第24页 |
1.3 miRNA 与自噬 | 第24-25页 |
1.4 立题依据 | 第25-27页 |
第2章 材料与方法 | 第27-38页 |
2.1 主要试剂及器材 | 第27-28页 |
2.1.1 试剂 | 第27-28页 |
2.1.2 器材 | 第28页 |
2.2 主要仪器 | 第28-29页 |
2.3 主要实验材料和方法 | 第29-38页 |
2.3.1 细胞株 | 第29-30页 |
2.3.2 照射条件与方式 | 第30页 |
2.3.3 细胞脂质体转染 miRNA mimic/inhibitor | 第30-31页 |
2.3.4 RNA 提取与定量 | 第31页 |
2.3.5 Quantitative real-time (qRT-PCR) | 第31-32页 |
2.3.6 蛋白质免疫印记法(Western Blot) | 第32-36页 |
2.3.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第36页 |
2.3.8 MDC 染色荧光显微镜观察 | 第36页 |
2.3.9 MDC 染色流式细胞术分析 | 第36页 |
2.3.10 MTT 比色法检测细胞增殖活性 | 第36-37页 |
2.3.11 细胞模型的构建 | 第37页 |
2.3.12 统计学方法 | 第37-38页 |
第3章 实验结果 | 第38-52页 |
3.1 电离辐射诱导 HeLa 细胞自噬并促进 miR-21 的表达 | 第38-39页 |
3.1.1 电离辐射诱导 HeLa 细胞自噬 | 第38页 |
3.1.2 电离辐射促进 miR-21 的表达 | 第38-39页 |
3.2 miR-21 在电离辐射诱导 HeLa 细胞死亡中的作用 | 第39-43页 |
3.2.1 qRT-PCR 检测 HeLa 细胞中 miR-21 转染情况 | 第39-40页 |
3.2.2 MTT 比色法检测 miR-21 对电离辐射诱导的细胞存活的影响 | 第40页 |
3.2.3 miR-21 对电离辐射诱导细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
3.2.4 miR-21 对电离辐射诱导细胞自噬的影响 | 第41-43页 |
3.3 miR-21 调节自噬相关基因 Beclin1 的表达 | 第43-45页 |
3.3.1 Western blot 方法验证 miR-21 上调 Beclin1 的表达 | 第43-44页 |
3.3.2 通过沉默模型验证 miR-21 上调 Beclin1 的表达 | 第44-45页 |
3.4 电离辐射诱导 SiHa 细胞自噬并促进 miR-21 的表达 | 第45-46页 |
3.4.1 电离辐射诱导 SiHa 细胞自噬 | 第45-46页 |
3.4.2 SiHa 细胞中 miR-21 的表达 | 第46页 |
3.5 miR-21 在电离辐射诱导 SiHa 细胞死亡中的作用 | 第46-51页 |
3.5.1 qRT-PCR 检测 SiHa 细胞中 miR-21 转染情况 | 第46-47页 |
3.5.2 MTT 法检测细胞存活 | 第47-48页 |
3.5.3 miR-21 在电离辐射诱导 SiHa 细胞凋亡中的作用 | 第48-49页 |
3.5.4 miR-21 在电离辐射诱导 SiHa 细胞自噬中的作用 | 第49-51页 |
3.6 在 SiHa 细胞中 miR-21 下调 Beclin1 的表达 | 第51-52页 |
3.6.1 Western blot 方法验证 miR-21 下调 Beclin1 的表达 | 第51-52页 |
第4章 讨论 | 第52-56页 |
第5章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
作者简介 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |