| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第11-16页 |
| 1.1 体细胞胚胎发育过程 | 第11页 |
| 1.2 WOX基因家族研究概况 | 第11-12页 |
| 1.3 WOX2基因在胚胎形成和发育中的作用 | 第12-13页 |
| 1.4 WOX5基因在根端分生组织中的作用 | 第13-14页 |
| 1.5 立题依据 | 第14-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-30页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 供试小麦 | 第16-17页 |
| 2.1.2 试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 引物合成 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-30页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.2.1.1 小麦愈伤组织诱导和分化 | 第18页 |
| 2.2.1.2 小麦组织及发育期种子收集 | 第18页 |
| 2.2.2 基因组DNA提取 | 第18-19页 |
| 2.2.3 RNA提取 | 第19页 |
| 2.2.4 mRNA反转录成cDNA | 第19-20页 |
| 2.2.5 基因组DNA保守区域的PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.6 PCR产物的回收、纯化 | 第21页 |
| 2.2.7 与TA克隆载体的连接反应 | 第21-22页 |
| 2.2.8 大肠杆菌的转化 | 第22页 |
| 2.2.8.1 感受态细胞的制备 | 第22页 |
| 2.2.8.2 热击转化 | 第22页 |
| 2.2.9 阳性克隆筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.10 序列测定 | 第23页 |
| 2.2.11 电子克隆、热不对称交错PCR及RT-PCR获得ORF序列 | 第23-26页 |
| 2.2.11.1 电子克隆 | 第23页 |
| 2.2.11.2 热不对称交错PCR | 第23-25页 |
| 2.2.11.3 RT-PCR分析 | 第25-26页 |
| 2.2.12 序列生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.13 原核诱导表达分析 | 第26-28页 |
| 2.2.13.1 原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.13.2 重组菌诱导表达 | 第27-28页 |
| 2.2.13.3 SDS-PAGE电泳 | 第28页 |
| 2.2.14 荧光定量 | 第28-30页 |
| 2.2.14.1 相对标准样品的制备 | 第29页 |
| 2.2.14.2 实时荧光定量PCR | 第29页 |
| 2.2.14.3 荧光定量PCR数据分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| 3.1 小麦WOX2基因的扩增和结构分析 | 第30-33页 |
| 3.2 小麦WOX5基因扩增 | 第33-36页 |
| 3.3 WOX5基因在小麦族中扩增和结构分析 | 第36-37页 |
| 3.4 构建系统发育树 | 第37-40页 |
| 3.4.1 WOX2基因系统发育树的构建 | 第37-38页 |
| 3.4.2 WOX5基因系统发育树的构建 | 第38-40页 |
| 3.5 原核表达 | 第40-42页 |
| 3.6 荧光定量PCR | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 TaWOX2和TaWOX5s是小麦WOX家族的成员 | 第44页 |
| 4.2 WOX2和WOX5在小麦基因组中的以多拷贝形式存在 | 第44-45页 |
| 4.3 TaWOX2和TaWOX5s蛋白的功能 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 在读期间发表论文 | 第51页 |
