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表达水貂肠炎病毒VP2蛋白的重组杆状病毒的构建及其免疫原性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-22页
   ·水貂肠炎病毒第12-17页
     ·MEV 的形态与基因组第12-13页
     ·MEV 的理化特性及血凝性第13页
     ·MEV 的培养特性第13-14页
     ·MEV 衣壳蛋白第14页
     ·MEV 非结构蛋白第14-15页
     ·MEV 流行病学第15页
     ·MEV 疫苗的研究现状第15-17页
   ·杆状病毒作为表达载体系统的研究进展第17-20页
     ·杆状病毒的形态第17-18页
     ·杆状病毒作为表达载体的优点第18页
     ·Bac-to-Bac 表达系统第18-19页
     ·杆状病毒表达系统的应用第19-20页
     ·病毒样颗粒及其应用第20页
   ·本研究的背景及目的.第20-22页
第二章 表达水貂肠炎病毒 VP2 蛋白的重组杆状病毒的构建第22-36页
   ·材料与方法第22-30页
     ·菌株、载体及细胞第22页
     ·试剂第22页
     ·病毒基因组的提取第22-23页
     ·VP2 基因的克隆第23-25页
     ·转移载体的构建与鉴定第25-26页
     ·质粒DNA 的转座第26页
     ·重组Bacmid DNA 的提取第26页
     ·Bacmid DNA 的 PCR 鉴定第26-27页
     ·重组质粒转染sf9 昆虫细胞获得杆状病毒第27-28页
     ·杆状病毒滴度的测定第28-29页
     ·重组 VP2 蛋白的表达及鉴定第29页
     ·重组蛋白的鉴定第29-30页
   ·结果第30-34页
     ·VP2 基因的扩增第30-31页
     ·克隆载体的构建及鉴定第31页
     ·转移载体的鉴定第31-32页
     ·重组 Bacmid-VP2 表达载体的的 PCR 鉴定第32页
     ·重组表达载体转染 Sf9 昆虫细胞第32-33页
     ·电镜观察表达的 VP2 蛋白第33页
     ·Western-blotting 鉴定表达的 VP2 蛋白活性第33-34页
     ·间接免疫荧光法鉴定表达的 VP2 蛋白活性第34页
   ·讨论第34-36页
第三章 水貂肠炎病毒重组 VP2 蛋白的免疫原性分析第36-43页
   ·材料及方法第36-38页
     ·材料第36页
     ·方法第36-38页
   ·结果第38-41页
     ·MEV VP2 重组杆状病毒在昆虫细胞中的增殖结果第38页
     ·蛋白初步纯化结果第38页
     ·抗 MEV 抗体 HI 检测结果第38-41页
   ·讨论第41-43页
第四章 全文结论第43-44页
   ·本研究的基本结论第43页
   ·本研究的意义第43-44页
参考文献第44-47页
致谢第47-48页
作者简介第48页

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