| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第1章 绪论 | 第17-34页 |
| 1.1 铁对生物体的作用 | 第17-18页 |
| 1.2 铁的吸收机制 | 第18-20页 |
| 1.2.1 机理I（strategy I）植物铁吸收机制 | 第18-19页 |
| 1.2.2 机理II（strategy II）植物铁吸收机制 | 第19-20页 |
| 1.3 铁在植物中的转运 | 第20-28页 |
| 1.3.1 木质部韧皮部铁转运 | 第20-23页 |
| 1.3.2 铁在叶片细胞内的区室化 | 第23-26页 |
| 1.3.3 叶绿体中铁的转运 | 第26-28页 |
| 1.4 铁应答调节 | 第28-30页 |
| 1.4.1 铁缺乏应答调节 | 第28-30页 |
| 1.4.2 铁过量应答调节 | 第30页 |
| 1.5 铁与重金属镉 | 第30-32页 |
| 1.5.1 重金属镉的危害 | 第30-31页 |
| 1.5.2 铁与镉的相互作用 | 第31-32页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第32-33页 |
| 1.7 技术路线 | 第33-34页 |
| 第2章 烟草叶绿体透性酶Nt PIC1的克隆及序列分析 | 第34-54页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 实验材料 | 第35页 |
| 2.2.1 植株材料及质粒材料 | 第35页 |
| 2.2.2 实验药品 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-45页 |
| 2.3.1 引物设计与合成 | 第35页 |
| 2.3.2 烟草Nt PIC1的克隆 | 第35-36页 |
| 2.3.3 测序结果的处理及分析 | 第36-37页 |
| 2.3.4 氨基酸序列属性分析 | 第37页 |
| 2.3.5 进化树的构建 | 第37页 |
| 2.3.6 Southern blot分析 | 第37-41页 |
| 2.3.7 基因的表达特异性分析 | 第41-42页 |
| 2.3.8 基因的亚细胞定位 | 第42-44页 |
| 2.3.9 构建酵母表达载体及功能互补验证 | 第44-45页 |
| 2.4 实验结果 | 第45-53页 |
| 2.4.1 烟草Nt PIC1基因的克隆 | 第45-47页 |
| 2.4.2 Nt PIC1序列结构分析 | 第47-48页 |
| 2.4.3 Nt PIC1的系统进化分析 | 第48-50页 |
| 2.4.4 Nt PIC1亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 2.4.5 Nt PIC1在烟草各组织中的表达 | 第51-52页 |
| 2.4.6 Nt PIC1的酿酒酵母缺失突变体fet3fet4转化及功能互补鉴定 | 第52-53页 |
| 2.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第3章 Nt PIC1对烟草的转化及功能分析 | 第54-79页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 实验材料 | 第54-55页 |
| 3.2.1 植物材料及质粒材料 | 第54-55页 |
| 3.2.2 实验药品 | 第55页 |
| 3.3 实验方法 | 第55-65页 |
| 3.3.1 Nt PIC1表达载体构建 | 第55-58页 |
| 3.3.2 烟草的遗传转化 | 第58-59页 |
| 3.3.3 转基因烟草的分子生物学检测 | 第59-62页 |
| 3.3.4 叶绿素含量测定 | 第62页 |
| 3.3.5 叶绿体铁含量测定 | 第62-63页 |
| 3.3.6 叶绿体亚显微结构观察 | 第63页 |
| 3.3.7 q RT-PCR分析铁代谢相关基因表达量 | 第63-65页 |
| 3.4 实验结果 | 第65-77页 |
| 3.4.1 植物表达载体的构建 | 第65-67页 |
| 3.4.2 Nt PIC1对烟草的遗传转化 | 第67-69页 |
| 3.4.3 转基因烟草的分子生物学检测 | 第69-72页 |
| 3.4.4 转基因烟草的叶绿素含量及叶绿体铁含量检测 | 第72-74页 |
| 3.4.5 Nt PIC1影响叶绿体亚显微结构 | 第74-76页 |
| 3.4.6 Nt PIC1影响铁代谢相关基因的表达 | 第76-77页 |
| 3.5 本章小结 | 第77-79页 |
| 第4章 Nt PIC1基因对其他金属的响应 | 第79-95页 |
| 4.1 引言 | 第79-80页 |
| 4.2 实验材料 | 第80页 |
| 4.3 实验方法 | 第80-85页 |
| 4.3.1 转Nt PIC1酿酒酵母对其他金属的响应 | 第80页 |
| 4.3.2 镉（Cd）胁迫下WT和Nt PIC1-OX植物的生长 | 第80-81页 |
| 4.3.3 金属铁和镉含量的测定 | 第81页 |
| 4.3.4 叶绿素含量的测定 | 第81页 |
| 4.3.5 q RT-PCR分析铁转运相关基因表达量 | 第81-82页 |
| 4.3.6 抗氧化酶和MDA含量的测定 | 第82-85页 |
| 4.4 实验结果 | 第85-93页 |
| 4.4.1 异源表达Nt PIC1基因的酿酒酵母对其他金属的响应 | 第85-86页 |
| 4.4.2 过表达Nt PIC1植株对Cd有耐受性 | 第86-88页 |
| 4.4.3 Cd胁迫下WT和Nt PIC1-OX植株的叶绿素含量及金属含量检测 | 第88-89页 |
| 4.4.4 Cd胁迫下铁转运相关基因表达量检测 | 第89-92页 |
| 4.4.5 抗氧化指标检测 | 第92-93页 |
| 4.5 本章小结 | 第93-95页 |
| 第5章 讨论 | 第95-106页 |
| 5.1 Nt PIC1参与叶绿体铁转运并影响植物的生长发育 | 第95-99页 |
| 5.1.1 Nt PIC1在烟草中向叶绿体转运铁 | 第95-97页 |
| 5.1.2 Nt PIC1影响叶绿体结构形成及植物生长发育 | 第97-99页 |
| 5.2 Nt PIC1维持植物铁稳态 | 第99-101页 |
| 5.2.1 Nt PIC1与Nt FER相互协调作用维持铁稳态 | 第99-100页 |
| 5.2.2 Nt PIC1影响其他铁代谢相关基因的表达 | 第100-101页 |
| 5.3 Nt PIC1过表达增加植物Cd耐受性 | 第101-106页 |
| 5.3.1 Nt PIC1介导铁转运可减轻烟草Cd损伤 | 第101-103页 |
| 5.3.2 铁与镉的相互作用及相关机制 | 第103-106页 |
| 论文的创新点 | 第106-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-123页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
