摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
引言 | 第10-13页 |
1.中医药治疗骨质疏松研究现状 | 第10-11页 |
2.Wnt/β-catenin 信号通路在骨重建中的作用 | 第11-12页 |
3.本实验的立题依据及实验假说 | 第12-13页 |
第一部分 薯蓣皂苷对MC3T3-E1细胞形态及细胞增殖的影响 | 第13-26页 |
1.1 实验材料 | 第13-16页 |
1.1.1 药品及试剂 | 第13-14页 |
1.1.2 仪器设备及耗材 | 第14-15页 |
1.1.3 实验细胞 | 第15页 |
1.1.4 试剂配制 | 第15-16页 |
1.2 实验方法 | 第16-19页 |
1.2.1 细胞复苏 | 第16页 |
1.2.2 细胞传代培养 | 第16-17页 |
1.2.3 细胞冻存 | 第17页 |
1.2.4 显微镜下观察MC3T3-E1细胞形态 | 第17页 |
1.2.5 MTT法测定DIO对MC3T3-E1细胞增殖的影响 | 第17页 |
1.2.6 流式细胞技术测定DIO对细胞周期的影响 | 第17页 |
1.2.7 实时荧光定量PCR法测定增殖相关基因Ki67、PCNA mRNA的表达 | 第17-19页 |
1.2.8 统计学分析 | 第19页 |
1.3 结果 | 第19-24页 |
1.4 讨论 | 第24-25页 |
1.5 小结 | 第25-26页 |
第二部分 薯蓣皂苷对MC3T3-E1细胞分化的影响 | 第26-37页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-32页 |
2.2.1 碱性磷酸酶的活性测定 | 第29-30页 |
2.2.2 茜素红染色检测钙化结节 | 第30页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR法测定增殖相关基因BGP、OPN mRNA的表达 | 第30-32页 |
2.2.4 统计学分析 | 第32页 |
2.3 结果 | 第32-36页 |
2.4 讨论 | 第36页 |
2.5 小结 | 第36-37页 |
第三部分 Wnt/β-catenin信号通路在薯蓣皂苷诱导MC3T3-E1细胞增殖分化中的作用 | 第37-49页 |
3.1 实验材料 | 第37-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-45页 |
3.2.1 实时荧光定量PCR法测定基因β-catenin, runx2,CyclinD1 mRNA的表达 | 第41-43页 |
3.2.2 Western-blot方法检测DIO对MC3T3-E1细胞表达β-catenin,Runx2,CyclinD1蛋白的影响 | 第43-45页 |
3.2.3 统计学分析 | 第45页 |
3.3 结果 | 第45-47页 |
3.4 讨论 | 第47-48页 |
3.5 小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
附录 主要缩略语对照表 | 第55-56页 |
附图 | 第56-61页 |
致谢 | 第61页 |