| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-38页 |
| 第一章 桃拉综合征病毒的研究进展 | 第12-28页 |
| 1 引言 | 第12页 |
| 2 桃拉病毒的发现 | 第12-13页 |
| 3 病原学 | 第13-14页 |
| 4 流行病学 | 第14页 |
| ·宿主动物 | 第14页 |
| ·传播途径和机制 | 第14页 |
| 5 临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
| 6 诊断 | 第15-18页 |
| ·传统方法 | 第15-16页 |
| ·免疫学方法 | 第16-17页 |
| ·分子生物学方法 | 第17-18页 |
| 7 桃拉综合征病毒的分子生物学特征 | 第18-21页 |
| ·基因结构 | 第18-19页 |
| ·基因的多样性 | 第19-21页 |
| ·基因表达 | 第21页 |
| 8 小结 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-28页 |
| 第二章 传染性皮下及造血组织坏死病毒的研究概况 | 第28-38页 |
| 1 引言 | 第28页 |
| 2 病原学 | 第28-29页 |
| 3 流行病学 | 第29-30页 |
| ·宿主动物 | 第29页 |
| ·传播途径 | 第29-30页 |
| 4 临床症状和病理变化 | 第30-31页 |
| 5 诊断 | 第31-34页 |
| ·传统方法 | 第31-32页 |
| ·免疫学方法 | 第32页 |
| ·分子生物学方法 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 第二篇 实验研究 | 第38-82页 |
| 第三章 桃拉综合征和传染性皮下及造血组织坏死病的流行病学调查 | 第38-56页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| ·参考毒株 | 第39页 |
| ·样品采集及预处理 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·主要溶液的配制 | 第40页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-45页 |
| ·样品的处理 | 第41页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第41-42页 |
| ·TSV的检测 | 第42-44页 |
| ·IHHNV的检测 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-51页 |
| ·TSV的检测结果 | 第45-47页 |
| ·IHHNV的检测结果 | 第47-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 第四章 桃拉综合征病毒(TSV)结构蛋白VP1和VP3的表达 | 第56-70页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·毒株 | 第56-57页 |
| ·菌株 | 第57页 |
| ·主要酶和试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·PCR引物设计 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-61页 |
| ·病毒总RNA的提取 | 第57-58页 |
| ·RT-PCR | 第58页 |
| ·PCR产物的鉴定、回收与纯化 | 第58页 |
| ·PCR产物的T/A连接 | 第58-59页 |
| ·连接产物的转化 | 第59页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第59页 |
| ·重组质粒pCold-VP1/VP3的构建 | 第59页 |
| ·连接产物的转化 | 第59-60页 |
| ·重组质粒pCold-VP1/VP3的双酶切鉴定 | 第60页 |
| ·测序分析 | 第60页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第60页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第60-61页 |
| ·pCold-VP1/VP3重组蛋白的纯化 | 第61页 |
| ·电镜观察pCold-VP1/VP3重组蛋白 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-65页 |
| ·TSV检测结果 | 第61-62页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增及重组质粒pCold-VP1/VP3双酶切鉴定结果 | 第62-63页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第63-64页 |
| ·上清的纯化 | 第64-65页 |
| ·pCold-VP1/VP3重组蛋白的电镜观察结果 | 第65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 第五章 桃拉综合征病毒(TSV)结构蛋白VP1与VP3之间的相互作用 | 第70-77页 |
| 1 材料 | 第71页 |
| ·毒株 | 第71页 |
| ·菌株 | 第71页 |
| ·主要酶和试剂 | 第71页 |
| ·主要仪器设备 | 第71页 |
| ·PCR引物设计 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-74页 |
| ·病毒总RNA的提取 | 第71-72页 |
| ·RT-PCR | 第72页 |
| ·PCR产物的鉴定、回收与纯化 | 第72页 |
| ·PCR产物的T/A连接 | 第72页 |
| ·连接产物的转化 | 第72页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第72页 |
| ·重组质粒pGEX-VP1的构建 | 第72-73页 |
| ·连接产物的转化 | 第73页 |
| ·重组质粒pGEX-VP1的双酶切鉴定 | 第73页 |
| ·测序分析 | 第73页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第73-74页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第74页 |
| ·Pull-Down分析 | 第74页 |
| 3 结果 | 第74-77页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增及重组质粒pGEX-VP1双酶切鉴定结果 | 第74-76页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第76页 |
| ·Pull-Down分析 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 全文总结 | 第82-84页 |
| 附录 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
