| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 迟钝爱德华氏菌 | 第11页 |
| 1.2 小鼠作为感染模型的研究 | 第11-13页 |
| 1.3 小鼠来源的细胞作为模型的研究 | 第13-19页 |
| 1.3.1 小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)分离鉴定及相关研究 | 第13-15页 |
| 1.3.2 小鼠中性粒细胞研究 | 第15-17页 |
| 1.3.3 传代细胞模型研究 | 第17-18页 |
| 1.3.4 小鼠组织器官原代细胞分离及相关研究 | 第18-19页 |
| 1.4 本课题研究内容及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 迟钝爱德华氏菌野生株EIB202感染小鼠的研究 | 第20-35页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2.1 细菌及实验动物 | 第20页 |
| 2.2.2 主要实验试剂与缓冲液 | 第20页 |
| 2.2.3 培养基 | 第20-21页 |
| 2.2.4 主要实验器材及仪器设备 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 不同注射方式、不同注射剂量下小鼠存活率 | 第21-22页 |
| 2.3.2 EIB202半数致死量(LD_(50))计算 | 第22页 |
| 2.3.3 EIB202感染动力学研究 | 第22-23页 |
| 2.3.4 小鼠感染病症 | 第23页 |
| 2.3.5 冷冻组织切片和病理组织切片 | 第23页 |
| 2.4 实验结果 | 第23-33页 |
| 2.4.1 不同注射方式、不同注射剂量下小鼠存活率统计 | 第23-24页 |
| 2.4.2 小鼠半数致死量测定结果 | 第24-26页 |
| 2.4.3 迟钝爱德华氏菌EIB202感染动力学结果 | 第26-27页 |
| 2.4.4 EIB202对小鼠致病性表现 | 第27-30页 |
| 2.4.5 冷冻组织切片和病理组织切片分析 | 第30-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-34页 |
| 2.6 结论 | 第34-35页 |
| 第3章 迟钝爱德华氏菌各种突变株感染小鼠的研究 | 第35-41页 |
| 3.1 前言 | 第35-36页 |
| 3.2 实验材料 | 第36页 |
| 3.2.1 细菌及实验动物 | 第36页 |
| 3.2.2 主要实验试剂与缓冲液 | 第36页 |
| 3.2.3 培养基 | 第36页 |
| 3.2.4 主要实验器材及仪器设备 | 第36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.3.1 TTSS相关基因缺失株感染小鼠动力学考查 | 第36-37页 |
| 3.3.2 T6SS相关基因缺失株小鼠体内早期定植能力考查 | 第37页 |
| 3.3.3 △evpP菌株在小鼠体内感染动力学 | 第37页 |
| 3.4 实验结果 | 第37-39页 |
| 3.4.1 TTSS相关基因缺失株感染小鼠动力学结果 | 第37-38页 |
| 3.4.2 T6SS相关基因缺失株小鼠体内早期定植能力 | 第38-39页 |
| 3.4.3 △evpP菌株在小鼠体内感染动力学结果 | 第39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-40页 |
| 3.6 结论 | 第40-41页 |
| 第4章 EIB202感染小鼠BMDM模型的研究 | 第41-57页 |
| 4.1 前言 | 第41页 |
| 4.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.2.1 细菌、细胞株及实验动物 | 第41页 |
| 4.2.2 主要实验试剂与缓冲液 | 第41-42页 |
| 4.2.4 主要实验器材及仪器设备 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-50页 |
| 4.3.1 骨髓来源巨噬细胞BMDM分离及培养 | 第42-46页 |
| 4.3.2 EIB202对BMDM的黏附及内化能力考察 | 第46页 |
| 4.3.3 EIB202刺激BMDM产生炎症小体情况 | 第46-48页 |
| 4.3.4 细胞焦亡情况 | 第48页 |
| 4.3.5 小鼠血清中IL-1β测定 | 第48-50页 |
| 4.4 实验结果 | 第50-56页 |
| 4.4.1 L929细胞及BMDM分离、分化增殖结果 | 第50-52页 |
| 4.4.2 BMDM流式细胞仪鉴定结果 | 第52-53页 |
| 4.4.3 EIB202对BMDM的黏附率和内化率 | 第53-54页 |
| 4.4.4 炎症小体激活及焦亡结果 | 第54-55页 |
| 4.4.5 EIB202使小鼠在早期产生炎症小体 | 第55-56页 |
| 4.5 讨论 | 第56页 |
| 4.6 结论 | 第56-57页 |
| 第5章 EIB202感染中性粒细胞(PMN)模型的研究 | 第57-65页 |
| 5.1 前言 | 第57页 |
| 5.2 实验材料 | 第57-58页 |
| 5.2.1 细菌、细胞株及实验动物 | 第57页 |
| 5.2.2 主要实验试剂与缓冲液 | 第57页 |
| 5.2.3 培养基 | 第57页 |
| 5.2.4 主要实验器材及仪器设备 | 第57-58页 |
| 5.3 实验方法 | 第58-61页 |
| 5.3.1 中性粒细胞分离培养 | 第58-60页 |
| 5.3.2 PMN杀菌实验 | 第60-61页 |
| 5.4 实验结果 | 第61-63页 |
| 5.4.1 两种PMN分离方法比较 | 第61-62页 |
| 5.4.2 PMN对EIB202吞噬及杀菌作用 | 第62-63页 |
| 5.4.3 PMN对EIB202及其突变株杀菌作用比较 | 第63页 |
| 5.5 讨论 | 第63-64页 |
| 5.6 结论 | 第64-65页 |
| 第6章 巨噬细胞调理的EIB202感染小鼠组织原代细胞的研究 | 第65-74页 |
| 6.1 前言 | 第65页 |
| 6.2 实验材料 | 第65-66页 |
| 6.2.1 细菌、细胞株及实验动物 | 第65页 |
| 6.2.2 主要实验试剂与缓冲液 | 第65-66页 |
| 6.2.3 培养基 | 第66页 |
| 6.2.4 主要实验器材及仪器设备 | 第66页 |
| 6.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 6.3.1 原代细胞分离培养 | 第66-67页 |
| 6.3.2 巨噬细胞系调理的EIB202(Escaped EIB202)侵染组织原代细胞实验 | 第67-68页 |
| 6.3.3 荧光显微镜观察细菌侵染能力 | 第68页 |
| 6.4 实验结果 | 第68-73页 |
| 6.4.1 细胞分离及培养结果 | 第68-72页 |
| 6.4.2 侵染原代组织细胞结果 | 第72-73页 |
| 6.5 讨论 | 第73页 |
| 6.6 结论 | 第73-74页 |
| 第7章 结论、创新点与展望 | 第74-75页 |
| 7.1 结论 | 第74页 |
| 7.2 创新点 | 第74页 |
| 7.3 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
