| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 电离辐射损伤 | 第10-12页 |
| 1.1.1 电离辐射概述 | 第10页 |
| 1.1.2 电离辐射的用途与危害 | 第10-11页 |
| 1.1.3 辐射防护状况简介 | 第11-12页 |
| 1.2 辐射诱导的旁效应 | 第12-15页 |
| 1.2.1 旁效应概述 | 第12页 |
| 1.2.2 辐射诱导旁效应的机理 | 第12-15页 |
| 1.2.2.1 旁效应中的信号转导 | 第13-14页 |
| 1.2.2.2 间隙连接和辐射旁效应 | 第14-15页 |
| 1.3 蛋白激酶C | 第15-16页 |
| 1.3.1 蛋白激酶C概述 | 第15页 |
| 1.3.2 PKC在辐射生物学效应中的调控研究 | 第15-16页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.2 细胞株 | 第17-18页 |
| 2.3 其他试剂 | 第18页 |
| 2.4 实验方法 | 第18-30页 |
| 2.4.1 主要溶液配方 | 第18-21页 |
| 2.4.1.1 培养基的配制 | 第18-19页 |
| 2.4.1.2 CD59-突变试剂配置 | 第19页 |
| 2.4.1.3 Western blot相关试剂的配制 | 第19-21页 |
| 2.4.2 细胞辐照 | 第21页 |
| 2.4.3 哺乳动物细胞培养 | 第21-22页 |
| 2.4.4 CD59-突变实验 | 第22-23页 |
| 2.4.5 细胞免疫荧光染色实验 | 第23-24页 |
| 2.4.6 细胞裂解总蛋白 | 第24页 |
| 2.4.7 细胞膜蛋白提取 | 第24-25页 |
| 2.4.8 SDS-PAGE-免疫印迹 | 第25-26页 |
| 2.4.9 细胞表面生物素标记实验 | 第26-27页 |
| 2.4.10 TNFR-1 内化实验 | 第27-28页 |
| 2.4.11 TNFR-1 外循环实验 | 第28-29页 |
| 2.4.12 统计分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-40页 |
| 3.1 PKC在辐射诱导旁效应中的作用 | 第30-33页 |
| 3.1.1 旁细胞中PKC发生转位的检测 | 第30-31页 |
| 3.1.2 PKC抑制剂对旁细胞中CD59-突变率的影响 | 第31-32页 |
| 3.1.3 PKC抑制剂对旁效应信号通路中关键蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 3.1.3.1 旁细胞中细胞信号调节激酶的表达 | 第32页 |
| 3.1.3.2 旁细胞中环氧合酶-2 蛋白表达检测 | 第32-33页 |
| 3.2 PKC在TNFα介导的旁效应中的作用 | 第33-38页 |
| 3.2.1 直接受照细胞和旁细胞中TNFα表达量变化的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.2 TNFα去除剂处理后旁细胞中PKC转位的检测 | 第34-35页 |
| 3.2.3 TNFα去除剂处理后旁细胞中ERK和COX-2 表达量变化的检测 | 第35-36页 |
| 3.2.4 TNFα直接处理细胞后PKC转位的检测 | 第36-37页 |
| 3.2.5 TNFα直接处理细胞后ERK和COX-2 表达量变化的检测 | 第37页 |
| 3.2.6 PKC抑制剂对细胞经TNFα处理后CD59-突变率的影响分析 | 第37-38页 |
| 3.3 PKC对TNFα膜受体TNFR-1 表达水平的影响 | 第38-40页 |
| 3.3.1 旁细胞中TNFR1表达量的检测 | 第38-39页 |
| 3.3.2 PKC激活后细胞膜上TNFR-1 表达水平的检测 | 第39页 |
| 3.3.3 PKC激活后TNFR1的内化和重循环 | 第39-40页 |
| 4 结论与讨论 | 第40-44页 |
| 4.1 结论 | 第40-41页 |
| 4.2 讨论 | 第41-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 附录 | 第48页 |
