| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 低温对植物产生的影响 | 第13-19页 |
| 1.1.1 低温胁迫对植物膜系统的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.2 低温胁迫对植物渗透调节物质的影响 | 第14-15页 |
| 1.1.3 低温胁迫对植物抗氧化系统的影响 | 第15-16页 |
| 1.1.4 低温胁迫对光合作用的影响 | 第16-17页 |
| 1.1.5 低温信号通路的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2 MYB转录因子的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.1 MYB转录因子的结构及分类 | 第19-20页 |
| 1.2.2 MYB转录因子的功能 | 第20-21页 |
| 1.2.2.1 MYB转录因子在植物生长发育中的功能 | 第20页 |
| 1.2.2.2 MYB转录因子在植物生物和非生物胁迫响应中的功能 | 第20-21页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 2 材料方法 | 第23-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 材料的培养和处理 | 第23页 |
| 2.1.3 菌株及载体 | 第23页 |
| 2.1.4 生化试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.5 PCR引物 | 第24页 |
| 2.1.6 实验用培养基 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-44页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链合成 | 第26-27页 |
| 2.2.3 SlMYB41基因的克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.4 目的片段的回收 | 第28-29页 |
| 2.2.5 目的片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
| 2.2.6 转化大肠杆菌 | 第29页 |
| 2.2.7 阳性克隆的筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.8 质粒提取 | 第30-31页 |
| 2.2.9 双酶切鉴定测序 | 第31页 |
| 2.2.10 真核表达载体的构建 | 第31页 |
| 2.2.11 农杆菌转化 | 第31-32页 |
| 2.2.12 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第32页 |
| 2.2.13 转基因番茄的筛选鉴定 | 第32-35页 |
| 2.2.13.1 CTAB法提取植物基因组 | 第33页 |
| 2.2.13.2 SDS法提取植物基因组DNA | 第33-34页 |
| 2.2.13.3 PCR鉴定 | 第34页 |
| 2.2.13.4 qRT-PCR检测转基因株系的表达量 | 第34-35页 |
| 2.2.14 SlMYB41蛋白的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 2.2.14.1 SlMYB41-GFP表达载体的构建 | 第35页 |
| 2.2.14.2 瞬时转化烟草 | 第35-36页 |
| 2.2.15 相关生理指标的测定 | 第36-40页 |
| 2.2.15.1 抗氧化酶活性的测定 | 第36-38页 |
| 2.2.15.2 丙二醛(MDA)含量测定 | 第38页 |
| 2.2.15.3 游离脯氨酸含量测定 | 第38-39页 |
| 2.2.15.4 氧自由基含量测定 | 第39页 |
| 2.2.15.5 过氧化氢含量测定 | 第39-40页 |
| 2.2.15.6 逆境伤害程度测定 | 第40页 |
| 2.2.16 SlMYB41转录激活活性验证 | 第40-43页 |
| 2.2.16.1 表达载体的构建 | 第40页 |
| 2.2.16.2 酵母感受态细胞的制备(乙酸锂法) | 第40-41页 |
| 2.2.16.3 酵母感受态细胞转化 | 第41页 |
| 2.2.16.4 转录激活活性的鉴定 | 第41-43页 |
| 2.2.17 转录组测序 | 第43页 |
| 2.2.18 数据分析 | 第43-44页 |
| 3 结果分析 | 第44-66页 |
| 3.1 SlMYB41基因的克隆及序列分析 | 第44-46页 |
| 3.1.1 SlMYB41基因的克隆 | 第44页 |
| 3.1.2 SlMYB41蛋白的序列分析 | 第44-46页 |
| 3.2 SlMYB41蛋白的亚细胞定位 | 第46-47页 |
| 3.3 SlMYB41的转录激活活性验证 | 第47-48页 |
| 3.3.1 SlMYB41-BD载体的构建 | 第47页 |
| 3.3.2 SlMYB41转录激活活性的检测 | 第47-48页 |
| 3.4 SlMYB41基因的表达模式分析 | 第48-50页 |
| 3.4.1 SlMYB41基因在番茄不同器官中的表达分析 | 第48-49页 |
| 3.4.2 SlMYB41基因在不同非生物胁迫下的表达分析 | 第49-50页 |
| 3.5 SlMYB41基因在番茄中的遗传转化 | 第50-51页 |
| 3.5.1 SlMYB41基因表达载体的构建 | 第50页 |
| 3.5.2 SlMYB41转基因株系的筛选鉴定 | 第50-51页 |
| 3.6 SlMYB41的表达影响番茄的低温抗性 | 第51-56页 |
| 3.6.1 SlMYB41过表达株系对低温敏感,RNAi株系低温抗性增强 | 第51-52页 |
| 3.6.2 低温下SlMYB41的表达影响植株的H_2O_2含量 | 第52-53页 |
| 3.6.3 低温下SlMYB41的表达影响番茄抗氧化酶活性 | 第53-54页 |
| 3.6.4 低温下SlMYB41的表达影响细胞膜的完整性 | 第54-55页 |
| 3.6.5 低温下SlMYB41的表达影响番茄体内游离脯氨酸的积累 | 第55-56页 |
| 3.7 过表达株系与野生型株系低温处理下的转录组测序分析 | 第56-66页 |
| 3.7.1 测序质量分析 | 第56-57页 |
| 3.7.2 差异表达基因分析 | 第57-61页 |
| 3.7.3 差异表达基因的GO注释分析 | 第61-62页 |
| 3.7.4 差异表达基因的KEGG富集分析 | 第62-63页 |
| 3.7.5 低温和清除ROS相关基因表达分析 | 第63-66页 |
| 4 讨论 | 第66-71页 |
| 4.1 SlMYB41基因是一个R2R3型的MYB转录因子 | 第66-67页 |
| 4.2 SlMYB41调控番茄低温抗性的生理机制 | 第67-68页 |
| 4.3 SlMYB41调控番茄低温抗性的可能的分子机制 | 第68-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第84页 |
