摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 小麦转基因研究 | 第11-18页 |
1.1.1 小麦外植体类型选择 | 第12-15页 |
1.1.1.1 幼胚外植体研究 | 第12-13页 |
1.1.1.2 成熟胚外植体研究 | 第13页 |
1.1.1.3 小麦花药培养 | 第13-14页 |
1.1.1.4 小麦幼穗培养 | 第14-15页 |
1.1.2 小麦遗传转化方法 | 第15-18页 |
1.1.2.1 基因枪法 | 第15-16页 |
1.1.2.2 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
1.1.2.3 花粉管通道法 | 第17页 |
1.1.2.4 其他遗传转化方法 | 第17-18页 |
1.2 多价转基因的研究进展 | 第18-20页 |
1.2.1 杂交 | 第18-19页 |
1.2.2 多次转化 | 第19页 |
1.2.3 共转化 | 第19页 |
1.2.4 连锁基因转化 | 第19页 |
1.2.5 叶绿体转化 | 第19-20页 |
1.3 非生物胁迫研究之意义 | 第20-25页 |
1.3.1 小麦非生物胁迫研究 | 第20-21页 |
1.3.2 基因的功能与转该基因之目的 | 第21-24页 |
1.3.2.1 AtAVP1 基因 | 第21-22页 |
1.3.2.2 OsSIZ1 基因 | 第22-23页 |
1.3.2.3 FNR-Fld基因 | 第23-24页 |
1.3.3 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 质粒的获得 | 第25-29页 |
2.1.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.2 仪器 | 第26页 |
2.1.3 试验方法 | 第26-29页 |
2.1.3.1 粒向大肠杆菌的转化 | 第26页 |
2.1.3.2 质粒制备 | 第26-27页 |
2.1.2.3 质粒PCR反应及酶切 | 第27-29页 |
2.2 基因枪法介导的遗传转化 | 第29-33页 |
2.2.1 材料与仪器 | 第29页 |
2.2.1.1 小麦供体材料 | 第29页 |
2.2.1.2 基本培养基储备液 | 第29页 |
2.2.1.3 其他常用试剂 | 第29页 |
2.2.1.4 基因枪 | 第29页 |
2.2.1.5 DNA包裹 | 第29页 |
2.2.2 小麦幼胚组织培养方法 | 第29-33页 |
2.2.2.1 培养基的准备 | 第29-30页 |
2.2.2.2 准备供体材料 | 第30页 |
2.2.2.3 愈伤组织的培养 | 第30页 |
2.2.2.4 高渗培养 | 第30-31页 |
2.2.2.5 基因枪转化 | 第31-33页 |
2.2.2.6 轰击后培养 | 第33页 |
2.2.2.7 分化筛选 | 第33页 |
2.2.2.8 再生 | 第33页 |
2.2.2.9 植株的春化和移栽 | 第33页 |
2.3 转基因植株T_0代及T_1代PCR检测 | 第33-36页 |
2.3.1 材料 | 第33-34页 |
2.3.2 试验方法 | 第34-36页 |
2.3.2.1 CTAB法提取小麦DNA | 第34页 |
2.3.2.2 转基因植株T_0代PCR检测 | 第34-35页 |
2.3.2.3 T_1代转基因小麦株系的PCR检测 | 第35-36页 |
2.4 根癌农杆菌介导法的遗传转化 | 第36-39页 |
2.4.1 实验材料及试剂 | 第36-37页 |
2.4.1.1 实验材料 | 第36页 |
2.4.1.2 实验常用溶液及工具 | 第36页 |
2.4.1.3 农杆菌菌株和载体 | 第36页 |
2.4.1.4 细菌培养基 | 第36页 |
2.4.1.5 植物组织培养基 | 第36-37页 |
2.4.2 农杆菌介导的遗传转化 | 第37-39页 |
2.4.2.1 幼胚接种 | 第37页 |
2.4.2.2 农杆菌菌液活化及侵染 | 第37页 |
2.4.2.3 恢复培养 | 第37页 |
2.4.2.4 筛选生长培养 | 第37-38页 |
2.4.2.5 再生植株 | 第38页 |
2.4.2.6 转基因小麦T_0代PCR鉴定 | 第38-39页 |
3.结果与分析 | 第39-48页 |
3.1 质粒转化大肠杆菌的结果 | 第39-40页 |
3.2 基因枪遗传转化 | 第40-42页 |
3.3 农杆菌的遗传转化结果 | 第42-44页 |
3.4 转基因T_0代植株PCR检测 | 第44-46页 |
3.5 T_1代植物的PCR检测结果 | 第46-47页 |
3.6 结论 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
4.1 实验准备阶段存在的问题 | 第48页 |
4.2 遗传转化阶段出现的问题 | 第48-49页 |
4.3 实验检测阶段出现的问题 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |