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基因枪法和农杆菌介导基因AtAVP1、OsSIZ1、FNR-FLD对小麦幼胚愈伤组织的遗传转化

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 文献综述第11-25页
    1.1 小麦转基因研究第11-18页
        1.1.1 小麦外植体类型选择第12-15页
            1.1.1.1 幼胚外植体研究第12-13页
            1.1.1.2 成熟胚外植体研究第13页
            1.1.1.3 小麦花药培养第13-14页
            1.1.1.4 小麦幼穗培养第14-15页
        1.1.2 小麦遗传转化方法第15-18页
            1.1.2.1 基因枪法第15-16页
            1.1.2.2 农杆菌介导法第16-17页
            1.1.2.3 花粉管通道法第17页
            1.1.2.4 其他遗传转化方法第17-18页
    1.2 多价转基因的研究进展第18-20页
        1.2.1 杂交第18-19页
        1.2.2 多次转化第19页
        1.2.3 共转化第19页
        1.2.4 连锁基因转化第19页
        1.2.5 叶绿体转化第19-20页
    1.3 非生物胁迫研究之意义第20-25页
        1.3.1 小麦非生物胁迫研究第20-21页
        1.3.2 基因的功能与转该基因之目的第21-24页
            1.3.2.1 AtAVP1 基因第21-22页
            1.3.2.2 OsSIZ1 基因第22-23页
            1.3.2.3 FNR-Fld基因第23-24页
        1.3.3 本研究的目的意义第24-25页
2 材料与方法第25-39页
    2.1 质粒的获得第25-29页
        2.1.1 材料第25-26页
        2.1.2 仪器第26页
        2.1.3 试验方法第26-29页
            2.1.3.1 粒向大肠杆菌的转化第26页
            2.1.3.2 质粒制备第26-27页
            2.1.2.3 质粒PCR反应及酶切第27-29页
    2.2 基因枪法介导的遗传转化第29-33页
        2.2.1 材料与仪器第29页
            2.2.1.1 小麦供体材料第29页
            2.2.1.2 基本培养基储备液第29页
            2.2.1.3 其他常用试剂第29页
            2.2.1.4 基因枪第29页
            2.2.1.5 DNA包裹第29页
        2.2.2 小麦幼胚组织培养方法第29-33页
            2.2.2.1 培养基的准备第29-30页
            2.2.2.2 准备供体材料第30页
            2.2.2.3 愈伤组织的培养第30页
            2.2.2.4 高渗培养第30-31页
            2.2.2.5 基因枪转化第31-33页
            2.2.2.6 轰击后培养第33页
            2.2.2.7 分化筛选第33页
            2.2.2.8 再生第33页
            2.2.2.9 植株的春化和移栽第33页
    2.3 转基因植株T_0代及T_1代PCR检测第33-36页
        2.3.1 材料第33-34页
        2.3.2 试验方法第34-36页
            2.3.2.1 CTAB法提取小麦DNA第34页
            2.3.2.2 转基因植株T_0代PCR检测第34-35页
            2.3.2.3 T_1代转基因小麦株系的PCR检测第35-36页
    2.4 根癌农杆菌介导法的遗传转化第36-39页
        2.4.1 实验材料及试剂第36-37页
            2.4.1.1 实验材料第36页
            2.4.1.2 实验常用溶液及工具第36页
            2.4.1.3 农杆菌菌株和载体第36页
            2.4.1.4 细菌培养基第36页
            2.4.1.5 植物组织培养基第36-37页
        2.4.2 农杆菌介导的遗传转化第37-39页
            2.4.2.1 幼胚接种第37页
            2.4.2.2 农杆菌菌液活化及侵染第37页
            2.4.2.3 恢复培养第37页
            2.4.2.4 筛选生长培养第37-38页
            2.4.2.5 再生植株第38页
            2.4.2.6 转基因小麦T_0代PCR鉴定第38-39页
3.结果与分析第39-48页
    3.1 质粒转化大肠杆菌的结果第39-40页
    3.2 基因枪遗传转化第40-42页
    3.3 农杆菌的遗传转化结果第42-44页
    3.4 转基因T_0代植株PCR检测第44-46页
    3.5 T_1代植物的PCR检测结果第46-47页
    3.6 结论第47-48页
4 讨论第48-50页
    4.1 实验准备阶段存在的问题第48页
    4.2 遗传转化阶段出现的问题第48-49页
    4.3 实验检测阶段出现的问题第49-50页
参考文献第50-57页
附录第57-59页
致谢第59-60页

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