| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 材料和方法 | 第16-24页 |
| 1.材料 | 第16-19页 |
| 1.1 细胞系 | 第16页 |
| 1.2 主要实验仪器及器材 | 第16-17页 |
| 1.3 主要实验试剂与药品 | 第17-18页 |
| 1.4 主要实验试剂的配置 | 第18-19页 |
| 2.方法 | 第19-23页 |
| 2.1 细胞培养 | 第19页 |
| 2.2 总RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.3 电泳分析RNA的完整性 | 第20页 |
| 2.4 引物设计 | 第20页 |
| 2.5 反转录 | 第20-21页 |
| 2.6 SYBR Green染料法q PCR | 第21页 |
| 2.7 PCR | 第21页 |
| 2.8 划痕 | 第21-22页 |
| 2.9 Transwell | 第22页 |
| 2.10 Western blotting | 第22页 |
| 2.11 免疫荧光 | 第22页 |
| 2.12 si RNA转染 | 第22页 |
| 2.13 载体构建 | 第22-23页 |
| 2.14 荧光报告基因实验 | 第23页 |
| 3.统计学分析 | 第23-24页 |
| 结果 | 第24-36页 |
| 1.缺氧条件下，缺氧诱导因子HIF-1α转录调节HOTTIP的表达 | 第24-25页 |
| 1.1 缺氧条件对HOTTIP表达量的影响 | 第24页 |
| 1.2 HIF-1α 转录调控HOTTIP的表达 | 第24-25页 |
| 2.长链非编码RNA HOTTIP阻断HIF-1α的降解,稳定HIF-1α | 第25-27页 |
| 2.1 HOTTIP调节HIF-1α的蛋白水平 | 第25-26页 |
| 2.2 HOTTIP通过阻断HIF-1α泛素蛋白酶体的降解途径，从而稳定HIF-1α | 第26-27页 |
| 3.缺氧条件下，HOTTIP通过上调ZEB1，从而下调E-cadherin，最终使得肝癌细胞发生上皮间质转化 | 第27-31页 |
| 3.1 敲低HOTTIP对肝癌细胞表型的影响 | 第27-28页 |
| 3.2 缺氧条件下，HOTTIP通过调节E-cadherin，导致EMT | 第28-30页 |
| 3.3 缺氧条件下，ZEB1介导了HOTTIP调节E-cadherin的过程，导致EMT | 第30-31页 |
| 4.HOTTIP通过下调mi RNA-200a和上调WDR5，导致ZEB1上调，促进EMT过程 | 第31-36页 |
| 4.1 HOTTIP作为ce RNA吸附mi RNA-200a,减少对ZEB1的抑制作用 | 第31-34页 |
| 4.2 HOTIIP稳定WDR5，从而促进ZEB1蛋白表达量上升 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 综述 | 第42-53页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
