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拟南芥中DNase和RNase的预测及功能分析

中文摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-33页
    1.1 核酸酶的分类、功能与催化机制第11-23页
        1.1.1 核酸酶研究概况第11-12页
        1.1.2 核酸分解反应第12-15页
            1.1.2.1 核酸分解反应的化学基础第12-13页
            1.1.2.2 亲核攻击底物第13-14页
            1.1.2.3 核酸酶底物第14页
            1.1.2.4 磷酸键剪切产物第14-15页
        1.1.3 核酸酶多样性以及分类第15-18页
            1.1.3.1 核酸酶在结构、催化机制和生物学功能的联系上缺乏统一性第16页
            1.1.3.2 核酸酶活性相关二价阳离子基本特性第16-18页
            1.1.3.3 催化机制存在特异性的核酸酶第18页
        1.1.4 根据金属离子依赖性对核酸酶进行分类第18-23页
            1.1.4.1 双金属离子依赖催化机制第19-22页
            1.1.4.2 单金属离子依赖催化机制第22页
            1.1.4.3 金属离子不依赖催化机制第22-23页
    1.2 高等植物中核酸酶研究概况第23-32页
        1.2.1 高等植物中核酸降解的意义第23-27页
            1.2.1.1 DNA降解与叶片衰老第24页
            1.2.1.2 DNA降解与植物营养第24-25页
            1.2.1.3 核酸降解与生物胁迫第25页
            1.2.1.4 核酸降解与植物发育第25-26页
            1.2.1.5 核酸降解与非生物胁迫第26-27页
        1.2.2 DNA降解相关核酸酶第27-30页
            1.2.2.1 DNA核酸内切酶第27-29页
            1.2.2.2 DNA核酸外切酶第29-30页
        1.2.3 RNA降解相关核酸酶第30-31页
        1.2.4 核酸酶鉴定方法第31-32页
    1.3 研究目的与意义第32-33页
2 材料与方法第33-43页
    2.1 实验材料第33-37页
        2.1.1 植物材料第33页
        2.1.2 酶与各种生化试剂第33页
        2.1.3 引物第33-37页
    2.2 实验方法第37-43页
        2.2.1 植物材料的处理第37页
        2.2.2 TRIzol法提取RNA第37-38页
        2.2.3 cDNA的获得第38-39页
            2.2.3.1 RNA中基因组DNA的去除第38页
            2.2.3.2 RNA反转录第38-39页
        2.2.4 qRT-PCR第39-40页
            2.2.4.1 qRT-PCR引物设计第39页
            2.2.4.2 qRT-PCR反应体系第39页
            2.2.4.3 qRT-PCR反应条件第39-40页
        2.2.5 拟南芥基因组DNA提取(小量法)第40页
        2.2.6 PCR鉴定突变体纯合植株第40-41页
            2.2.6.1 植物材料获得第40页
            2.2.6.2 三引物法鉴定原理第40-41页
            2.2.6.3 PCR鉴定反应体系及反应条件第41页
        2.2.7 生物信息学分析第41-43页
            2.2.7.1 蛋白基本信息预测第41页
            2.2.7.2 构建系统发育树第41-42页
            2.2.7.3 基因结构绘制第42页
            2.2.7.4 染色体定位分析第42页
            2.2.7.5 基因表达模式预测第42-43页
3 结果与分析第43-68页
    3.1 拟南芥中DNase和RNase基因预测第43-48页
        3.1.1 拟南芥中DNase基因预测第43-45页
        3.1.2 拟南芥中RNase基因预测第45-48页
    3.2 拟南芥中DNase和RNase基本生化特性分析第48-52页
        3.2.1 拟南芥中DNase理化特性分析第48-50页
        3.2.2 拟南芥中RNase理化特性分析第50-52页
    3.3 拟南芥中DNase和RNase家族进化关系及基因结构分析第52-54页
        3.3.1 拟南芥中DNase家族进化关系及基因结构分析第52-53页
        3.3.2 拟南芥中RNase家族进化关系及基因结构分析第53-54页
    3.4 拟南芥中DNase和RNase基因染色体定位分析第54-56页
        3.4.1 拟南芥中DNase基因染色体定位分析第54-55页
        3.4.2 拟南芥中RNase基因染色体定位分析第55-56页
    3.5 拟南芥中DNase和RNase基因表达模式预测第56-58页
        3.5.1 拟南芥中DNase基因表达模式预测第56-57页
        3.5.2 拟南芥中RNase基因表达模式预测第57-58页
    3.6 拟南芥中DNase和RNase基因逆境胁迫诱导表达检测第58-64页
        3.6.1 拟南芥中DNase基因逆境胁迫诱导表达检测第58-61页
        3.6.2 拟南芥中RNase基因逆境胁迫诱导表达检测第61-64页
    3.7 拟南芥中DNase和RNase基因突变体筛选第64-66页
        3.7.1 拟南芥中DNase基因突变体筛选第64-65页
        3.7.2 拟南芥中RNase基因突变体筛选第65-66页
    3.8 拟南芥中DNase和RNase突变体抗逆表型鉴定第66-68页
4 讨论第68-71页
    4.1 拟南芥中DNase及RNase蛋白基本生化特性第68-69页
    4.2 拟南芥中DNase及RNase基因与生长发育第69-70页
    4.3 拟南芥中DNase及RNase基因与逆境胁迫相应第70-71页
5 结论第71-72页
参考文献第72-81页
致谢第81页

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