真菌gfp表达载体构建及农杆菌介导转化胶孢炭疽菌研究
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| 1.1 核桃炭疽病 | 第12-15页 |
| 1.1.1 核桃炭疽病的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 胶孢炭疽菌 | 第13-14页 |
| 1.1.3 核桃与胶孢炭疽菌病原互作研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2 绿色荧光蛋白研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2.1 绿色荧光蛋白 | 第15-16页 |
| 1.2.2 绿色荧光蛋白在真菌里表达的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3 真菌遗传转化 | 第17-19页 |
| 1.3.1 农杆菌介导法 | 第17-18页 |
| 1.3.2 用于真菌转化的质粒载体 | 第18-19页 |
| 1.4 选题的目的和意义 | 第19-21页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.2 供试菌株 | 第23-24页 |
| 2.1.3 所用培养基 | 第24页 |
| 2.2 主要试剂与仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-41页 |
| 2.3.1 独立表达载体的构建 | 第25-32页 |
| 2.3.2 融合表达载体的构建 | 第32-37页 |
| 2.3.3 ATMT介导法遗传转化胶孢炭疽菌 | 第37-39页 |
| 2.3.4 转化子的鉴定 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-51页 |
| 3.1 独立表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.1.1 hph筛选元件和gfp表达元件的构建 | 第41-42页 |
| 3.1.2 Vector片段的获取 | 第42页 |
| 3.1.3 构建结果检测及转化 | 第42-43页 |
| 3.1.4 独立表达载体图谱 | 第43页 |
| 3.2 融合表达载体的构建 | 第43-47页 |
| 3.2.1 片段的获取 | 第43-45页 |
| 3.2.2 Vector片段的获取 | 第45页 |
| 3.2.3 构建结果检测及转化 | 第45-46页 |
| 3.2.4 融合表达载体图谱 | 第46-47页 |
| 3.3 胶孢炭疽真菌孢子的获得 | 第47页 |
| 3.4 抗生素对供试菌株的抑制效果测定 | 第47-48页 |
| 3.5 胶孢炭疽菌绿色荧光蛋白的遗传转化鉴定 | 第48-51页 |
| 3.5.1 共培养方法的筛选结果 | 第48-49页 |
| 3.5.2 遗传转化和分子鉴定 | 第49页 |
| 3.5.3 胶孢炭疽菌m9转化子的荧光检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 关于构建真菌gfp表达载体 | 第51页 |
| 4.2 关于胶孢炭疽菌孢子的获得 | 第51-52页 |
| 4.3 关于ATMT转化条件 | 第52-53页 |
| 4.4 关于gfp标记的胶孢炭疽菌菌株的获得 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
| 附录 | 第65-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
