| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1.1 中华鳖简介 | 第13-14页 |
| 1.2 脊椎动物性别决定机制研究 | 第14-18页 |
| 1.2.1 哺乳类性别决定机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 非哺乳类脊椎动物性别决定机制 | 第15-18页 |
| 1.3 中华鳖TSD机制研究 | 第18-19页 |
| 1.4 爬行动物TSD机制性别决定与性别分化相关基因 | 第19-22页 |
| 1.4.1 双向潜能性性腺发育相关基因 | 第20-21页 |
| 1.4.2 雄性性别相关基因 | 第21-22页 |
| 1.4.3 雌性性别相关基因 | 第22页 |
| 1.5 叉头框转录因子 2（Foxl2） | 第22-25页 |
| 1.5.1 Foxl2基因概述 | 第22-23页 |
| 1.5.2 Foxl2基因在脊椎动物中的研究现状 | 第23-25页 |
| 1.5.3 Foxl2参与性别决定机制 | 第25页 |
| 1.6 Foxl2在爬行动物中的功能 | 第25-26页 |
| 1.7 激素诱导爬行动物性别分化的研究 | 第26-28页 |
| 第2章 引言 | 第28-30页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第28页 |
| 2.2 研究内容 | 第28-29页 |
| 2.3 研究路线 | 第29-30页 |
| 第3章 中华鳖Foxl2基因的CDNA克隆及组织表达分析 | 第30-54页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第30-32页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要仪器和设备 | 第31页 |
| 3.1.4 主要制备试剂 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 3.2.1 实验用具的预处理 | 第32页 |
| 3.2.2 实验材料收集 | 第32页 |
| 3.2.3 中华鳖组织总RNA提取 | 第32-34页 |
| 3.2.4 Foxl2基因中间片段克隆 | 第34-36页 |
| 3.2.5 PCR产物回收纯化 | 第36页 |
| 3.2.6 连接反应 | 第36-37页 |
| 3.2.7 连接产物转化实验 | 第37页 |
| 3.2.8 阳性克隆的筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.9 测序及生物信息学分析 | 第38页 |
| 3.2.10 实时定量PCR | 第38-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-51页 |
| 3.3.1 总RNA的质量检测 | 第41页 |
| 3.3.2 中华鳖Foxl2基因中间片段的克隆 | 第41页 |
| 3.3.3 cDNA完整性检测 | 第41-42页 |
| 3.3.4 中华鳖Foxl2基因氨基酸序列分析 | 第42-43页 |
| 3.3.5 Foxl2蛋白组成及理化特性分析 | 第43-44页 |
| 3.3.6 Foxl2开放阅读框（ORF）分析 | 第44页 |
| 3.3.7 蛋白编码产物功能预测 | 第44-45页 |
| 3.3.8 中华鳖Foxl2蛋白结构域分析 | 第45页 |
| 3.3.9 疏水性分析 | 第45-46页 |
| 3.3.10 跨膜区域分析 | 第46页 |
| 3.3.11中华鳖与其它物种Foxl2基因氨基酸序列的同源性分析及对比分析 | 第46-48页 |
| 3.3.12 Foxl2和GAPDH基因实时荧光定量PCR引物特异性检测 | 第48-50页 |
| 3.3.13 中华鳖Foxl2基因的组织差异性表达分析 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 3.4.1 中华鳖Foxl2基因的序列分析 | 第51-52页 |
| 3.4.2 中华鳖Foxl2的组织表达与其功能的关系 | 第52-53页 |
| 3.5 小结 | 第53-54页 |
| 第4章 MT和E2对中华鳖成鳖Foxl2基因的表达影响 | 第54-62页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第54-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第54页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第54-55页 |
| 4.1.4 实验准备 | 第55页 |
| 4.1.5 实验过程 | 第55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-56页 |
| 4.2.1 总RNA提取 | 第55页 |
| 4.2.2 实时荧光定量PCR | 第55页 |
| 4.2.3 数据分析 | 第55-56页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第56-59页 |
| 4.3.1 E2对雌雄中华鳖Foxl2基因表达影响 | 第56-57页 |
| 4.3.2 MT对雌雄中华鳖Foxl2基因表达影响 | 第57-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-60页 |
| 4.4.1 E2对中华鳖雌雄个体Foxl2基因表达影响 | 第59页 |
| 4.4.2 MT对中华鳖雌雄个体Foxl2基因表达影响 | 第59页 |
| 4.4.3 MT和E2相互结果结合讨论 | 第59-60页 |
| 4.5 小结 | 第60-62页 |
| 第5章 温度、E2和MT对中华鳖Foxl2基因在胚胎中的表达影响 | 第62-70页 |
| 5.1 实验材料与试剂 | 第62-63页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 5.1.2 主要试剂及配制 | 第62-63页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第63页 |
| 5.1.4 实验准备 | 第63页 |
| 5.2 实验方法 | 第63-64页 |
| 5.2.1 中华鳖卵孵化及性激素处理 | 第63页 |
| 5.2.2 总RNA提取 | 第63-64页 |
| 5.2.3 实时荧光定量PCR | 第64页 |
| 5.2.4 数据分析 | 第64页 |
| 5.3 实验结果及分析 | 第64-66页 |
| 5.3.1 部分总RNA提取结果 | 第64页 |
| 5.3.2 Foxl2基因在不同温度孵化后稚鳖性别鉴定 | 第64-65页 |
| 5.3.3 Foxl2基因在不同温度下不同发育时期胚胎中的表达模式 | 第65-66页 |
| 5.3.4 Foxl2基因在E2和MT处理下不同发育时期整个胚胎中的表达模式 | 第66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-68页 |
| 5.4.1 不同温度对中华鳖稚鳖性别比例影响 | 第66-67页 |
| 5.4.2 不同温度对中华鳖Foxl2表达影响 | 第67页 |
| 5.4.3 E2和MT对中华鳖Foxl2表达影响 | 第67-68页 |
| 5.4.4 E2和MT对中华鳖Foxl2在胚胎和成鳖表达影响结合分析 | 第68页 |
| 5.5 小结 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-86页 |
| 附录一 | 第86-87页 |
| 附录二 | 第87-90页 |
| 致谢 | 第90-92页 |
| 在学校期间所发表文章 | 第92页 |
