| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩写与符号 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 油菜具有重要的农业生产地位 | 第14-15页 |
| 1.2 种子大小是重要的农艺性状 | 第15页 |
| 1.3 影响种子大小的分子机制 | 第15-23页 |
| 1.3.1 蛋白酶体降解途径 | 第16-17页 |
| 1.3.2 植物激素途径 | 第17-20页 |
| 1.3.3 G蛋白信号途径 | 第20-21页 |
| 1.3.4 各种途径之间的联系 | 第21-23页 |
| 1.4 OLE调节种子大小的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 1.6 主要研究内容及技术路线 | 第25-28页 |
| 1.6.1 主要研究内容 | 第25-27页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 BnOLE的生物信息学分析与功能预测 | 第28-38页 |
| 2.1 序列 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.2.1 BnOLE及其它OLE家族基因的序列获得 | 第29-30页 |
| 2.2.2 BnOLE的氨基酸组成和理化性质分析 | 第30页 |
| 2.2.3 BnOLE的亲/疏水性、跨膜结构以及磷酸化位点的分析 | 第30页 |
| 2.2.4 BnOLE的保守结构域与蛋白基序分析 | 第30页 |
| 2.2.5 BnOLE进化地位分析 | 第30-31页 |
| 2.2.6 BnOLE组织表达谱的预测分析 | 第31页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第31-36页 |
| 2.3.1 BnOLE理化性质分析 | 第31页 |
| 2.3.2 BnOLE亲/疏水性分析 | 第31-32页 |
| 2.3.3 BnOLE跨膜结构分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 BnOLE磷酸化位点分析 | 第33页 |
| 2.3.5 BnOLE结构域与蛋白基序分析 | 第33-34页 |
| 2.3.6 BnOLE进化地位分析 | 第34-35页 |
| 2.3.7 BnOLE组织表达谱的预测分析 | 第35-36页 |
| 2.4 实验讨论与小结 | 第36-38页 |
| 第三章 BnOLE过量表达植株的获得与鉴定 | 第38-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-44页 |
| 3.1.1 载体、菌种和实验植物 | 第38页 |
| 3.1.2 主要实验试剂与药品 | 第38-39页 |
| 3.1.3 主要实验试剂的配制 | 第39-44页 |
| 3.1.4 主要实验仪器与设备 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-52页 |
| 3.2.1 BnOLE序列克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.2 入门载体PENTR的连接与转化 | 第45-46页 |
| 3.2.3 入门载体PENTR的阳性克隆鉴定 | 第46页 |
| 3.2.4 表达载体pB2GW7.0 的连接（LR反应）与转化 | 第46-47页 |
| 3.2.5 表达载体pB2GW7.0 的阳性克隆鉴定 | 第47页 |
| 3.2.6 甘蓝型油菜的遗传转化 | 第47页 |
| 3.2.7 Basta除草剂高通量初筛油菜转化株 | 第47-48页 |
| 3.2.8 BnOLE过量表达植株PCR分子鉴定 | 第48-50页 |
| 3.2.9 BnOLE过量表达植株总RNA提取 | 第50页 |
| 3.2.10 总RNA反转录为单链cDNA | 第50-51页 |
| 3.2.11 BnOLE在过量表达植株中的表达量分析 | 第51-52页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第52-59页 |
| 3.3.1 BnOLE的克隆 | 第52-53页 |
| 3.3.2 入门载体PENTR转化株的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.3.3 表达载体pB2GW7.0 转化株的鉴定 | 第54-55页 |
| 3.3.4 BnOLE过量表达植株的高通量筛选 | 第55-56页 |
| 3.3.5 BnOLE过量表达植株的PCR鉴定 | 第56-58页 |
| 3.3.6 BnOLE在过量表达植株中的表达量分析 | 第58-59页 |
| 3.4 实验讨论与小结 | 第59-61页 |
| 第四章 BnOLE过量表达植株的表型分析 | 第61-75页 |
| 4.1 实验材料 | 第61-64页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第61页 |
| 4.1.2 主要实验试剂与药品 | 第61-62页 |
| 4.1.3 主要实验试剂的配制 | 第62-64页 |
| 4.1.4 主要实验仪器与设备 | 第64页 |
| 4.2 实验方法 | 第64-66页 |
| 4.2.1 种子、子叶、真叶、花和角果等器官大小的测量 | 第64-65页 |
| 4.2.2 种子千粒重的称量 | 第65页 |
| 4.2.3 真叶栅栏细胞相差显微镜观察 | 第65-66页 |
| 4.2.4 种子胚子叶细胞的透射电镜观察 | 第66页 |
| 4.2.5 角果数（SPP）、角果粒数（SPS）等农艺性状的统计 | 第66页 |
| 4.2.6 种子含油量的测量 | 第66页 |
| 4.2.7 种子油脂组分的测量 | 第66页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第66-74页 |
| 4.3.1 BnOLE过量表达引起种子尺寸和千粒重增加 | 第66-67页 |
| 4.3.2 BnOLE过量表达引起子叶的增大 | 第67-68页 |
| 4.3.3 BnOLE过量表达引起真叶增大 | 第68页 |
| 4.3.4 BnOLE过量表达引起花增大 | 第68-69页 |
| 4.3.5 BnOLE过量表达引起角果增长 | 第69-70页 |
| 4.3.6 BnOLE过量表达引起细胞增多 | 第70页 |
| 4.3.7 BnOLE过量表达引起油体增多 | 第70-71页 |
| 4.3.8 BnOLE过量表达植株的角果数和角果粒数没有变化 | 第71-72页 |
| 4.3.9 BnOLE过量表达植株的种子含油量没有明显变化 | 第72-73页 |
| 4.3.10 BnOLE过量表达引起种子油脂组分变化 | 第73-74页 |
| 4.4 实验讨论与小结 | 第74-75页 |
| 第五章 BnOLE可能参与调节种子大小途径的预测与验证 | 第75-81页 |
| 5.1 实验材料 | 第75页 |
| 5.1.1 实验植株材料 | 第75页 |
| 5.1.2 主要实验试剂与药品 | 第75页 |
| 5.1.3 主要实验仪器与设备 | 第75页 |
| 5.2 实验方法 | 第75-76页 |
| 5.2.1 可能与BnOLE相互作用的基因预测 | 第75页 |
| 5.2.2 植株总RNA的提取 | 第75-76页 |
| 5.2.3 植物总RNA反转录为cDNA | 第76页 |
| 5.2.4 荧光定量PCR | 第76页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第76-80页 |
| 5.3.1 可能与BnOLE相互作用的基因预测 | 第76-78页 |
| 5.3.2 BnOLE可能参与调节种子大小的途径分析 | 第78页 |
| 5.3.3 BnOLE可能参与调节种子大小的途径验证 | 第78-80页 |
| 5.4 实验讨论与小结 | 第80-81页 |
| 第六章 BnOLE抑制表达植株的获得与鉴定 | 第81-89页 |
| 6.1 实验材料 | 第81-82页 |
| 6.1.1 载体、菌种和实验植物 | 第81-82页 |
| 6.1.2 主要实验试剂与药品 | 第82页 |
| 6.1.3 主要实验设备与仪器 | 第82页 |
| 6.2 实验方法 | 第82-83页 |
| 6.2.1 RNA干扰区域的选择 | 第82页 |
| 6.2.2 RNA干扰区域序列的获得 | 第82页 |
| 6.2.3 入门载体和表达载体的构建 | 第82-83页 |
| 6.2.4 RNA干扰植株的鉴定 | 第83页 |
| 6.3 实验结果与分析 | 第83-87页 |
| 6.3.1 入门载体的鉴定 | 第83-84页 |
| 6.3.2 表达载体的鉴定 | 第84-85页 |
| 6.3.3 RNA干扰植株的鉴定 | 第85-86页 |
| 6.3.4 RNA干扰植株中BnOLE的表达量分析 | 第86-87页 |
| 6.4 实验讨论与小结 | 第87-89页 |
| 第七章 总结与展望 | 第89-91页 |
| 7.1 主要工作总结 | 第89-90页 |
| 7.2 工作展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第97页 |
| 在学期间参与的科研项目 | 第97页 |
