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负载myostatin-propeptide的Exosome在杜兴肌肉萎缩症上的功能研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩略语第12-13页
前言第13-17页
    研究现状、成果第13-16页
    研究目的、方法第16-17页
对象和方法第17-38页
    1.实验材料第17-21页
        1.1 细胞系第17页
        1.2 质粒第17页
        1.3 实验动物第17页
        1.4 主要仪器设备第17-18页
        1.5 实验试剂第18-21页
        1.6 引物第21页
        1.7 主要分析工具软件第21页
    2.实验方法第21-38页
        2.1 试剂配制第21-25页
        2.2 细胞系培养第25-26页
        2.3 CD63-Propeptide质粒构建第26-31页
        2.4 Fugen HD转染细胞第31-32页
        2.5 病毒包装及浓缩第32页
        2.6 病毒感染细胞第32页
        2.7 细胞/组织总蛋白提取第32-33页
        2.8 蛋白浓度测定第33页
        2.9 Western Blot第33-34页
        2.10 细胞培养上清中exosome提取第34页
        2.11 exosome电镜鉴定第34页
        2.12 局部注射第34页
        2.13 系统注射第34-35页
        2.14 体重及抓力测量第35页
        2.15 免疫荧光组织化学染色第35页
        2.16 冰冻组织切片H&E染色第35-36页
        2.17 细胞免疫荧光染色第36页
        2.18 肝、肾组织包埋第36页
        2.19 石蜡组织切片第36-37页
        2.20 石蜡组织H&E染色第37-38页
结果第38-59页
    1.稳定表达myostatin-propeptide小鼠细胞系建立第38-40页
        1.1 表达载体构建及验证第38-39页
        1.2 稳定表达myostatin-propeptide细胞系建立及确认第39-40页
    2.EXOmyo-pro表征及功能验证第40-43页
        2.1 EXOmyo-pro大小形态及marker蛋白表达第40-41页
        2.2 EXOmyo-pro与血清中myostatin结合力验证第41-43页
    3.EXOmyo-pro体外功能验证第43-44页
    4.EXOmyo-pro在急性损伤小鼠模型上的功能研究第44-50页
        4.1 局部测试第44-47页
            4.1.1 急性损伤小鼠模型建立第44-45页
            4.1.2 EXOmyo-pro对损伤肌肉再生能力的影响第45-46页
            4.1.3 EXOmyo-pro对损伤肌肉分化能力的影响第46-47页
        4.2 系统测试第47-50页
            4.2.1 EXOmyo-pro促进正常肌肉生长效果评估第47-48页
            4.2.2 EXOmyo-pro对肌肉再生能力的影响第48-49页
            4.2.3 EXOmyo-pro对肌肉分化能力的影响第49-50页
    5.EXOmyo-pro在杜兴肌肉萎缩症小鼠模型上的功能研究第50-59页
        5.1 剂量优化研究第50-53页
            5.1.1 不同剂量EXOmyo-pro对小鼠症状的改善第50-51页
            5.1.2 不同剂量EXOmyo-pro对mdx小鼠肌肉质量和肌纤维面积影响第51-52页
            5.1.3 20mg/kg EXOmyo-pro对损伤肌肉再生能力影响第52-53页
            5.1.4 20mg/kg EXOmyo-pro对损伤肌肉分化能力影响第53页
        5.2 EXOmyo-pro对杜兴肌肉萎缩症小鼠长期累积作用研究第53-59页
            5.2.1 多次重复注射EXOmyo-pro对小鼠症状的改善第54-55页
            5.2.2 多次重复注射EXOmyo-pro对损伤肌肉再生分化能力影响第55-56页
            5.2.3 单次与多次治疗对不同损伤肌肉再生分化能力影响第56-58页
            5.2.4 对EXOmyo-pro相关毒性的测试第58-59页
讨论第59-62页
结论第62页
总论第62-63页
参考文献第63-67页
发表论文和参加科研情况说明第67-68页
综述 Myostatin在DMD上的研究进展第68-87页
    综述参考文献第78-87页
致谢第87-88页
个人简历第88页

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