中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语 | 第12-13页 |
前言 | 第13-17页 |
研究现状、成果 | 第13-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
对象和方法 | 第17-38页 |
1.实验材料 | 第17-21页 |
1.1 细胞系 | 第17页 |
1.2 质粒 | 第17页 |
1.3 实验动物 | 第17页 |
1.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.5 实验试剂 | 第18-21页 |
1.6 引物 | 第21页 |
1.7 主要分析工具软件 | 第21页 |
2.实验方法 | 第21-38页 |
2.1 试剂配制 | 第21-25页 |
2.2 细胞系培养 | 第25-26页 |
2.3 CD63-Propeptide质粒构建 | 第26-31页 |
2.4 Fugen HD转染细胞 | 第31-32页 |
2.5 病毒包装及浓缩 | 第32页 |
2.6 病毒感染细胞 | 第32页 |
2.7 细胞/组织总蛋白提取 | 第32-33页 |
2.8 蛋白浓度测定 | 第33页 |
2.9 Western Blot | 第33-34页 |
2.10 细胞培养上清中exosome提取 | 第34页 |
2.11 exosome电镜鉴定 | 第34页 |
2.12 局部注射 | 第34页 |
2.13 系统注射 | 第34-35页 |
2.14 体重及抓力测量 | 第35页 |
2.15 免疫荧光组织化学染色 | 第35页 |
2.16 冰冻组织切片H&E染色 | 第35-36页 |
2.17 细胞免疫荧光染色 | 第36页 |
2.18 肝、肾组织包埋 | 第36页 |
2.19 石蜡组织切片 | 第36-37页 |
2.20 石蜡组织H&E染色 | 第37-38页 |
结果 | 第38-59页 |
1.稳定表达myostatin-propeptide小鼠细胞系建立 | 第38-40页 |
1.1 表达载体构建及验证 | 第38-39页 |
1.2 稳定表达myostatin-propeptide细胞系建立及确认 | 第39-40页 |
2.EXOmyo-pro表征及功能验证 | 第40-43页 |
2.1 EXOmyo-pro大小形态及marker蛋白表达 | 第40-41页 |
2.2 EXOmyo-pro与血清中myostatin结合力验证 | 第41-43页 |
3.EXOmyo-pro体外功能验证 | 第43-44页 |
4.EXOmyo-pro在急性损伤小鼠模型上的功能研究 | 第44-50页 |
4.1 局部测试 | 第44-47页 |
4.1.1 急性损伤小鼠模型建立 | 第44-45页 |
4.1.2 EXOmyo-pro对损伤肌肉再生能力的影响 | 第45-46页 |
4.1.3 EXOmyo-pro对损伤肌肉分化能力的影响 | 第46-47页 |
4.2 系统测试 | 第47-50页 |
4.2.1 EXOmyo-pro促进正常肌肉生长效果评估 | 第47-48页 |
4.2.2 EXOmyo-pro对肌肉再生能力的影响 | 第48-49页 |
4.2.3 EXOmyo-pro对肌肉分化能力的影响 | 第49-50页 |
5.EXOmyo-pro在杜兴肌肉萎缩症小鼠模型上的功能研究 | 第50-59页 |
5.1 剂量优化研究 | 第50-53页 |
5.1.1 不同剂量EXOmyo-pro对小鼠症状的改善 | 第50-51页 |
5.1.2 不同剂量EXOmyo-pro对mdx小鼠肌肉质量和肌纤维面积影响 | 第51-52页 |
5.1.3 20mg/kg EXOmyo-pro对损伤肌肉再生能力影响 | 第52-53页 |
5.1.4 20mg/kg EXOmyo-pro对损伤肌肉分化能力影响 | 第53页 |
5.2 EXOmyo-pro对杜兴肌肉萎缩症小鼠长期累积作用研究 | 第53-59页 |
5.2.1 多次重复注射EXOmyo-pro对小鼠症状的改善 | 第54-55页 |
5.2.2 多次重复注射EXOmyo-pro对损伤肌肉再生分化能力影响 | 第55-56页 |
5.2.3 单次与多次治疗对不同损伤肌肉再生分化能力影响 | 第56-58页 |
5.2.4 对EXOmyo-pro相关毒性的测试 | 第58-59页 |
讨论 | 第59-62页 |
结论 | 第62页 |
总论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
综述 Myostatin在DMD上的研究进展 | 第68-87页 |
综述参考文献 | 第78-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
个人简历 | 第88页 |