| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第10页 |
| 第一章 对虾白斑综合征病毒概述与研究进展 | 第10-17页 |
| 1 WSSV病原学 | 第10-12页 |
| 1.1 WSSV的形态结构 | 第10-11页 |
| 1.2 WSSV的基因结构 | 第11-12页 |
| 2 WSSV流行病学 | 第12-13页 |
| 2.1 宿主范围 | 第12页 |
| 2.2 传播途径 | 第12-13页 |
| 2.2.1 水平传播 | 第12-13页 |
| 2.2.2 垂直传播 | 第13页 |
| 3 WSSV防治措施及RNA干扰技术的应用 | 第13-15页 |
| 3.1 WSSV的预防措施 | 第13-14页 |
| 3.2 RNA干扰技术 | 第14-15页 |
| 3.2.1 RNA干扰技术的发现 | 第14页 |
| 3.2.2 RNA干扰的作用机制 | 第14-15页 |
| 3.2.3 RNA干扰技术的应用 | 第15页 |
| 4 本研究的意义及目的 | 第15-17页 |
| 第二章 中国部分地区对虾白斑综合征wsv001、wsv025、wsv045基因缺失变异情况 | 第17-34页 |
| 1 实验材料与方法 | 第17-22页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 1.1.1 实验样品 | 第17-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-22页 |
| 1.2.1 组织DNA的提取 | 第21页 |
| 1.2.2 WSSV阳性检测 | 第21页 |
| 1.2.3 目的片段扩增 | 第21-22页 |
| 1.2.4 基因克隆与序列分析 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-32页 |
| 2.1 WSSV阳性检测结果 | 第22-23页 |
| 2.2 目的片段的PCR扩增结果 | 第23-27页 |
| 2.3 序列比对结果 | 第27-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 wsv001、wsv025、wsv045基因克隆及原核表达 | 第34-48页 |
| 1 wsv001、wsv025、wsv045基因克隆 | 第34-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第34页 |
| 1.1.1 实验样品 | 第34页 |
| 1.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 1.2.1 WSSV病料的制备 | 第34页 |
| 1.2.2 WSSV病毒悬液的制备 | 第34-35页 |
| 1.2.3 WSSV病毒DNA的提取 | 第35页 |
| 1.2.4 wsv001、wsv025、wsv045目的片段的克隆 | 第35-36页 |
| 1.3 实验结果 | 第36-38页 |
| 1.3.1 WSSV病毒液电镜图 | 第36-37页 |
| 1.3.2 wsv001、wsv025、wsv045目的片段的扩增 | 第37-38页 |
| 2 wsv001、wsv025、wsv045重组表达载体的构建及蛋白表达 | 第38-47页 |
| 2.1 实验方法 | 第38-42页 |
| 2.1.1 重组表达载体pBAD/gⅢA-001、pBAD/gⅢA-025、pBAD/gⅢA-045 的构建 | 第38-40页 |
| 2.1.2 重组表达载体pBAD/gⅢA-001、pBAD/gⅢA-025、pBAD/gⅢA-045 的诱导表达 | 第40-41页 |
| 2.1.3 诱导表达后蛋白的Western-blot检测 | 第41-42页 |
| 2.2 实验结果 | 第42-47页 |
| 2.2.1 重组载体的构建 | 第42-44页 |
| 2.2.2 诱导表达及Western-blot结果 | 第44-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 运用RNA干扰技术研究wsv01、wsv025、wsv045基因在WSSV感染过程中的作用 | 第48-59页 |
| 1 实验材料与方法 | 第48-53页 |
| 1.1 实验材料 | 第48页 |
| 1.2 实验方法 | 第48-53页 |
| 1.2.1 WSSV病毒悬液的制备 | 第48页 |
| 1.2.2 dsRNA的体外合成 | 第48-50页 |
| 1.2.3 dsRNA干扰后对凡纳滨对虾感染WSSV的影响 | 第50-51页 |
| 1.2.4 dsRNA干扰后对凡纳滨对虾感染WSSV后目的基因表达量的测定 | 第51-52页 |
| 1.2.5 dsRNA干扰后凡纳滨对虾感染WSSV后病毒拷贝数变化测定 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-57页 |
| 2.1 dsRNA干扰后凡纳滨对虾的死亡率 | 第53页 |
| 2.2 dsRNA干扰后凡纳滨对虾感染WSSV目的基因相对表达量 | 第53-55页 |
| 2.3 dsRNA干扰后凡纳滨对虾WSSV病毒拷贝数 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
