摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 不饱和脂肪酸简介 | 第11-13页 |
1.1.1 不饱和脂肪酸的生物功能 | 第11-12页 |
1.1.2 不饱和脂肪酸的合成过程 | 第12-13页 |
1.2 不饱的脂肪酸合成中的关键酶研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 脂肪酸去饱和酶(Fad)的研究概况 | 第13-16页 |
1.2.1.1 Δ6Fad研究概况 | 第13-14页 |
1.2.1.2 Δ5Fad研究概况 | 第14-15页 |
1.2.1.3 Δ4Fad研究概况 | 第15页 |
1.2.1.4 Δ8Fad研究概况 | 第15-16页 |
1.2.2 脂肪酸碳链延长酶(ELOVL)的研究概况 | 第16-17页 |
1.3 鱼类PUFA合成代谢调控机制的研究进展 | 第17-19页 |
1.3.1 转录水平调控 | 第17-19页 |
1.3.1.1 过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPARs) | 第17-18页 |
1.3.1.2 固醇调节元件结合蛋白(SREBPs) | 第18页 |
1.3.1.3 肝X受体(LXR) | 第18-19页 |
1.3.2 转录后水平调控和表观遗传学调控 | 第19页 |
1.4 研究目的意义及技术路线 | 第19-21页 |
1.4.1 研究目的意义 | 第19-20页 |
1.4.2 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 三种饵料对卵形鲳鲹生长、存活及肌肉脂肪酸成分的影响 | 第21-29页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 养殖试验 | 第21页 |
2.1.2 样品采集 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22页 |
2.2.1 卵形鲳鲹生长指标的测定 | 第22页 |
2.2.2 脂肪酸含量测定 | 第22页 |
2.2.3 数据分析 | 第22页 |
2.3 实验结果 | 第22-27页 |
2.3.1 三种饵料对卵形鲳鲹成活及生长的影响 | 第22-23页 |
2.3.2 三种饵料对卵形鲳鲹肌肉组织脂肪酸组成的影响 | 第23-27页 |
2.4 讨论 | 第27-29页 |
第三章 卵形鲳鲹Fads2、Elovl5基因特征和表达分析 | 第29-58页 |
3.1 实验材料 | 第29-31页 |
3.1.1 样品采集 | 第29-30页 |
3.1.2 实验仪器 | 第30页 |
3.1.3 实验试剂 | 第30-31页 |
3.1.4 试剂配制 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-40页 |
3.2.1 总RNA的提取及逆转录 | 第31-34页 |
3.2.1.1 总RNA的提取 | 第31-32页 |
3.2.1.23' RACE模板的合成 | 第32-33页 |
3.2.1.3 cDNA第一条链的合成 | 第33-34页 |
3.2.2 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5基因cDNA克隆 | 第34-39页 |
3.2.2.1 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5 ORF的克隆 | 第35-37页 |
3.2.2.2 卵形鲳鲹Fads2及Elovl53’RACE反应 | 第37-39页 |
3.2.3 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5生物信息学分析 | 第39页 |
3.2.4 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5组织表达分析 | 第39-40页 |
3.2.5 三种脂肪源对Fads2及Elovl5基因营养调控 | 第40页 |
3.3 实验结果 | 第40-55页 |
3.3.1 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5延长酶基因序列分析 | 第40-45页 |
3.3.2 Fads2及Elovl5基因同源性分析 | 第45-51页 |
3.3.3 Fads2及Elovl5基因的组织表达分析 | 第51-53页 |
3.3.4 三种饵料对Fads2及Elovl5基因的营养调控 | 第53-55页 |
3.4 讨论 | 第55-58页 |
第四章 卵形鲳鲹Fads2、Elovl5基因功能测定 | 第58-70页 |
4.1 实验材料 | 第58-60页 |
4.1.1 实验试剂 | 第58-59页 |
4.1.2 试剂配制 | 第59-60页 |
4.2 实验方法 | 第60-64页 |
4.2.1 Fads2及Elovl5基因重组载体的构建 | 第60-61页 |
4.2.2 重组表达载体PYFads2和PYelovl5转化酿酒酵母 | 第61-62页 |
4.2.2.1 酿酒酵母INVSc1细胞感受态制备 | 第61-62页 |
4.2.2.2 重组质粒转化酵母感受态 | 第62页 |
4.2.2.3 筛选阳性酿酒酵母 | 第62页 |
4.2.3 蛋白诱导表达 | 第62-63页 |
4.2.4 气相色谱法及气质联用测定脂肪酸 | 第63-64页 |
4.2.5 Fads2、Elovl5的转化效率的计算 | 第64页 |
4.3 实验结果 | 第64-68页 |
4.3.1 Fads2及Elovl5基因功能验证 | 第64-67页 |
4.3.2 产物脂肪酸的结构测定 | 第67-68页 |
4.4 讨论 | 第68-70页 |
全文总结 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
附录 硕士期间发表的论文与参加的学术会议 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |