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卵形鲳鲹Fads2去饱和酶与Elovl5延长酶基因特征与功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 前言第11-21页
    1.1 不饱和脂肪酸简介第11-13页
        1.1.1 不饱和脂肪酸的生物功能第11-12页
        1.1.2 不饱和脂肪酸的合成过程第12-13页
    1.2 不饱的脂肪酸合成中的关键酶研究进展第13-17页
        1.2.1 脂肪酸去饱和酶(Fad)的研究概况第13-16页
            1.2.1.1 Δ6Fad研究概况第13-14页
            1.2.1.2 Δ5Fad研究概况第14-15页
            1.2.1.3 Δ4Fad研究概况第15页
            1.2.1.4 Δ8Fad研究概况第15-16页
        1.2.2 脂肪酸碳链延长酶(ELOVL)的研究概况第16-17页
    1.3 鱼类PUFA合成代谢调控机制的研究进展第17-19页
        1.3.1 转录水平调控第17-19页
            1.3.1.1 过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPARs)第17-18页
            1.3.1.2 固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)第18页
            1.3.1.3 肝X受体(LXR)第18-19页
        1.3.2 转录后水平调控和表观遗传学调控第19页
    1.4 研究目的意义及技术路线第19-21页
        1.4.1 研究目的意义第19-20页
        1.4.2 技术路线第20-21页
第二章 三种饵料对卵形鲳鲹生长、存活及肌肉脂肪酸成分的影响第21-29页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 养殖试验第21页
        2.1.2 样品采集第21-22页
    2.2 实验方法第22页
        2.2.1 卵形鲳鲹生长指标的测定第22页
        2.2.2 脂肪酸含量测定第22页
        2.2.3 数据分析第22页
    2.3 实验结果第22-27页
        2.3.1 三种饵料对卵形鲳鲹成活及生长的影响第22-23页
        2.3.2 三种饵料对卵形鲳鲹肌肉组织脂肪酸组成的影响第23-27页
    2.4 讨论第27-29页
第三章 卵形鲳鲹Fads2、Elovl5基因特征和表达分析第29-58页
    3.1 实验材料第29-31页
        3.1.1 样品采集第29-30页
        3.1.2 实验仪器第30页
        3.1.3 实验试剂第30-31页
        3.1.4 试剂配制第31页
    3.2 实验方法第31-40页
        3.2.1 总RNA的提取及逆转录第31-34页
            3.2.1.1 总RNA的提取第31-32页
            3.2.1.23' RACE模板的合成第32-33页
            3.2.1.3 cDNA第一条链的合成第33-34页
        3.2.2 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5基因cDNA克隆第34-39页
            3.2.2.1 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5 ORF的克隆第35-37页
            3.2.2.2 卵形鲳鲹Fads2及Elovl53’RACE反应第37-39页
        3.2.3 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5生物信息学分析第39页
        3.2.4 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5组织表达分析第39-40页
        3.2.5 三种脂肪源对Fads2及Elovl5基因营养调控第40页
    3.3 实验结果第40-55页
        3.3.1 卵形鲳鲹Fads2及Elovl5延长酶基因序列分析第40-45页
        3.3.2 Fads2及Elovl5基因同源性分析第45-51页
        3.3.3 Fads2及Elovl5基因的组织表达分析第51-53页
        3.3.4 三种饵料对Fads2及Elovl5基因的营养调控第53-55页
    3.4 讨论第55-58页
第四章 卵形鲳鲹Fads2、Elovl5基因功能测定第58-70页
    4.1 实验材料第58-60页
        4.1.1 实验试剂第58-59页
        4.1.2 试剂配制第59-60页
    4.2 实验方法第60-64页
        4.2.1 Fads2及Elovl5基因重组载体的构建第60-61页
        4.2.2 重组表达载体PYFads2和PYelovl5转化酿酒酵母第61-62页
            4.2.2.1 酿酒酵母INVSc1细胞感受态制备第61-62页
            4.2.2.2 重组质粒转化酵母感受态第62页
            4.2.2.3 筛选阳性酿酒酵母第62页
        4.2.3 蛋白诱导表达第62-63页
        4.2.4 气相色谱法及气质联用测定脂肪酸第63-64页
        4.2.5 Fads2、Elovl5的转化效率的计算第64页
    4.3 实验结果第64-68页
        4.3.1 Fads2及Elovl5基因功能验证第64-67页
        4.3.2 产物脂肪酸的结构测定第67-68页
    4.4 讨论第68-70页
全文总结第70-71页
参考文献第71-78页
附录 硕士期间发表的论文与参加的学术会议第78-79页
致谢第79页

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