中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
1 绪论 | 第14-30页 |
1.1 研究背景 | 第14-27页 |
1.1.1 光信号传导途径 | 第14-19页 |
1.1.2 类囊体膜系统 | 第19-22页 |
1.1.3 叶绿素代谢途径 | 第22-24页 |
1.1.4 膨胀素的研究进展 | 第24-27页 |
1.2 研究内容和研究目的 | 第27-30页 |
1.2.1 研究意义及目的 | 第27-28页 |
1.2.2 主要研究内容 | 第28-29页 |
1.2.3 技术路线 | 第29-30页 |
2 OsLIR1下调表达的转基因植株表现出叶片早衰等多种表型 | 第30-54页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 材料和方法 | 第30-36页 |
2.2.1 材料及生长条件 | 第30-32页 |
2.2.2 干扰载体构建 | 第32-34页 |
2.2.3 生物信息学分析 | 第34页 |
2.2.4 遗传转化 | 第34页 |
2.2.5 基因表达特性分析 | 第34-35页 |
2.2.6 胁迫处理 | 第35页 |
2.2.7 叶绿素含量和光合参数测定 | 第35页 |
2.2.8 叶绿体类囊体膜蛋白的提取 | 第35页 |
2.2.9 蓝绿温和电泳 | 第35页 |
2.2.10 原生质体制备,转化和瞬时检测 | 第35页 |
2.2.11 透射电镜(TEM) | 第35-36页 |
2.2.12 统计分析 | 第36页 |
2.3 结果 | 第36-52页 |
2.3.1 OsLIR1的蛋白互作网络预测 | 第36-37页 |
2.3.2 OsLIR1的表达特性 | 第37-41页 |
2.3.3 OsLIR1的亚细胞定位 | 第41-42页 |
2.3.4 OsLIR1下调表达转基因植株的获得和表型分析 | 第42-45页 |
2.3.5 OsLIR1的下调表达影响了植株的叶绿素含量 | 第45-47页 |
2.3.6 OsLIR1的下调表达影响叶绿体亚细胞结构的变化 | 第47-48页 |
2.3.7 OsLIR1的下调表达影响叶绿素代谢相关基因的表达 | 第48-51页 |
2.3.8 OsLIR1的下调表达影响了内囊体膜复合体的稳定性 | 第51-52页 |
2.4 讨论 | 第52-53页 |
2.4.1 OsLIR1具有光周期和节律性 | 第52页 |
2.4.2 OsLIR1是影响水稻生长发育的一个重要基因 | 第52-53页 |
2.4.3 OsLIR1影响水稻叶绿体的发育和功能 | 第53页 |
2.5 小结 | 第53-54页 |
3 Os LIR1的下调表达在黑暗条件下加速了水稻叶片的早衰和叶绿体的瓦解 | 第54-66页 |
3.1 引言 | 第54-55页 |
3.2 方法 | 第55页 |
3.2.1 植物生长条件 | 第55页 |
3.2.2 黑暗处理方法 | 第55页 |
3.2.3 叶绿素含量的测定和光合参数的检测 | 第55页 |
3.2.4 透射电镜观察叶绿体结构 | 第55页 |
3.2.5 相关基因转录水平上的定量分析 | 第55页 |
3.2.6 BN-PAGE和Western Blot分析 | 第55页 |
3.3 结果 | 第55-63页 |
3.3.1 OsLIR1下调表达在黑暗诱导后加速植株叶片衰老和低的光化学效率 | 第55-56页 |
3.3.2 OsLIR1的下调表达在黑暗条件下加速植株叶绿体的降解 | 第56-58页 |
3.3.3 黑暗诱导条件下,OsLIR1下调表达的植株中参与叶绿素代谢相关基因的表达分析 | 第58-61页 |
3.3.4 OsLIR1的下调表达在黑暗条件下降低植株光合复合体的稳定性 | 第61-63页 |
3.4 讨论 | 第63页 |
3.4.1 OsLIR1下调表达加速植株在黑暗诱导下的叶绿素降解和叶片衰老 | 第63页 |
3.4.2 OsLIR1在叶绿素蛋白复合体稳定性和叶绿体降解中的重要角色 | 第63页 |
3.5 本章小结 | 第63-66页 |
4 酵母双杂交文库的构建和Os LIR1互作蛋白分析 | 第66-82页 |
4.1 引言 | 第66页 |
4.2 材料和方法 | 第66-74页 |
4.2.1 材料及培养条件 | 第66-67页 |
4.2.2 酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第67-70页 |
4.2.3 酵母双杂交筛选 | 第70-71页 |
4.2.4 酵母质粒的提取 | 第71-72页 |
4.2.5 小量LiAc酵母转化 | 第72-73页 |
4.2.6 BiFC载体构建及转化烟草叶片表皮细胞 | 第73-74页 |
4.2.7 Pull down体外蛋白互作 | 第74页 |
4.3 结果 | 第74-80页 |
4.3.1 酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第74-75页 |
4.3.2 OsLIR1和OsCP29蛋白互作 | 第75-78页 |
4.3.3 BiFC和Pull down验证 | 第78-80页 |
4.4 讨论 | 第80-82页 |
5 OsEXPB2影响水稻植物根系的形成和地上部的生长发育 | 第82-94页 |
5.1 引言 | 第82页 |
5.2 方法 | 第82-84页 |
5.2.1 材料和生长条件 | 第82-83页 |
5.2.2 OsEXPB2的生物信息学分析 | 第83页 |
5.2.3 载体构建 | 第83页 |
5.2.4 定量PCR分析 | 第83页 |
5.2.5 胁迫处理 | 第83-84页 |
5.2.6 亚细胞定位 | 第84页 |
5.2.7 电镜和组织切片分析 | 第84页 |
5.2.8 统计分析 | 第84页 |
5.3 结果 | 第84-91页 |
5.3.1 OsEXPB2的鉴定和启动子分析 | 第84-87页 |
5.3.2 OsEXPB2的亚细胞定位 | 第87页 |
5.3.3 OsEXPB2的表达模式分析 | 第87-89页 |
5.3.4 OsEXPB2对植物根系建成的影响 | 第89-91页 |
5.4 讨论 | 第91-92页 |
5.5 本章小结 | 第92-94页 |
6 结论和展望 | 第94-98页 |
6.1 结论 | 第94-96页 |
6.2 本研究的创新点 | 第96页 |
6.3 论文不足之处及后续工作展望 | 第96-98页 |
致谢 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-118页 |
附录 | 第118-134页 |
A. 作者在攻读学位期间所发表的论文目录 | 第118页 |
B. 作者在攻读学位期间科研项目支撑 | 第118-119页 |
缩写词 | 第119-121页 |
培养基及缓冲液配方 | 第121-130页 |
载体图谱 | 第130-134页 |