摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第12-29页 |
1.1 引言 | 第12-13页 |
1.2 免疫球蛋白简介 | 第13-18页 |
1.2.1 免疫球蛋白的结构、分类和功能 | 第13-14页 |
1.2.2 血清及鸡卵黄中免疫球蛋白的结构、分类和功能 | 第14-15页 |
1.2.3 免疫球蛋白纯化发展 | 第15-18页 |
1.3 磁性微球及其在生物分析中的应用 | 第18-19页 |
1.4 疏水电荷诱导模式(HCIC) | 第19-20页 |
1.5 反相色谱(RPC) | 第20-21页 |
1.6 本论文的研究意义和研究内容 | 第21-23页 |
参考文献 | 第23-29页 |
第二章 用于抗体纯化的HCIC配基的筛选与偶联 | 第29-47页 |
2.1 引言 | 第29-30页 |
2.2 实验部分 | 第30-36页 |
2.2.1 仪器 | 第30-31页 |
2.2.2 试剂 | 第31-32页 |
2.2.3 Fe_3O_4磁性微球的制备 | 第32页 |
2.2.4 Fe_3O_4@SiO_2磁性复合微球的制备 | 第32-33页 |
2.2.5 Fe_3O_4@SiO_2@-S-MEP磁性复合微球的制备 | 第33页 |
2.2.6 Fe_3O_4@SiO_2@咪唑磁性复合微球的制备 | 第33-34页 |
2.2.7 Fe_3O_4@SiO_2@3一氨基-1,2,4-三氮唑磁性复合微球的制备 | 第34页 |
2.2.8 不同配基的选择性吸附 | 第34-36页 |
2.2.8.1 血清预处理 | 第34页 |
2.2.8.2 纯化条件 | 第34-35页 |
2.2.8.3 Fe_3O_4@-S-MEP磁性微球的吸附实验 | 第35页 |
2.2.8.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳样品前处理 | 第35页 |
2.2.8.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上样分析 | 第35-36页 |
2.2.8.6 其它配基的吸附性实验 | 第36页 |
2.2.9 表征及测试 | 第36页 |
2.2.9.1 磁学性能分析 | 第36页 |
2.2.9.2 扫描电镜分析 | 第36页 |
2.2.9.3 红外光谱表征及元素分析 | 第36页 |
2.3 结果与讨论 | 第36-43页 |
2.3.1 磁性微球的表征 | 第36-40页 |
2.3.1.1 SQUID | 第36-38页 |
2.3.1.2 SEM | 第38-39页 |
2.3.1.3 FTIR和Elementar | 第39-40页 |
2.3.2 不同配基的磁性微球对IgG的吸附选择性 | 第40-43页 |
2.3.2.1 配基的选择 | 第40页 |
2.3.2.2 以乙烯基吡啶为配基进行抗体吸附 | 第40-41页 |
2.3.2.3 以咪唑为配基进行抗体吸附 | 第41-42页 |
2.3.2.4 以3-氨基-1,2,4-三氮唑为配基进行抗体吸附 | 第42-43页 |
2.4 本章小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
第三章 以MEP为配基的疏水电荷诱导磁性吸附剂吸附机理及吸附性能的研究 | 第47-59页 |
3.1 引言 | 第47-48页 |
3.2 实验部分 | 第48-51页 |
3.2.1 仪器 | 第48页 |
3.2.2 试剂 | 第48-49页 |
3.2.3 上样pH对吸附量的影响 | 第49页 |
3.2.4 上样离子强度对吸附量的影响 | 第49页 |
3.2.5 γ-丙种球蛋白吸附动力学测定 | 第49-50页 |
3.2.6 洗脱pH对纯化纯度的影响 | 第50页 |
3.2.7 磁性吸附剂的吸附选择性 | 第50页 |
3.2.8 磁性吸附剂的重复使用性 | 第50-51页 |
3.3 结果与讨论 | 第51-56页 |
3.3.1 以γ-丙种球蛋白和HSA模拟人血清的上样pH研究 | 第51-52页 |
3.3.2 上样盐浓度对吸附平衡的影响 | 第52-53页 |
3.3.3 γ-丙种球蛋白吸附动力学测定 | 第53-54页 |
3.3.4 洗脱条件随pH的变化 | 第54-55页 |
3.3.5 磁性吸附剂的解吸附及重复使用性能的测定 | 第55-56页 |
3.3.6 磁性吸附剂吸附的选择性 | 第56页 |
3.4 本章小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
第四章 MEP磁性复合微球对实际样品中免疫球蛋白的分离纯化 | 第59-74页 |
4.1 引言 | 第59-60页 |
4.2 实验部分 | 第60-63页 |
4.2.1 仪器 | 第60-61页 |
4.2.2 试剂 | 第61页 |
4.2.3 血清和鸡卵黄预处理 | 第61页 |
4.2.4 吸附条件 | 第61-62页 |
4.2.5 以MEP为配基的磁性复合微球对实际样品中IgG及IgY的吸附 | 第62页 |
4.2.6 还原性与非还原性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第62-63页 |
4.2.7 磁性复合微球的重复使用性能测定 | 第63页 |
4.2.8 反相分离 | 第63页 |
4.2.9 质谱定性 | 第63页 |
4.3 结果与讨论 | 第63-71页 |
4.3.1 以MEP为配基的磁性复合微球对人血清中IgG的分离纯化 | 第63-66页 |
4.3.1.1 非还原性电泳图 | 第63-64页 |
4.3.1.2 还原性电泳图与非还原性电泳图比较 | 第64-66页 |
4.3.1.3 吸附剂反复使用三次后非还原性电泳图 | 第66页 |
4.3.2 鸡卵黄中IgY非还原性电泳图 | 第66-68页 |
4.3.3 反相分析 | 第68-69页 |
4.3.4 MODOL-TOF定性 | 第69-71页 |
4.4 本章小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-74页 |
硕士期间主要成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |