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疏水电荷诱导磁性吸附剂的制备及其在抗体纯化中的应用

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 绪论第12-29页
    1.1 引言第12-13页
    1.2 免疫球蛋白简介第13-18页
        1.2.1 免疫球蛋白的结构、分类和功能第13-14页
        1.2.2 血清及鸡卵黄中免疫球蛋白的结构、分类和功能第14-15页
        1.2.3 免疫球蛋白纯化发展第15-18页
    1.3 磁性微球及其在生物分析中的应用第18-19页
    1.4 疏水电荷诱导模式(HCIC)第19-20页
    1.5 反相色谱(RPC)第20-21页
    1.6 本论文的研究意义和研究内容第21-23页
    参考文献第23-29页
第二章 用于抗体纯化的HCIC配基的筛选与偶联第29-47页
    2.1 引言第29-30页
    2.2 实验部分第30-36页
        2.2.1 仪器第30-31页
        2.2.2 试剂第31-32页
        2.2.3 Fe_3O_4磁性微球的制备第32页
        2.2.4 Fe_3O_4@SiO_2磁性复合微球的制备第32-33页
        2.2.5 Fe_3O_4@SiO_2@-S-MEP磁性复合微球的制备第33页
        2.2.6 Fe_3O_4@SiO_2@咪唑磁性复合微球的制备第33-34页
        2.2.7 Fe_3O_4@SiO_2@3一氨基-1,2,4-三氮唑磁性复合微球的制备第34页
        2.2.8 不同配基的选择性吸附第34-36页
            2.2.8.1 血清预处理第34页
            2.2.8.2 纯化条件第34-35页
            2.2.8.3 Fe_3O_4@-S-MEP磁性微球的吸附实验第35页
            2.2.8.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳样品前处理第35页
            2.2.8.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上样分析第35-36页
            2.2.8.6 其它配基的吸附性实验第36页
        2.2.9 表征及测试第36页
            2.2.9.1 磁学性能分析第36页
            2.2.9.2 扫描电镜分析第36页
            2.2.9.3 红外光谱表征及元素分析第36页
    2.3 结果与讨论第36-43页
        2.3.1 磁性微球的表征第36-40页
            2.3.1.1 SQUID第36-38页
            2.3.1.2 SEM第38-39页
            2.3.1.3 FTIR和Elementar第39-40页
        2.3.2 不同配基的磁性微球对IgG的吸附选择性第40-43页
            2.3.2.1 配基的选择第40页
            2.3.2.2 以乙烯基吡啶为配基进行抗体吸附第40-41页
            2.3.2.3 以咪唑为配基进行抗体吸附第41-42页
            2.3.2.4 以3-氨基-1,2,4-三氮唑为配基进行抗体吸附第42-43页
    2.4 本章小结第43-44页
    参考文献第44-47页
第三章 以MEP为配基的疏水电荷诱导磁性吸附剂吸附机理及吸附性能的研究第47-59页
    3.1 引言第47-48页
    3.2 实验部分第48-51页
        3.2.1 仪器第48页
        3.2.2 试剂第48-49页
        3.2.3 上样pH对吸附量的影响第49页
        3.2.4 上样离子强度对吸附量的影响第49页
        3.2.5 γ-丙种球蛋白吸附动力学测定第49-50页
        3.2.6 洗脱pH对纯化纯度的影响第50页
        3.2.7 磁性吸附剂的吸附选择性第50页
        3.2.8 磁性吸附剂的重复使用性第50-51页
    3.3 结果与讨论第51-56页
        3.3.1 以γ-丙种球蛋白和HSA模拟人血清的上样pH研究第51-52页
        3.3.2 上样盐浓度对吸附平衡的影响第52-53页
        3.3.3 γ-丙种球蛋白吸附动力学测定第53-54页
        3.3.4 洗脱条件随pH的变化第54-55页
        3.3.5 磁性吸附剂的解吸附及重复使用性能的测定第55-56页
        3.3.6 磁性吸附剂吸附的选择性第56页
    3.4 本章小结第56-57页
    参考文献第57-59页
第四章 MEP磁性复合微球对实际样品中免疫球蛋白的分离纯化第59-74页
    4.1 引言第59-60页
    4.2 实验部分第60-63页
        4.2.1 仪器第60-61页
        4.2.2 试剂第61页
        4.2.3 血清和鸡卵黄预处理第61页
        4.2.4 吸附条件第61-62页
        4.2.5 以MEP为配基的磁性复合微球对实际样品中IgG及IgY的吸附第62页
        4.2.6 还原性与非还原性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第62-63页
        4.2.7 磁性复合微球的重复使用性能测定第63页
        4.2.8 反相分离第63页
        4.2.9 质谱定性第63页
    4.3 结果与讨论第63-71页
        4.3.1 以MEP为配基的磁性复合微球对人血清中IgG的分离纯化第63-66页
            4.3.1.1 非还原性电泳图第63-64页
            4.3.1.2 还原性电泳图与非还原性电泳图比较第64-66页
            4.3.1.3 吸附剂反复使用三次后非还原性电泳图第66页
        4.3.2 鸡卵黄中IgY非还原性电泳图第66-68页
        4.3.3 反相分析第68-69页
        4.3.4 MODOL-TOF定性第69-71页
    4.4 本章小结第71-72页
    参考文献第72-74页
硕士期间主要成果第74-75页
致谢第75页

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