| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 聚羟基脂肪酸(PHA) | 第14-15页 |
| 1.1.1 PHA的物化性质 | 第14页 |
| 1.1.2 PHA的生理功能 | 第14-15页 |
| 1.1.3 PHA的分类 | 第15页 |
| 1.2 PHB简介 | 第15-17页 |
| 1.2.1 PHB的性质 | 第15-16页 |
| 1.2.2 PHB的应用 | 第16-17页 |
| 1.3 PHB的合成 | 第17-19页 |
| 1.3.1 PHB的化学合成法 | 第17页 |
| 1.3.2 PHB的生物合成法 | 第17-19页 |
| 1.4 PHB生物合成途径与辅酶代谢 | 第19-22页 |
| 1.4.1 PHB生物合成途径 | 第19-20页 |
| 1.4.2 NAD激酶 | 第20-21页 |
| 1.4.3 NADH激酶 | 第21-22页 |
| 1.5 立题背景及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 实验材料与实验方法 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 菌种 | 第24-25页 |
| 2.1.3 分子生物学相关试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 化学相关试剂 | 第25页 |
| 2.1.5 DNA分子量标准 | 第25-26页 |
| 2.2 实验仪器设备 | 第26页 |
| 2.3 实验基本方法 | 第26-38页 |
| 2.3.0 培养基 | 第27-28页 |
| 2.3.1 溶液的配制 | 第28页 |
| 2.3.2 分子生物学实验操作 | 第28-38页 |
| 2.3.2.1 电转化制备与实施 | 第29页 |
| 2.3.2.2 灭菌 | 第29-30页 |
| 2.3.2.3 种子液培养 | 第30页 |
| 2.3.2.4 摇瓶培养 | 第30页 |
| 2.3.2.5 菌体收集 | 第30页 |
| 2.3.2.6 冷冻干燥 | 第30-31页 |
| 2.3.2.7 PHB含量测定 | 第31-32页 |
| 2.3.2.8 发酵液残糖和乙酸含量测定 | 第32-33页 |
| 2.3.2.9 胞内总蛋白提取分析 | 第33-34页 |
| 2.3.2.10 胞内辅酶的提取测定 | 第34-35页 |
| 2.3.2.11 荧光定量PCR | 第35-38页 |
| 第三章 NAD激酶基因组过表达对PHB合成的影响 | 第38-50页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 NAD激酶基因整合质粒的构建 | 第38-42页 |
| 3.2.1 yfjB整合质粒p80T12的构建 | 第39-42页 |
| 3.3 yfjB基因的染色体整合 | 第42-46页 |
| 3.3.1 受体菌株attB80位点的验证 | 第42-43页 |
| 3.3.2 yfjB基因的基因组整合 | 第43-46页 |
| 3.4 yfjB基因的染色体表达与phaCAB共表达体系构建 | 第46页 |
| 3.5 基因组表达NAD激酶基因的影响 | 第46-49页 |
| 3.5.1 NAD激酶基因组表达对细菌的影响 | 第46-47页 |
| 3.5.2 过表达NAD激酶基因对PHB生产的影响 | 第47-48页 |
| 3.5.3 PHB生物合成相关基因的操纵子和辅因子的转录分析 | 第48-49页 |
| 3.6 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 NADH激酶过表达对PHB合成的影响 | 第50-64页 |
| 4.1 前言 | 第50页 |
| 4.2 pos5p与PHB合成的操纵子共表达质粒构建 | 第50-53页 |
| 4.3 摇瓶实验 | 第53-57页 |
| 4.3.1 pos5p和PHB合成操纵子共表达对PHB合成的影响 | 第53-56页 |
| 4.3.2 共同作用体系中胞内辅酶含量的变化 | 第56-57页 |
| 4.4 混合表达体系对PHB合成的影响 | 第57-61页 |
| 4.4.1 NADH激酶、NAD激酶与PHB合成操纵子共表达体系构建 | 第57页 |
| 4.4.2 混合表达体系摇瓶实验 | 第57-61页 |
| 4.4.2.1 摇瓶实验设计 | 第57-58页 |
| 4.4.2.2 混合表达体系对PHB产量的影响 | 第58-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-64页 |
| 第五章 结论、创新点及展望 | 第64-66页 |
| 5.1 结论 | 第64页 |
| 5.2 创新点 | 第64-65页 |
| 5.3 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 研究成果及发表论文 | 第72-74页 |
| 作者与导师简介 | 第74-75页 |
| 附件 | 第75-76页 |
