| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 FDA批准的AD治疗药物 | 第11-12页 |
| 1.1.1 胆碱酯酶抑制药(AChEI) | 第11页 |
| 1.1.2 N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断药 | 第11-12页 |
| 1.2 β淀粉样蛋白(Aβ) | 第12-14页 |
| 1.2.1 Aβ的结构和形成 | 第13-14页 |
| 1.2.2 淀粉样蛋白的级联假说 | 第14页 |
| 1.3 阿尔茨海默病的免疫治疗 | 第14-16页 |
| 1.4 霍乱毒素B亚基(CTB) | 第16-17页 |
| 1.5 家蚕杆状病毒表达系统 | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 Aβ42肽在家蚕细胞、幼虫和蛹中的表达研究 | 第19-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-35页 |
| 2.1.1 主要材料和试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.2 配制试剂 | 第20-25页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第25-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-40页 |
| 2.2.1 转移载体质粒pBacPAK8-Aβ42和重组家蚕杆状病毒BmNPV-Aβ42的鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.2 家蚕细胞、幼虫及蚕蛹表达的Aβ42蛋白的Western blotting分析 | 第36页 |
| 2.2.3 ELISA法检测Aβ42蛋白在家蚕细胞,五龄幼虫和蛹中的表达量 | 第36-39页 |
| 2.2.4 免疫小鼠血清中抗Aβ抗体滴度的检测 | 第39-40页 |
| 2.3 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 蚕蛹表达的CTB-Aβ42融合蛋白对阿尔茨海默症的预防作用研究 | 第42-63页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-51页 |
| 3.1.1 主要材料和试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.2 配制试剂 | 第43页 |
| 3.1.3 试验方法 | 第43-51页 |
| 3.2 结果与分析 | 第51-60页 |
| 3.2.1 重组家蚕杆状病毒BmNPV-CTB-Aβ42的构建和鉴定 | 第51-53页 |
| 3.2.2 CTB-Aβ42蛋白在蚕蛹中的表达和鉴定 | 第53-56页 |
| 3.2.3 免疫小鼠体内抗Aβ42抗体滴度分析 | 第56-57页 |
| 3.2.4 水迷宫测试评价表达Aβ42和CTB-Aβ42蛋白的蚕蛹粉剂对小鼠记忆和认知能力的影响 | 第57-59页 |
| 3.2.5 B6C3-Tg小鼠脑组织切片免疫组化分析 | 第59-60页 |
| 3.2.6 B6C3-Tg小鼠脑内β淀粉样蛋白的检测 | 第60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-63页 |
| 第四章 CTB-Aβ15蛋白在家蚕细胞、五龄幼虫、蛹中的表达及蚕蛹表达的CTB-Aβ15蛋白对AD的预防作用研究 | 第63-86页 |
| 4.1 材料与方法 | 第64-72页 |
| 4.1.1 主要材料和试剂 | 第64-65页 |
| 4.1.2 配制试剂 | 第65页 |
| 4.1.3 试验方法 | 第65-72页 |
| 4.2 结果与分析 | 第72-84页 |
| 4.2.1 重组家蚕杆状病毒BmNPV-CTB-Aβ15的构建和鉴定 | 第72页 |
| 4.2.2 CTB-Aβ15在家蚕细胞、五龄幼虫和蛹中的表达和鉴定 | 第72-78页 |
| 4.2.3 在B6C3-Tg小鼠体内诱导抗Aβ抗体的产生 | 第78-80页 |
| 4.2.4 水迷宫测试评价表达Aβ42和CTB-Aβ42蛋白的蚕蛹粉剂对小鼠记忆和认知能力的影响 | 第80-81页 |
| 4.2.5 B6C3-Tg小鼠脑切片免疫组化分析 | 第81-82页 |
| 4.2.6 B6C3-Tg小鼠脑内β淀粉样蛋白的检测 | 第82-83页 |
| 4.2.7 氧化应激指标检测 | 第83-84页 |
| 4.3 讨论 | 第84-86页 |
| 第五章 CTB-Aβ42融合蛋白在大肠杆菌中的表达及小鼠免疫试验 | 第86-101页 |
| 5.1 材料与方法 | 第86-88页 |
| 5.1.1 主要材料和试剂 | 第86页 |
| 5.1.2 配制试剂 | 第86-88页 |
| 5.2 大型仪器 | 第88页 |
| 5.3 试验方法 | 第88-94页 |
| 5.3.1 pGEX-4T-1-Aβ42重组质粒的构建 | 第88-90页 |
| 5.3.2 pGEX-4T-1-CTB-Aβ42重组质粒的构建 | 第90-91页 |
| 5.3.3 融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第91页 |
| 5.3.4 通过GST亲和层析柱纯化蛋白 | 第91-92页 |
| 5.3.5 包涵体纯化 | 第92-93页 |
| 5.3.6 SDS-PAGE | 第93页 |
| 5.3.7 Western blotting检测 | 第93页 |
| 5.3.8 ELISA检测 | 第93页 |
| 5.3.9 Balc/c小鼠免疫试验 | 第93-94页 |
| 5.4 结果与分析 | 第94-99页 |
| 5.4.1 重组质粒pGEX-4T-1-Aβ42和pGEX-4T-1-CTB-Aβ42的构建 | 第94页 |
| 5.4.2 融合蛋白CTB-Aβ42的纯化和鉴定 | 第94-98页 |
| 5.4.4 小鼠血清中的抗体检测 | 第98-99页 |
| 5.5 讨论 | 第99-101页 |
| 特色不足和展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-111页 |
